新疆喀什地区犬细粒棘球绦虫感染情况的调查

2021-02-23努尔麦麦提麦麦提敏姜水兵郭良帅

湖北畜牧兽医 2021年11期

努尔麦麦提·麦麦提敏，姜水兵，郭良帅

（塔里木大学动物科学学院，新疆阿拉尔 843300）

棘球蚴病（Echinococcosis）俗称包虫病（Hydatidosis），是人畜体内寄生的棘球属绦虫幼虫引起的一种严重危害人民健康和畜牧业发展的人畜共患寄生虫病［1］，我国将其列为二类动物疫病［2］。我国是世界上棘球蚴病流行严重的国家之一，主要流行囊型棘球蚴病与泡型棘球蚴病，由细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫感染所致［3］。其中，细粒棘球绦虫中绦期幼虫细粒棘球蚴寄生在人和牛、羊等草食动物的肝、肺和其他器官，导致牛、羊等家畜和人的细粒棘球蚴病；成虫细粒棘球绦虫寄生在犬科动物的小肠内，引起犬科动物的细粒棘球绦虫病。细粒棘球绦虫对中间宿主的危害严重，引起寄生部位发生机械性压迫，囊液毒素作用及其因溢出而导致过敏反应等临床症状［4］，对终末宿主的临床症状不太明显，主要受虫体数量的影响。犬与羊、牛、人等中间宿主的关系密切，随犬粪排出的孕节和虫卵能够污染人和动物的生活环境，增高人畜被虫卵感染的风险，从而引起严重的公共卫生问题。因此，犬只的管理、驱虫和定期检测对包虫病的预防与控制有重大意义。本次调查从喀什地区各县（市）采集犬粪样品共760份，检测细粒棘球绦虫犬粪抗原，旨在掌握喀什地区2019 年犬细粒棘球绦虫的感染状态，从而对本地区包虫病的防控和研究工作提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

样品：分别从喀什地区各县（市）采集新鲜（排粪24 h 内）犬粪样品（10 g/份）共760 份，分别装入20 mL 离心管，记录标记，于-80 ℃冰箱冷冻7 d，室温解冻，取1 g 犬粪样品加入1 mL 工作浓度的稀释液，混匀形成悬浊液，3 000 r/min 离心10 min，取上清备用。

试剂：细粒棘球绦虫犬粪抗原ELISA 检测试剂盒，重庆澳龙生物制品有限公司（生产批号：20190502）。

仪器：HBS-1096A 型酶标分析仪（南京德铁实验设备有限公司）；H-1650-W 型台式离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）；DHP-9080 型恒温培养箱（上海一恒科学仪器有限公司）。

1.2 试验方法

（1）按照说明书要求配好试剂后，取出检测板，记录加样顺序。

（2）按顺序依次加入2 孔阳性、2 孔阴性对照和待检样品，每孔加入100 μL，覆封板膜，置37 ℃的恒温培养箱孵育30 min。

（3）孵育完后取出检测板，弃去板内液体，每孔200 μL 洗涤液静置1 min 后弃去板内液体，拍干。重复3次。

（4）每孔加入100 μL 工作浓度的单抗液，覆封板膜，放置37 ℃的恒温培养箱孵育30 min。重复步骤（3）。

（5）每孔加入工作浓度的酶标抗体100 μL，覆封板膜，放置37 ℃的恒温培养箱孵育30 min。重复步骤（3）。

（6）底物溶液A 与底物溶液B 等体积混合后每孔加入100 μL，避光显色10 min。

（7）每孔加入50 μL 终止液，10 min 内在酶标仪上测定450 nm波长处的吸光度值。

1.3 结果判定

同时满足阳性对照OD450nm平均值≥0.60，且阳性对照OD450nm平均值＞阴性对照OD450nm平均值的2.1倍，方可进行判定。当阴性不足0.15时按0.15计算。

阳性判定：样品OD450nm值＞阴性对照OD450nm平均值×2.1。

阴性判定：样品OD450nm值≤阴性对照OD450nm平均值×2.1。

2 结果与分析

通过细粒棘球绦虫犬粪抗原ELISA检测试剂盒对喀什地区所采集的760 份犬粪样品进行犬粪抗原ELISA 检测，检测结果显示，共27 份犬粪样品检出阳性，总感染率为3.55%（27/760）。其中巴楚县、塔什库尔干县、岳普湖县、叶城县犬粪抗原检测呈阳性，阳性率为1.11%～8.33%，其余县（市）未检出阳性样品。760份样品中，从农区采集的389份样品共检测出8 份阳性样品，阳性率为2.06%（8/389），从牧区（塔什库尔干县）采集的371 份样品共检测出19份阳性样品，阳性率为5.12%（19/371）（表1）。

表1 喀什地区犬细粒棘球绦虫的感染情况

3 讨论

新疆是我国包虫病主要流行地区之一［5］，伍卫平等［6］2012—2016 年对新疆、西藏等西部9 个省（自治区）进行棘球蚴病抽样调查，调查显示人群总检出率为0.51%，家畜检出率为4.68%，犬检出率为4.25%，初步明确了我国棘球蚴病流行区的范围和流行程度。祖力胡马力·尼拉木丁等［7］在2007—2010 期间对全疆犬进行检测调查，结果显示，全疆总感染率为28.0%，其中喀什地区的感染率为45.0%。努斯来提等［8］在2014 年进行了新疆14 地州棘球蚴病感染情况调查，结果显示全疆范围内犬的总感染率为9.84%，其中喀什地区犬的感染率为23.33%。赵江山等［9］在2012—2013 年进行的全疆不同生产方式条件下犬细粒棘球绦虫感染情况调查，结果显示农区感染率为1.98%，牧区感染率为3.75%。说明我国西部地区人、牛、羊等的包虫病检出率高，无论是人还是动物方面都应做好防控，保护人畜生命安全。

本次调查显示，喀什地区犬细粒棘球绦虫的总感染率为3.55%（27/760），感染程度较为严重，而且不同县（市）、农区和牧区之间感染程度的差别较大。其中，巴楚县感染率最高（8.33%），其次为塔什库尔干县（5.12%），岳普湖县（5.00%）和叶城县（1.11%），其余的县（市）均未检测出阳性样品；阳性县占喀什地区总县（市）的36.36%（4/11）；农区和牧区相比，牧区感染率（5.12%）高于农区（2.06%）。本次调查结果与祖力胡马力·尼拉木丁等［7］、努斯来提等［8］对新疆地区犬进行的调查结果对比发现，曾经喀什地区犬细粒棘球绦虫的感染率高于全疆的平均感染率，2019 年喀什地区犬细粒棘球绦虫的感染率比往年有所下降，感染率随年数的增长而降低，说明喀什地区包虫病的防控工作比往年有所进步。本次调查的农区犬（2.06%）和牧区犬（5.02%）感染率与赵江山等［9］的调查结果对比发现，2 次调查结果都显示牧区感染率高于农区，说明牧区包虫病的防控工作更应该抓紧。

根据本次调查中犬只感染数量可以看出，犬的感染率比往年有所降低，而且部分地区达到了阳性率为零的水平。棘球蚴病被纳入《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020）》，在新疆地区实施包虫病免疫及犬驱虫以来，喀什地区犬细粒棘球绦虫感染率转变为下降态势。各县（市）应不断加强防控工作，避免包虫病流行率的再次增长。