酸枣仁种子质量分级标准研究

韩亚平 胡利峰 肖淑贤 赵 丹 李 军 陈 芳 赵路兵

（山西振东道地药材开发有限公司，长治 047100）

酸枣仁为鼠李科植物酸枣（Ziziphus jujuba Mill.var.spinosa（Bunge）Hu ex H.F.Chou）的干燥成熟种子，主产于河北、陕西、山西、辽宁、河南等地[1]。主要用于治疗虚烦不眠、惊悸多梦、体虚多汗、津伤口渴等症，为中医首选的镇静安神药[2]。随着酸枣仁的医疗保健功效被认同，市场上以次充好的酸枣仁也越来越多[3]。优良的种子种苗是中药材质量优质稳定的基础，中药材良种的选育、繁育、使用是中药材规范化生产的“源头工程”[4]。作为中药材种植的源头，中药材种子质量直接关系到中药材的产量和质量。然而，目前对于酸枣仁的研究多限于有效成分的含量及药理作用方面，对于酸枣仁种子质量的研究几乎没有。本研究参考GB/T 3543.1～3543.7—1995《农作物种子检验规程》[5]，通过在全国酸枣仁主要产区收集多个批次的酸枣仁种子，在建立酸枣仁种子检验方法的基础上，开展酸枣仁种子的质量分级标准研究，为制定酸枣仁种子检验规程提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料本试验通过购买和主产区采集方式，收集山西、山东、河北等酸枣主产区的酸枣仁种子19 份，每份种子样品大于1000g，各样品信息见表1。

表1 酸枣仁种子的产地来源

1.2 方法

1.2.1 扦样参照GB/T 3543.2—1995《农作物种子检验规程扦样》执行[5]。

1.2.2 净度分析采用“四分法”取试验样品，酸枣仁种子净度分析中送检样品的最小重量为100g（至少含有2500 粒种子）。送检样品的重量应超过净度分析量的10 倍，至少1000g。在净度分析台上将每份试验样品按净种子、其他植物种子和杂质（无生命杂质、破裂或受损伤的种子等）分别称重，重复3次，以g 表示，计算净种子的百分率。

1.2.3 重量测定分析净度分析后，采用百粒法、五百粒法和千粒法测定种子千粒重[6]。将全部净种子用四分法分成4 份，每份中随机取种25 粒，共100 粒为一组，重复5 次，用百粒法计算种子千粒重；将全部净种子用四分法分成4 份，每份中随机取种125 粒，共500 粒为一组，重复3 次，用五百粒法计算种子千粒重；将全部净种子用四分法分成4 份，每份中随机取种250 粒，共1000 粒为一组，重复3 次，用千粒法计算种子千粒重。

1.2.4 水分测定分析采用低恒温（105℃）烘干法测定种子含水量[7]。试验步骤如下：（1）打开恒温箱使之预热至105℃，烘干洁净铝盒并迅速称质量记录；（2）迅速称量需检测的样品，每个批次3 个重复，每个重复称取5g 样品，称量后放于标记好的铝盒内，一并放入干燥器；（3）烘箱温度达到105℃时，把铝盒盖子放在铝盒基部，打开烘箱，快速放入箱内上层，保证铝盒水平分布并迅速关闭烘箱门，待烘箱温度回升至105℃时，开始计时；（4）4h 后取出铝盒迅速放入干燥器中，待冷却至室温后进行称重。3 个重复的均值即为该批次的含水量。

种子含水量=（M2-M3）/（M2-M1）×100%，公式中M1为铝盒和盖的质量；M2为铝盒和样品烘干前的质量；M3为铝盒及样品烘干后的质量。

1.2.5 生活力测定分析采用TTC 检测法测定种子生活力[8]。TTC 染色前必须将酸枣仁种子进行预先湿润，从充分混匀的净种子中随机取3 份重复，每份50 粒种子，种子在25℃条件下，浸泡处理24h；将酸枣仁种子用刀纵切两半，一半放入0.5%的TTC溶液中，溶液浸泡以淹没种子为宜，染色温度40℃，染色时间4h。染色结束后，用清水冲洗种子数次，然后观察染色情况，解剖镜下观察并统计胚乳切面和胚染色情况，判断酸枣仁种子是否有活力。

1.2.6 发芽率测定分析从每个批次的净种子中随机选取50 粒放入培养皿中，每批种子做3 次重复，加水适量，置于25℃培养箱中发芽，每天根据干湿情况加水，并记录种子发芽状况，3 次重复求均值，即为发芽率。

2 结果与分析

2.1 净度测定结果由表2 可知，全国不同地区的19 份酸枣仁种子均存在其他杂质，净度在73.88%～99.49%之间，各试样增失差距均没有偏离原始质量的5%，为有效数据。19 个不同地区酸枣仁种子的净度有明显差异。其中，样品10 种子因破损度最高，达25.68%，导致种子净度最低，其值为73.88%；样品16 破损程度最小为0.41%，种子净度最高，其值为99.49%。样品10 的酸枣仁种子破损率高的原因可能是这批种子成熟度不够，种子硬实度不达标，导致加工时破损严重，从而严重影响种子净度和种仁质量。所以，建议酸枣在采收时尽量不要抢青，特别是作为种源更要保证质量。

表2 不同地区酸枣仁种子净度分析

2.2 重量测定结果由表3 可知，酸枣仁种子的千粒重均在34～52g 之间，3 种测定方法中百粒法有3 份样品的变异系数（变异系数=（标准差/平均值）×100%）大于4%，故不考虑百粒法作为酸枣仁种子重量的检测方法；采用五百粒法和千粒法称量时，各样品的变异系数都在4%以下。因此，酸枣仁种子重量测定采用五百粒法和千粒法都是可以的，本研究采用五百粒法作为酸枣仁种子重量的检测方法。其中，样品7 酸枣仁种子大而饱满，五百粒重高达25.72g，样品17 酸枣仁种子五百粒重最小，为17.17g。

表3 不同地区酸枣仁种子重量测定结果

2.3 发芽率、生活力和水分测定结果由表4 可以看出，样品16 的发芽率最高，为97.00%；样品4的发芽率最低，为38.33%。酸枣仁种子含水量为7.81%～14.59%不等，其中样品14 的种子含水量最高，为14.59%；而样品17的酸枣仁种子含水量最低，为7.81%。种子生活力结果显示：样品14 种子生活力最高，为96.67%；样品18 的种子生活力最低，为48.00%。孙丽娜等[9]研究发现，种子成熟度差、未经严格筛选、贮存时间过长，均能导致发芽率低。样品18 种子的生活力最低，可能是因为种子的成熟度不够所致。

2.4 系统聚类法分析由图1 可以看出，从横坐标10 处进行划分，19 个不同地区的种子规律地分成了3 个类群，其中样品6、19、14、16、1、15、17、13 归为一类；样品4 和18 归为一类；样品8、11、5、12、2、9、3、7、10 归为一类。以发芽率为分级第一参考指标，综合考虑净度、五百粒重、含水量、生活力指标，使用SPSS 软件作K 聚类分析，将19 个批次的酸枣仁种子分为3 级，最终分级标准见表5。

表4 不同地区酸枣仁种子发芽率、种子生活力和含水量分析 （%）

图1 全国19 个不同地区酸枣仁种子系统聚类分析树状关系图

3 讨论

3.1 分类依据在种子分级的5 项指标中，发芽率和五百粒重2 项指标作为主要分级依据，其中发芽率为重中之重，因为发芽率的高低直接决定了种子的实际利用价值，依据发芽率可以计算出田间出苗率，决定实际种子播种量，参考价值很高。五百粒重可以反映种子饱满度和种子成熟度等。另外，河南洛阳（样品8）和辽宁二十家子（样品17）两个批次的酸枣仁种子五百粒重小，可能与种子含水率低和采收期有关，武延生[10]研究表明酸枣成熟后期酸枣仁和核壳质量呈减小趋势，且后期种壳变硬，保护种仁不受伤害。

种子生活力是种子发芽和出苗率、幼苗生长的潜势、植株抗逆能力和生产潜力的总和，是种子品质的重要指标[11]。但种子生活力是以净种子测定的，离不开净度分析。含水量、净度、种子生活力3 个指标作为次要分类依据，种子净度反映清洁度、纯度，含水量反映种子对储藏条件的要求，净度和含水量也可以通过再加工来提高质量。

3.2 系统聚类分析法此方法是利用数学原理的分级方法，是属于数据类的平均划分，更适合于判断物体的内在品质，因此使用此法制定的酸枣仁种子分级标准是科学的、可行的。

3.3 完善种子质量标准体系不同来源、不同批次的酸枣仁种子质量差异悬殊，种子质量最重要的指标发芽率相差甚多，最低值为38.33%，最高可达97.00%，因此，必须加强药材种子繁育和加快制定酸枣仁种子质量控制标准体系。

3.4 适时采收所采购的种子破损程度较为严重，小的占比0.41%，严重的占比25.68%。一可能是加工过程中因操作不当引起的；二则更可能是种子成熟度不够，酸枣“被抢青”所致。所以，在此再次呼吁，请广大药材经营者一定要尊重自然，每种药材都有最佳的采收时期，请尽量在适宜的采收期内进行采摘，莫要为了一己私利，降低药材药效和种子质量。

表5 酸枣仁种子分级标准