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姜黄素对人乳腺癌MCF-7 细胞抗增殖作用的探讨

2021-02-26田丽丽闫全志索菲娅赵慧英

世界最新医学信息文摘 2021年3期
关键词:光吸收姜黄抑制率

田丽丽,闫全志,索菲娅,赵慧英

(内蒙古自治区肿瘤医院,内蒙古 呼和浩特)

0 引言

随着饮食结构及社会压力等因素,肿瘤发病率逐年上升,其中乳腺癌成为威胁女性健康的恶性肿瘤,目前治疗乳腺癌的主要方法是以化学治疗为主。现行的化疗药物存在毒副作用大、患者生活质量下降等缺点,因此替代化疗药物,找到毒副作用小、疗效好的新型抗肿瘤药物有必要的现实意义。姜黄素(Curcumin)是从姜黄的根茎中提取的酚性色素。近年来,诸多研究表明,姜黄素具有显著的抗癌活性[1],对体内及体外肿瘤的生长具有较好的抑制作用,同时可以诱导肿瘤细胞凋亡,目前已成为肿瘤预防和治疗的一个研究热点[2]。本实验通过观察人乳腺癌细胞MCF-7 细胞在不同姜黄素浓度作用条件下增殖抑制变化,为姜黄素在抗乳腺癌的深入研究提供一定的理论基础与实验依据。

1 内容与方法

1.1 一般资料

MCF-7 细胞购自上海生物制品研究所。姜黄素购于Sigma 公司,以少量二甲亚砜(DMSO)溶解姜黄素粉剂,配成1 mmol/L 溶液(储备液),放置-20 ℃冰箱保存,使用时稀释至所需浓度(DMSO 终浓度<0.1%)。

1.2 方法

选取对数生长期且状态良好的乳腺癌MCF-7 细胞,将细胞消化、计数,稀释终浓度为5×l04/mL,接于96 孔板中,每孔10 μL,放入细胞培养箱中培养;待细胞贴壁后加入姜黄素,使其终浓度分别为10 μM/L、20 μM/L、40 μM/L、80 μM/L,同一浓度设定3 个平行复孔,设细胞对照组;在细胞培养箱中培养时间分别为24 h、48 h、72 h,每孔加入5 mg/mL 的MTT 15 μL,培养4 h,弃上清液,每孔加入150 μL 的DMSO,酶标仪震荡3 min,570 nm 处检测吸光值。

实验结果按以下公式计算:细胞存活率=实验组光吸收值/对照组光吸收值×100%。

药物抑制率=(1-实验组光吸收值/对照组光吸收值)×100%。

1.3 统计学方法

使用EXCEL 分析软件,实验结果以均数±标准差表示,应用t检验统计方法,以P<0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 姜黄素作用MCF-7 细胞的OD 值

对照组的细胞随着时间的延长明显增长,24 h 后,20 μM/L、40 μM/L、80μM/L 组的OD 值与对照组有显著性差异(P<0.05),10 μM/L 与对照组相比较,非显著性差异(P>0.05);48 h 后,各实验组的MCF-7 细胞均受到姜黄素的抑制,与对照组比较均有显著性差异(P<0.05);72 h 细胞抗增殖作用更为明显,与对照组相比,具有显著性差异(P<0.05),随着姜黄素浓度的增加,抑制作用增强,具有剂量依赖性的趋势,结果见表1。

随着姜黄素浓度的升高及作用时间的延长,细胞的存活率呈下降趋势,具体见图1。

图1 姜黄素作用MCF-7 细胞的存活率(%)

表1 姜黄素作用MCF-7 细胞的OD 值(±s, μM/L)

表1 姜黄素作用MCF-7 细胞的OD 值(±s, μM/L)

注:a:与对照组比较,P<0.05;b:与10 μM/L 比较,P<0.05;c:与20 μM/L 比较,P<0.05;d:与40 μM/L 比较,P<0.05。

时间24 h 48 h 72 h对照组 0.942±0.029 1.456±0.065 1.696±0.063实验组10 0.941±0.027 0.771±0.081a 0.862±0.099a 20 0.668±0.0771ab 0.717±0.044a 0.795±0.029a 40 0.557±0.042ab 0.498±0.067abc 0.493±0.108abc 80 0.416±0.072abcd 0.401±0.085ab 0.263±0.105abc组别

2.2 姜黄素对MCF-7 的细胞抑制率

不同浓度姜黄素在不同时间内对细胞的抑制程度不同,其抑制率与浓度呈正相关,与时间亦呈正相关(P<0.05),结果见图2。

图2 姜黄素对MCF-7 的细胞抑制率(%)

2.3 姜黄素对MCF-7 的细胞作用不同时间的IC50 值

三个不同时间点内,MCF-7 细胞对姜黄素有剂量依赖的趋势,其IC50值在随着时间的延长有下降趋势,以48h 作用点尤为明显,具体结果见图3。

图3 姜黄素对MCF-7 的细胞作用不同时间的IC50 值(μM/L)

3 讨论

姜黄素是从中药姜科植物根茎里提取的化合物,能特异性的诱导乳腺癌细胞凋亡、影响乳腺干细胞以及抑制乳腺癌细胞代谢等影响,在预防乳腺癌及协同化疗药物治疗方面能有效的促进细胞的凋亡。姜黄素的药理作用很多,如具有消炎、抗氧化、抗增殖及抗肿瘤[3]等作用,抗癌谱较广[4]、毒副作用小,是一种非常有前景的抗肿瘤新药。本实验研究发现,姜黄素对MCF-7 细胞具有较好的抗增殖作用,细胞存活率与浓度及时间呈负相关;不同浓度的姜黄素在不同时间内对细胞的抗增殖程度不同,其抑制率与浓度呈正相关,与时间亦呈正相关;在不同的时间点其IC50值呈下降趋势。

综上所述,姜黄素对MCF-7 细胞有很好的抗增殖作用,姜黄素在抗乳腺癌的深入研究提供一定的理论基础与实验依据。

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