瑶药四季风(丝穗金粟兰)的研究概况

龚小妹 欧春丽 张文玉 莫单丹 唐炳兰 周小雷 王 硕

广西药用植物研究所/西南濒危药材资源开发国家工程实验室，广西 南宁 530021

瑶药四季风为金粟兰科金粟兰属植物丝穗金粟兰Chloranthusfortunei(A. Gray) Solms -Laub.的干燥全株，是104种瑶药经典老班药“五虎、九牛、十八钻、七十二风”中的风类药，主产于山东、江苏、安徽 、浙江、江西、湖北、湖南、台湾、海南、广东、广西、四川、云南等地。全草或根在山东、江苏、浙江、江西等地称为“银线草”“四块瓦”； 湖南称为“四大金刚”“四大天王”；广西称为“四块瓦”“土细辛”“四子莲”，瑶药称为“肥桂崩”。中医认为，其性温味苦、辛，归肺、肝经，具有祛风散寒、解毒消肿之功，可用于风湿性关节炎、慢性肠胃炎、菌痢、风寒咳嗽、跌打肿痛、疮疖肿毒等症。瑶医认为其性温，味苦、辛，属打药，具有散寒止咳、解毒消肿、活血止痛、祛风除湿之功，可用于崩闭闷(风湿痛、类风湿性关节)，谷阿惊崩(小儿惊风)，播冲(跌打损伤)，眸名肿毒(痈疮肿毒)及囊暗(毒蛇咬伤)等症[1]。近年来，已有不少关于四季风在本草考证、化学成分、药理作用、质量标准研究等方面的报道，本文以瑶药四季风、金粟兰属和丝穗金粟兰为关键词，采用循环文献检索法检索中国知网数据库(CNKI)2000～2020年20年间收录的相关文献，对四季风的研究现状作一综述，为四季风的进一步开发研究提供参考依据。

1 本草考证

姚振生等[2]对历代本草文献中记载的四季风进行了系统的考证，结果发现，《普济本事方》、《本草拾遗》、《证类本草》、《大观本草》、《本草图经》、《本草纲目》所载的剪草、翦草，均为金粟兰科金粟兰属植物丝穗金粟兰 (瑶药四季风)Chloranthusfortunei(A.Gray) Solms-Laub.，该研究澄清了有关同物异名等混淆问题。

2 化学成分

2.1 挥发油类化学成分 李石蓉等[3]采用GC-MS-DS联用技术对四季风挥发油类化学成分进行了分析研究，分离和鉴定出了31种化合物，共占其挥发油总量的97.8 %；萜类化合物较多(25种)，以单萜和倍半萜为主，其中金粟兰内酯等倍半萜类化合物是四季风的主要指标性成分，且这些成分具有抗菌、抗肿瘤的活性，因此可能是四季风的有效成分。

2.2 单倍半萜类化学成分 四季风中含有的单倍半萜类化合物有：金粟兰内酯C(chloranthalactone C，1)，白术内酯III(atractylenolide III，2)，金粟兰酮(chloranthatone，3)，白术内酰胺(atractylenolactam，4)，银线草菖蒲二烯醇((shizuka-acoradienol，5)[4-6]，党参内酯(codonolactone，6，粗叶木内酯A(1asianthuslactone A，7)，伊斯坦布尔马芹素A(istanbulin A，8)[7]；金粟兰诺苷A(chloranoside A，9)，银线草内酯(shizukanolide) C(10)、F(11)、G(12)、H(13)[8]。见图1。

2.3 二聚倍半萜类化学成分 四季风中含有的二聚倍半萜类化合物有：银线草醇(shizukaol)A(14)、B(15)、C (16)、D(17)、E(18)、F (19)、G(20)、I(21)、J(22)、K (23)、L(24)、M (25)、N(26)、O(27)、P(28)、银线草醇(shizukaol，29)，13'-乙酰银线草醇C (13'-acetylshizukaol C，30)、环银线草醇A(cycloshizukaol A，31)，多穗金粟兰萜酯B(chloramuhilide B)(32)，9-O-β-吡喃葡萄糖基环银线草醇A(9-O-β-glucopyranosylcycloshizukaolA，33)；丝穗金粟兰内酯(chlorafortulide，34)，宽叶金粟兰醇D(henriol D，35)[8-9]。

近年来，Wang X C等[10-11]对四季风中的倍半萜类化合物进行了深入系统的研究，从中发现了12个二聚倍半萜类新化合物，fortunilide A(36)，B(37)，C(38)，D(39)，E(40)，F(41)，G(42)，H(43)，I(44)，J(45)，K(46)，L(47)和3个骨架新颖的乌药烷型二聚倍半萜类化合物fortunoid A(48)，B(49)，C(50)，并阐明了3个新骨架二聚倍半萜化合物的生源合成途径为两分子的倍半萜通过D-A反应形成，其中化合物fortunoid A是乌药烷型二聚倍半萜的重排产物，而化合物fortunoid B和C是乌药烷型倍半萜和桉叶烷型倍半萜的二聚体，此外，他们还通过圆二色谱激子手性法确定了3个新骨架二聚倍半萜化合物的绝对构型。

2.4 其他化学成分 异秦皮啶(isofraxidin)；β-谷甾醇(β-sitosterol)[4,7]。

3 药理作用

3.1 抗肿瘤作用 国内学者[12-13]采用重组人表皮生长因子(EGF，25ng/ml)诱导法建立了人乳腺癌MDA-MB-231，MDA-MB-468细胞上皮间质转化(EMT)模型，并采用蛋白免疫印迹法 (WestemBlot)检测了从四季风中提取的倍半萜类化合物LSE-3处理后的细胞内Snail、Slug和p53等相关信号分子表达情况，结果显示，与空白对照组比较，EGF诱导组Snail、Slug蛋白表达明显升高，p53蛋白显著降低(P<0.05)，与EGF诱导组比较，不同浓度LSE-3组Snail及Slug蛋白表达显著降低，而p53蛋白显著升高(P<0.05)，且都与LSE-3呈剂量依赖关系，表明LSE-3可逆转由EGF诱导的人乳腺癌MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞发生EMT，同时也能降低人乳腺癌MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞发生EMT后的侵袭能力。国外学者[14]也证实，四季风中的倍半萜类化合物金粟兰内酯A，B，C，D 能抑制小鼠淋巴肉瘤细胞(L-5178Y)，其ID50分别为2.5 μg/mL、1～2.5 μg/mL、20 μg/mL、50 g/mL，表明金粟兰内酯A，B具有中等度的细胞毒活性。

3.2 抗疟作用 Zhou B等[10-11]采用SYBR-Green法检测了四季风中的3个骨架新颖的二聚倍半萜化合物fortunoids A，B，C和12个乌药烷型新二聚体倍半萜化合物对恶性疟原虫Dd2株(氯喹耐药)的抗疟活性，结果显示，化合物fortunoids A，B，fortunilide A表现出中等度的抗疟活性，IC50值分别为(10.2±0.37)μM、(0.5±0.01) μm、(5.2±0.6) nM，青蒿素阳性对照组IC50值为(4.0±4.2) nM，其他化合物作用不明显。

3.3 抗真菌作用 四季风挥发油对絮状表皮癣菌、石膏样皮癣菌和石膏样小孢子菌均有一定的抑制作用，对絮状表皮癣菌、石膏样皮癣菌均有一定的杀灭活性。最低抑菌浓度(MIC)分别为(0.1 %、0.1 %、0.2 %)，最低杀菌浓度(MSC)分别为(0.2 %、0.1 %)[15]。

3.4 抗炎作用 四季风中的倍半萜类化合物12、14、16、44、109、155和167对脂多糖所致的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW 264.7) NO的生成具有抑制作用，IC50分别为0.15、7.22、1.95、3.68、1.95、7.01、1.90 μmol·L-1[16]。

3.5 毒性和不良反应 四季风具有一定的毒性，成人每日煎服安全剂量为3～6 g，剂量过大可产生毒副作用甚至死亡；其中毒损害是全身性的，肝、肾及全身血管为毒性作用的主要靶器官与组织，严重可导致肝细胞的弥漫性坏死与肾脏组织的变性坏死，致毒的机制可能为其毒性成份破坏了凝血机制或作用于微小血管而导致了弥漫性血管内凝血(DIC )的发生；也可能为其毒性成份直接损害了心肌细胞或作用于生命中枢细胞，破坏了心肌或脑干，从而导致了心力衰竭或中枢性呼吸衰竭的发生；此外，毒性成份氰苷类或其他毒性物质可能是导致窒息的发生的主要原因[17-18]。

4 质量标准研究

姚淦等[19]报告了四季风的形态特征及疗效，并提供了分种检索表，为该药用植物资源的开发利用提供了依据。姚振生等[20]对四季风的植物形态、药材性状、显微特征包括组织结构、粉末特征等进行了研究，为四季风药材的鉴别开发提供了科学依据。罗杠等[21]采用HPLC法测定了四季风中香豆素类成分异嗪吡啶及倍半萜内酯类成分长尾粗木叶内酯和党参内酯 3种成分的含量，为四季风药材的质量控制提供了重要参考。龙海荣等[22]对四季风药材的生药性状、显微鉴别、薄层鉴别、水分、灰分、浸出物等进行了研究，并对绿原酸、异嗪皮啶及迷迭香酸含量进行了测定，在此基础上建立了四季风药材的质量标准，可用于四季风药材的质量控制。

5 展望

金粟兰属 (Chloranthusswartz)植物在我国约有13种5变种，广泛分布于长江以南各省，尤以西南地区居多，大多以全草入药，具有祛风散寒、舒筋强骨、活血散瘀、消肿止痛之功效，常用于治疗跌打损伤、瘀血肿痛、风湿性关节炎等疾病。该属植物中作为药用的有金粟兰Chloranthusspicatus(Thunb.) Makino、丝穗金粟兰Chloranthusfortunei(A.Gray)Solms、多穗金粟兰ChloranthusmultistachysPei、宽叶金粟兰ChloranthushenryiHemsl、全缘金粟兰Chloranthusholoste(Hand Mazz) Peiet Shan、及己Chloranthusserratus(Thunb.)Roem.et Schuh、银线草ChloranthusJaponicusSieb等[23-25]。研究表明，该属植物的化学成分非常相似，主要有挥发油类、黄酮类、倍半萜类、香豆素类、木脂素类、生物碱类等，药理活性主要有抗肿瘤、抗菌、利胆、增强免疫、抗病毒、抗溃疡、镇痛、收缩子宫等，尤其在抗肿瘤方面具有较高的药用价值[26-31]，如草珊瑚的挥发油和总黄酮被证明是抗肿瘤的有效部位[32]；银钱草的主要成分金粟兰内酯A-E及苍术内酯II对小鼠淋巴肉瘤细胞L-5178Y有抑制作用；宽叶金粟兰的二萜类化合物半日花烷A对结肠癌HCT-8、BEL-7402和BGC-823等细胞株增殖具有抑制作用[33]。

四季风为金粟兰科金粟兰属植物丝穗金粟兰Chloranthusfortunei(A. Gray) Solms -Laub.的干燥全株，药用资源非常丰富，瑶族民间应用也非常广泛，常配伍用于治疗寒痹风痛、四肢麻木、闭经、毒蛇咬伤、痈疮疔肿、胃痛、风湿关节炎及小儿高热惊风等疾病，但一直未引起人们的足够重视[34]。近年来，随着四季风近缘属草珊瑚属植物草珊瑚的成功开发利用、金粟兰属植物民间药用资源的深入调查以及该属植物相似化学成分和药理活性的发现，人们逐渐对四季风的开发利用引起了关注[35]。目前，对四季风化学成分的研究主要集中在倍半萜类化合物，其它成分的研究报道较少，药理活性尚未进行深入系统的研究，作用机理还不明确，此外，四季风的毒性成份、中毒机制目前仍是空白, 中毒病理也仅仅是作了很简单的研究, 这些都有待于进一步的研究与探讨。