脐带血PCT、TNF⁃α、IL⁃6对新生儿宫内细菌感染的诊断价值

董景玉

新生儿宫内感染是儿科常见病、多发病，其致病原包括细菌、病毒、螺旋体等［1］。新生儿宫内感染是由病原微生物侵犯导致羊水、胎膜、胎盘感染所致，研究表明，宫内细菌感染会导致胎儿脑白质受损，而致新生儿脑白质软化，情况严重者甚至将发生死亡［2］。早期诊断对于促使临床及早干预，降低新生儿的死亡率具有重要的价值，然而在新生儿宫内细菌感染的诊断中，仍缺乏有效的检测手段［3］。脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液，由于脐带血检测具有安全无创、方便的特点，故其在早期判断新生儿是否存在宫内感染的价值引发热议［4］。目前，主要用于新生儿宫内细菌感染的实验室指标主要有白细胞介素⁃6（Interleukin，IL6）以及肿瘤坏死因子⁃α（Tumor necrosis factorα，TNF⁃α）［5］。此外，研究显示降钙素原（procalcitonin，PCT）在机体出现感染后可明显上升，因此亦可作为早期细菌感染的敏感性指标之一［6］。本研究就脐带血PCT、TNF⁃α 联合IL⁃6 检测对新生儿宫内细菌感染的诊断价值进行研究，旨在为新生儿宫内细菌感染的诊断提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月至12月在本院接诊的有宫内细菌感染高危因素的新生儿，最后纳入符合要求的新生儿共98 例，并按照新生儿感染的结局将其分为两组，其中感染组45 例，无感染组53 例。本研究经医院伦理委员会批准通过。两组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）见表1。

表1 两组一般资料比较［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general data between 2 groups［n（%），（±s）］

表1 两组一般资料比较［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general data between 2 groups［n（%），（±s）］

组别感染组无感染组t/χ2值P 值n 性别男30 33 0.205 0.650女45 53 15 20分娩方式顺产29 32 0.171 0.679剖宫产16 21妊娠时间27～37 周15 10 2.680 0.102 38～42 周30 43体重（kg）3.21±0.51 3.15±0.53 0.568 0.571母亲年龄（岁）31.20±1.74 31.15±1.71 0.143 0.887

纳入标准：①有新生儿宫内感染高危因素之一［7］：胎膜早破18小时；羊水Ⅲ度粪污染或者有臭味；胎儿宫内窘迫；新生儿在出生时有过窒息情况发生；母亲在妊娠晚期出现发热或者血CRP、WBC等升高。②孕妇及家属知情同意，并签署知情同意书；③临床资料完整。排除标准：①合并有重大内科疾病史的孕妇分娩的新生儿；②合并有生殖道畸形的孕妇娩出的新生儿。

1.2 研究方法

收集所有研究对象临床资料，比较感染组和无感染组脐带血PCT、TNF⁃α、IL⁃6 表达水平差异，分别对比PCT、TNF⁃α、IL⁃6 单独及联合用于诊断宫内细菌感染的临床诊断性能（灵敏度、特异性及准确度）；采用ROC 曲线分析PCT、TNF⁃α、IL⁃6 单项及联合检测水平对宫内细菌感染的预测价值。

1.3 诊断标准

细菌感染的诊断标准［8］：血培养为阳性，临床表现为皮肤发灰、呼吸暂停、呼吸＞60 次/min、呼吸功能不全、血压降低、嗜睡、心动过缓或过速、肌张力减低，出生2 d 内CRP＞10 mg/L。

1.4 检测方法

在新生儿娩出后的10 min 内，收集两组的脐带血，离心（3 500 r/min，5 min，离心半径8 cm）后取分离血清。分离出血清后置于罗氏E411 全自动电化学发光分析仪中检测PCT 水平。通过酶联免疫吸附法（Enzyme Linked Immune Sorbent Assay，ELISA）测定两组的脐带血TNF⁃α、IL⁃6 浓度，北京贝瑞恩科技有限公司提供试剂并进行检测。根据ELISA试剂盒说明书步骤操作。脐带血PCT≥0.5 ng/mL计为阳性结果，IL⁃6＞23 ng/L计为阳性结果，TNF⁃α＞4.3 ng/mL 计为阳性；三个指标联合检测判断阳性结果时其中一个出现阳性结果则计为阳性［9⁃10］。

1.5 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件进行统计分析，计数资料以n（%）表示，采用χ2检验；计量资料采用（）描述，行t检验；采用ROC 曲线分析PCT、TNF⁃α、IL⁃6 单项及联合检测水平对宫内细菌感染的预测价值。以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组脐带血PCT、TNF⁃α、IL⁃6 水平

无感染组PCT、TNF⁃α、IL⁃6 水平均低于感染组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组脐带血PCT、TNF⁃α、IL⁃6 水平比较（±s）Table 2 Comparison of PCT，TNF⁃α and IL⁃6 levels in cord blood between 2 groups（±s）

表2 两组脐带血PCT、TNF⁃α、IL⁃6 水平比较（±s）Table 2 Comparison of PCT，TNF⁃α and IL⁃6 levels in cord blood between 2 groups（±s）

组别感染组无感染组t 值P 值n 45 53--PCT（ng/mL）2.94±1.03 0.41±0.15 17.679＜0.001 TNF⁃α（ng/mL）5.97±2.11 2.73±1.05 9.842＜0.001 IL⁃6（ng/L）32.43±11.51 17.41±7.02 7.925＜0.001

2.2 两组脐带血PCT、TNF⁃α、IL⁃6 阳性率

无感染组PCT、TNF⁃α、IL⁃6 阳性率均低于感染组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

2.3 PCT、TNF⁃α、IL⁃6 单项及联合检测水平对宫内细菌感染的预测价值

ROC 曲线显示，PCT、TNF⁃α、IL⁃6 单项及联合检测曲线下面积AUC 分别为0.807、0.701、0.817、0.908，各指标曲线下面积以联合检测最大。见表4、图1。

表3 两组脐带血PCT、TNF⁃α、IL⁃6 阳性率比较［n（%）］Table 3 Comparison of the positive rates of PCT，TNF⁃α and IL⁃6 in cord blood between 2 groups［n（%）］

表4 PCT、TNF⁃α、IL⁃6 单项及联合检测水平对宫内细菌感染的预测价值Table 4 Predictive value of PCT，tnf⁃α，IL⁃6 single and combined detection levels on intrauterine bacterial infection

图1 脐带血PCT、TNF⁃α、IL⁃6 单项及联合检测水平对宫内细菌感染的预测价值ROC 曲线图Figure 1 ROC curve analysis of the predictive value of single and combined detection levels of PCT，TNF⁃α and IL⁃6 in cord blood for intrauterine bacterial infection

3 讨论

细菌感染是新生儿宫内感染的常见类型，主要途径为阴道上行感染，可引起早产、肺炎、肺出血、呼吸窘迫综合征、败血症等［11］。该症病情进展迅速，严重者预后不良，故早期诊断新生儿宫内感染，不仅可以减少临床上抗生素的滥用，还能及时缓解新生儿病情，是决定治疗预后的关键［12］。随着医疗诊断技术的发展，新生儿宫内感染诊断手段趋于成熟，目前羊水或脐血细菌培养为本症诊断的金标准。但由于羊水采集及羊水中细胞因子的浓度判断的困难，且很多细胞因子半衰期短，检测过程和程序较为复杂，也不易作为临床常用的早期判断指标。故本研究对有宫内细菌感染高危因素的新生儿脐带血中炎症反应指标进行检测，以期早期发现胎儿在宫内感染情况，减少病死率和疾病的发生率，提高其生存质量［13］。

PCT 是一种糖蛋白，主要由甲状腺C 细胞分泌。PCT 在正常机体内含量极低，当机体感染时，其在IL⁃6 等细胞因子刺激下，可在肺、肾、肝脏及肌肉等多种器官实质细胞中大量释放，参与炎症反应［14］。本研究结果与上述研究一致，提示PCT在新生儿宫内细菌感染患儿血清中高表达。

白细胞介素（Interleukin，IL）是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子，与血细胞生长因子同属于细胞因子IL⁃6 是IL 家族重要成员，主要由单核巨噬细胞、Th2 细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞产生。本研究显示，感染相关的脐带血中IL⁃6 均有显著增高，这与Alemkere 等［15］研究一致，这也证实了脐带血中IL⁃6 的升高比脐带血细菌培养更能预示宫内感染的发生这一结论。

TNF⁃α 是一种产生的具有广泛生物学活性的多肽调节因子，由单核巨噬细胞、树突状细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、中性粒细胞、B 细胞、CD4+T 细胞等产生，可被多种刺激物诱导发生。既往研究显示，TNF⁃α 作用与其在组织中的浓度有关，低水平时在组织修复、炎症应答中起作用，对机体有利；而当TNF⁃α 大量释放可以引起组织免疫损伤［16］。本研究结果提示TNF⁃α 的升高是判定胎儿在宫内发生炎症反应有显著意义的细胞因子。

为进一步分析PCT、TNF⁃α、IL⁃6 单项及联合检测水平对宫内细菌感染的预测价值，本研究利用ROC 曲线进行分析。结果显示，PCT+TNF⁃α+IL⁃6 的曲线下面积、敏感性、特异性最高，与Wilson 等［17］研究基本一致，说明三者联合检测较单一指标检测诊断价值更高。

综上所述，脐带血PCT、TNF⁃α 及IL⁃6 检测表达在发生宫内细菌感染的新生儿中显著升高，联合三者检测可作为预测宫内细菌感染发生的有效手段，临床上应检测其水平并及时进行干预，进而提高诊出率。但本研究样本量较少，同时围生期干扰因素较多，需要进一步扩大样本量证实PCT、TNF⁃α 联合IL⁃6 对新生儿宫内细菌感染早期诊断价值。