3 种外源物质对苹果幼树新梢抗寒性的影响及评价

张继祥，聂佩显，张丁有，路超

（1.山东农业大学园艺科学与工程学院，山东 泰安 271018；2.山东省果树研究所，山东 泰安 271000）

随着全球气候变暖，我国极端天气日益增多[1，2]，晚霜冻已成为制约我国苹果产业发展的主要自然灾害之一[3，4]。生产上，在霜冻来临之前喷施具有抗寒效果的外源物质以提高果树的抗寒性，已有广泛应用。研究表明，水杨酸（SA）、油菜素内脂（BR）和氯化钙（CaCl2） 等物质与植物的抗寒性具有一定关系。如，在黄瓜幼苗上叶面喷施1 mmol/L 的SA 溶液，可使黄瓜幼苗的冷害指数较清水对照降低40%[5]；在葡萄幼苗上叶面喷施0.25～5.00 mmol/L 不同浓度梯度的SA溶液，均可提高葡萄幼苗的抗寒性[6]；在草莓上叶面喷施3 mg/L 的BR 溶液，可提高叶片SOD、POD 和CAT 的活性，增强草莓的抗逆性[7]；Ca2+为一种细胞膜保护剂，Ca 处理可减轻自由基对膜系统的损伤，降低膜脂过氧化程度，提高苹果对逆境的适应性[8]等。但是，这些物质对提高苹果幼树抗寒性的效果差异尚未见报道。以2 a 生嘎拉苹果的新梢为试材，比较了低温胁迫下CaCl2、SA 和BR 溶液处理对苹果叶片抗寒性相关指标的影响，并对喷施不同外源物质后的枝条抗寒性进行了综合评价，旨为有效预防苹果晚霜冻提供帮助。

1 材料与方法

1.1 试验材料

苹果试材为树势健壮、长势一致的2 a 生嘎拉/M9T337，种植于山东省济宁市嘉祥县国家小尾寒羊保种场果园 （北纬 35°36′、东经 116°16′）。果园面积4 hm2，苹果树株行距为4.5m×2.5m，高纺锤树形，南北行向，常规管理。

试剂有CaCl2（天津市大茂化学试剂厂生产）、水杨酸（天津凯通化学试剂有限公司生产）和芸苔素内酯水剂（硕丰481，有效成分含量为0.007 5%，成都新朝阳生物化学有限公司生产）。

1.2 试验方法

1.2.1 试验设计 试验外源物质设2 g/L 的CaCl2溶液（CaCl2，Ⅰ）、200 mg/L 的水杨酸溶液（SA，Ⅱ）、芸苔素内酯水剂750 倍液（BR 750 倍液，Ⅲ）、芸苔素内酯水剂1 500 倍液（BR 1 500 倍液，Ⅳ）、芸苔素内酯水剂3 000 倍液 （BR 3 000 倍液，Ⅴ） 和清水（CK）6 个处理，单株小区，3 次重复。从苹果萌芽期开始进行全树喷施外源物质处理，每7 d 喷施1 次，连喷3 次。第3 次喷施外源物质后第10 天，在树冠外围东、西、南、北4 个方向剪取长势一致的带叶新梢，将剪口处封蜡，然后带回实验室置于人工智能低温箱内进行低温胁迫处理，试验低温梯度设4、0、-2 和-4 ℃计4 个水平，5 h 后用液氮速冻，备用。

1.2.2 测定项目与方法

1.2.2.1 叶片生理学指标。参考《植物生理学实验指导》[9]，测定叶片的相对电导率、保护酶（SOD、POD、CAT） 活性和主要渗透调节物质〔丙二醛（MDA）、脯氨酸、可溶性糖〕含量。

1.2.2.2 叶片半致死温度（LT50）。相对电导率达到50%时的温度可以作为半致死温度[10]。为了准确判断各外源物质处理的叶片LT50，根据其不同低温胁迫下的相对电导率拟合出相对电导率（Y）与温度（X）的Logistic 方程，求出曲线拐点所对应的温度，即为叶片的低温LT50[11]。

1.2.2.3 枝条抗寒性综合评价。利用叶片的抗寒性综合评价结果作为枝条的抗寒性评价结果。利用隶属函数法，对不同外源物质处理的枝条抗寒性进行综合评价[12]。首先对各个抗性指标进行分类，与抗寒性呈正相关的指标（脯氨酸含量、可溶性糖含量和3 种保护酶活性）利用公式（1）求隶属度，与抗寒性呈负相关的指标（MDA 含量、相对电导率） 利用公式（2）求隶属度：

公式中，Zijk表示喷施第i 种外源物质处理后的植物组织在第j 个温度胁迫下第k 项指标的隶属度；Xijk表示喷施第i 种外源物质处理后的植物组织在第j 个温度胁迫下第k 项指标的测定值，Xmax、Xmin分别表示所有参试材料中第k 项指标的最大值和最小值。将同一外源物质处理下各个指标的抗寒性隶属值累加起来，求平均值，即为该外源物质处理的抗寒性隶属度。参照龚月桦等[13]的方法，按照平均隶属度将枝条的抗寒性进行分级：隶属度≥0.70 时为强抗，隶属度为0.6（含）～0.7 时属抗，隶属度为0.4（含）～0.6 时属中抗，隶属度为0.3（含）～0.4时属弱抗，隶属度＜0.3时为不抗。

1.2.3 数据处理与分析 使用Excel 软件绘制图表；使用SPSS 17.0 软件进行数据的差异显著性分析。

2 结果与分析

2.1 不同外源物质处理对苹果叶片相对电导率和半致死温度的影响

2.1.1 相对电导率 随着低温胁迫程度的增大，各处理的叶片相对电导率均呈逐渐增大趋势；但相同温度下，不同处理的指标值除4 ℃低温胁迫时差异不显著外，其他低温胁迫时差异均较大（图1）。

图1 不同外源物质处理对苹果叶片相对电导率的影响Fig.1 Effects of different exogenous substances on relative conductivity of apple leaves

CK 的相对电导率增加得最快，且指标值始终处于最高，其中-4 ℃低温胁迫时相对电导率高达78.83%。CaCl2处理的相对电导率增加得最为缓慢，≤0 ℃低温胁迫时指标值始终处于最低，其中-4 ℃低温胁迫的相对电导率较CK 下降了47.69%。≤0 ℃低温胁迫时，SA 与BR 1 500 倍液处理的叶片相对电导率十分相近，二者-4 ℃低温胁迫时的指标值均显著＜CK以及BR 750 倍液和3 000 倍液处理，其中较CK 分别下降了34.04%和35.23%。

综上分析可以看出，≤0 ℃的低温胁迫时，试验的外源物质处理均可降低叶片相对电导率，减轻叶片伤害，其中CaCl2处理效果最好，其次是SA 和BR 1 500 倍液处理。

2.1.2 半致死温度 从图1 发现，BR750 倍液和3000倍液处理的LT50在-2 ℃附近，SA 和BR 1 500 倍液处理的LT50在-4 ℃附近。根据各外源物质处理不同低温胁迫下相对电导率拟合出的Logistic 方程，计算得到SA、CaCl2、BR 750 倍液、BR 1 500 倍液、BR 3 000倍液处理的 LT50分别为-3.78、-6.79、-2.33、-3.92 和-2.64 ℃，均＜CK（表1）。说明试验的外源物质处理均可减少低温胁迫下叶片细胞内离子的外渗，降低LT50，提高枝条的抗寒性，其中CaCl2处理效果最好，其次是BR 1 500 倍液和SA 处理，BR 750 倍液和3 000 倍液处理效果相对较弱。

表1 不同外源物质处理的苹果叶片相对电导率Logistic 方程及其半致死温度Table 1 Logistic equation of relative conductivity and LT50 of apple leaves treated with different exogenous substances

2.2 不同外源物质处理对苹果叶片主要渗透调节物质含量的影响

2.2.1 MDA 含量 MDA 是一种膜质过氧化产物，在逆境下会大量积累，对生物膜产生伤害。随着低温胁迫程度的增大，各处理的叶片MDA 含量均呈逐渐升高趋势，且均在LT50附近升高较快；但相同温度下，不同处理的指标值除4 ℃低温胁迫时差异不显著外，其他低温胁迫时差异均较大，其中-2 和-4 ℃低温胁迫时各外源物质处理的叶片MDA 含量均＜CK，尤其是-4 ℃低温胁迫的指标值与CK 差异均达到了显著水平（图2）。

图2 不同外源物质处理对苹果叶片丙二醛含量的影响Fig.2 Effects of different exogenous substances on malondialdehyde content of apple leaves

-4 ℃低温胁迫时，不同外源物质处理的叶片MDA 含量顺序为CaCl2＜SA＜BR 1500 倍液＜BR 750 倍液＜BR 3000 倍液，其中 CaCl2、SA 和 BR 1500 倍液处理三者差异不显著，但均与其他2 个外源物质处理差异达到了显著水平；与4 ℃低温胁迫的指标值相比，SA、CaCl2、BR 750 倍液、BR 1 500 倍液、BR 3 000倍液处理的叶片MDA 含量分别增加了1.85 倍、1.78 倍、3.17 倍、2.94 倍和 2.64 倍，增幅均＜CK （3.20 倍）。

综上分析可以看出，≤0 ℃的低温胁迫时，SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理可显著降低苹果叶片MDA含量，减轻叶片伤害，其中CaCl2处理效果最好，其次是SA 和BR 1 500 倍液处理。

2.2.2 脯氨酸含量 在4 ℃低温胁迫时不同处理已经对叶片脯氨酸含量产生了显著影响，随着低温胁迫程度的增大，各处理的叶片脯氨酸含量总体上均呈升高趋势；但相同温度下，不同处理的指标值差异均较大，其中CaCl2、SA 和BR 1 500 倍液处理的指标值显著＞CK 以及BR 750 倍液和3 000 倍液处理，而BR 750 倍液和3 000 倍液处理的指标值与CK 普遍差异不显著（图3）。

图3 不同外源物质处理对苹果叶片脯氨酸含量的影响Fig.3 Effects of different exogenous substances on proline content of apple leaves

CK 的脯氨酸含量增加得最少，且指标值始终处于最低。CaCl2处理的脯氨酸含量增加得最多，≤0 ℃低温胁迫时指标值始终处于最高，其中-2 和-4 ℃低温胁迫的指标值显著＞其他外源物质处理。-4 ℃低温胁迫时，SA 处理的叶片脯氨酸含量也显著＞BR 1 500 倍液处理。

综上分析可以看出，≤0 ℃的低温胁迫时，试验的外源物质处理均可提高叶片脯氨酸含量，增强抗寒性，其中CaCl2、SA 和BR 1 500 倍液处理效果显著，以CaCl2处理效果最好，其次是SA 处理。

2.2.3 可溶性糖含量 在4 ℃低温胁迫时不同处理已经对叶片可溶性含量产生了显著影响，随着低温胁迫程度的增大，各处理的叶片可溶性糖含量总体上均呈先升高后降低的变化，且均在-2 ℃低温胁迫时达到最高；但相同温度下，不同处理的指标值差异均较大，均以BR1500 倍液处理明显较高（图4）。

图4 不同外源物质处理对苹果叶片可溶性糖含量的影响Fig.4 Effects of different exogenous substances on soluble sugar content of apple leaves

4～0℃低温胁迫时，各处理的叶片可溶性糖含量均增加缓慢，其中0 ℃低温胁迫时SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理的指标值显著＞CK。-2 ℃低温胁迫时，各处理的叶片可溶性糖含量均迅速升高至最大，SA、CaCl2、BR 750 倍液、BR 1 500 倍液、BR 3 000 倍液处理的指标值分别达到 18 9.92、164.25、128.63、202.15 和128.90 mg/g，均显著＞CK （116.94 mg/g）；与 4 ℃低温胁迫的指标值相比，依次提高了114%、96%、86%、92%和69%，增幅均＞CK （37%）。-4 ℃低温胁迫时，各处理的叶片可溶性糖含量均较-2 ℃低温胁迫时降低，其中外源物质处理的指标值均显著＞CK，但与4 ℃胁迫的指标值相比仍然较高，SA、CaCl2、BR 750 倍液、BR 1 500 倍液、BR 3 000 倍液处理的可溶性糖含量分别较其4 ℃低温胁迫的指标值增加了31%、34%、22%、42%和10%；不同外源物质处理的叶片可溶性糖含量差异较大，其中SA 与CaCl2处理差异不显著，但二者均显著＞BR 750 倍液和3 000 倍液处理。

综上分析可以看出，≤0 ℃的低温胁迫时，SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理可显著提高叶片可溶性糖含量，增强抗寒性，其中BR 1 500 倍液处理效果最好，其次是SA 和CaCl2处理。

2.3 不同外源物质处理对苹果叶片保护酶活性的影响

2.3.1 SOD 活性 随着低温胁迫程度的增大，各处理的叶片SOD 活性均呈先升高后降低的变化，除BR 1 500 倍液处理是在-2 ℃低温胁迫下达到最高外，其他处理均是在0 ℃低温胁迫时达到最高；但相同温度下，不同处理的指标值除4 ℃胁迫时差异不显著外，其他低温胁迫时差异均较大，其中SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理的指标值均显著＞CK（图5）。

图5 不同外源物质处理对苹果叶片SOD 活性的影响Fig.5 Effects of different exogenous substances on SOD enzymatic activity of apple leaves

0 ℃低温胁迫时，SA、CaCl2、BR 750 倍液、BR 1 500倍液、BR 3 000 倍液处理的叶片SOD 活性分别为149.28、139.24、39.61、91.24 和 67.98 U/g（FW），除BR 750 倍液处理略＜CK〔47.31 U/g（FW）〕外，其他处理的指标值均＞CK，其中SA 处理最高，CaCl2处理次之，二者差异不显著，但均显著＞其他处理；与4 ℃低温胁迫的指标值相比，叶片SOD 活性分别提高了3.50 倍、3.25 倍、0.17倍、1.59 倍和 1.15 倍，增幅均＞CK（36%）。-2 ℃低温胁迫时，BR 1 500 倍液处理的叶片SOD 活性升至最高，而其他处理的指标值均较0 ℃低温胁迫时有所降低，该温度下指标值以SA 处理最高，其次是BR 1 500 倍液和CaCl2处理，三者之间差异显著，但均显著＞其他处理；BR 750 倍液处理的叶片SOD 活性最低，BR 3 000 倍液处理次之，二者差异显著，但均与CK 差异不显著。-4 ℃低温胁迫时，各处理的叶片SOD 活性均较-2 ℃低温胁迫时的指标值降低，其中SA 处理的指标值最高，其次是BR 1 500 倍液处理，二者差异不显著，但均显著＞其他处理；CaCl2处理的指标值也较高，显著＞CK 以及BR 750 倍液和3 000 倍液处理；BR 750倍液和3 000 倍液处理的叶片SOD 活性较低，二者差异不显著且均与CK 差异也不显著，指标值分别是0 ℃低温胁迫时的52.31%和36.16%。

综上分析可以看出，≤0 ℃的低温胁迫时，SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理可显著提高叶片SOD 活性，减轻叶片伤害，其中SA 处理效果最好。

2.3.2 POD 活性 POD 能降解植物细胞内产生的H2O2，避免膜质过氧化对细胞产生伤害。在4 ℃低温胁迫时不同处理已经对叶片POD 活性产生了显著影响，随着低温胁迫程度的增大，各处理的叶片POD 活性均呈先升高后降低的变化，且指标值均在0 ℃低温胁迫时达到最高；但相同温度下，不同处理的指标值差异均较大，其中SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理的指标值均显著＞CK 以及BR 750 倍液和 3 000 倍液处理（图6）。

图6 不同外源物质处理对苹果叶片POD 活性的影响Fig.6 Effects of different exogenous substances on POD enzymatic activity of apple leaves

4 ℃低温胁迫时，各外源物质处理的叶片POD 活性均显著＞CK，其中SA 处理的指标值最高，且显著＞其他处理；其次是CaCl2和BR1 500 倍液处理，二者差异不显著，但均显著＞CK 以及BR 750 倍液和BR 3 000倍液处理；BR 750 倍液和3 000 倍液处理的叶片POD活性相对较低，二者差异不显著。0 ℃低温胁迫时，SA、CaCl2、BR 750 倍液、BR 1 500 倍液、BR 3 000 倍液处理的叶片POD 活性均迅速升高，分别达到54.27、 53.28、 17.79、 69.61 和 26.45 ΔA/（min·g），均＞CK〔11.04ΔA（/min·g）〕，且除BR 750倍液处理外，其他处理与CK 差异均达到了显著水平，其中BR 1 500倍液处理的指标值最高且显著＞其他处理，SA 与CaCl2处理差异不显著但均显著＞BR 750 倍液和3 000 倍液处理；与4 ℃低温胁迫时的指标值相比，叶片POD 活性分别提高了2.67 倍、4.15 倍、1.20倍、5.60 倍和2.16倍。-2 ℃低温胁迫时，各外源处理的叶片POD活性均＞CK，其中SA 处理的指标值最高，与CaCl2处理差异不显著，但显著＞BR 1 500 倍液处理；CaCl2与BR 1 500倍液处理差异不显著，但均显著＞CK 以及BR其他2 个处理；BR 750 倍液和3 000 倍液处理的叶片POD 活性较低，二者差异不显著，且均与CK 差异也不显著。-4 ℃低温胁迫时，除BR 750 倍液处理的叶片POD 活性略＜CK 外，其他处理的指标值均显著＞CK，其中SA 处理的指标值最高且显著＞其他处理；CaCl2与BR 1 500倍液处理差异不显著，但二者均显著＞CK 以及BR 750倍液和3 000 倍液处理；BR 750 倍液和3 000 倍液处理的叶片POD 活性相对较低，分别是0 ℃低温胁迫时指标值的43.01%和56.70%。

综上分析可以看出，低温胁迫时，SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理均可显著提高叶片POD 活性，减轻叶片伤害，其中0 ℃时BR 1 500 倍液处理效果最好，4、-2 ℃和-4 ℃时 SA 处理效果最好。

2.3.3 CAT 酶活性 CAT 能催化H2O2分解，对细胞内组分的活性状态有保护作用。在4 ℃低温胁迫时不同处理已经对叶片CAT 活性产生了显著影响，随着低温胁迫程度的增大，各处理的叶片CAT 活性总体上均呈先升高后降低的变化，其中BR 1 500 倍液和3 000倍液处理是在-2 ℃低温胁迫时达到最高外，而其他处理均是在0 ℃低温胁迫时达到最高；但相同温度下，不同处理的指标值差异差均较大，其中≤0 ℃低温胁迫时，SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理的指标值均显著＞CK 以及 BR 750 倍液和 3 000 倍液处理 （图 7）。

图7 不同外源物质处理对苹果叶片CAT 酶活性的影响Fig.7 Effects of different exogenous substances on CAT enzymatic activity of apple leaves

0 ℃低温胁迫时，各外源物质处理的叶片CAT 活性均＞CK，其中 CaCl2处理的指标值 〔2.20 ΔA/（min·g）〕最高，且显著＞其他处理；SA〔1.39ΔA（/min·g）〕 与BR 1 500 倍液处理差异不显著，但二者均显著＞CK 以及BR 750 倍液和3 000 倍液；BR 750 倍液和3 000 倍液处理的叶片CAT 活性较低，二者差异不显著，且均与CK 差异也不显著。-2 ℃低温胁迫时，除BR 750倍液处理的叶片CAT 活性略＜CK 外，其他外源物质处理均显著＞CK，其中 BR 1 500 倍液处理的指标值 〔1.72 ΔA/（min·g）〕最高，且显著＞其他处理；SA 与CaCl2处理差异不显著，但二者均显著＞CK 以及BR 750 倍液和3 000 倍液处理；BR 3 000 倍液处理和CK的指标值均达到最大，分别为0.85 和0.45 ΔA（/min·g），但二者与其他处理相比均明显较低。-4 ℃低温胁迫时，CK 的叶片CAT 活性出现最小值；各外源物质处理的叶片CAT 活性虽有不同程度的降低，但均仍高于其4 ℃低温胁迫时的指标值，SA、CaCl2、BR 750 倍液、BR 1 500 倍液、BR 3 000 倍液处理的叶片CAT 活性分别较其4 ℃低温胁迫时的指标值提高了12.67 倍、1.37 倍、0.40 倍、4.76 倍和 0.74 倍。

综上分析可以看出，≤0 ℃的低温胁迫时，SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理均可显著提高叶片CAT 活性，减轻叶片伤害，其中0 ℃时CaCl2处理效果最好，-2 和-4 ℃时BR 1 500 倍液处理效果最好。

2.4 不同外源物质处理的枝条抗寒性综合评价

SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理的平均隶属度分别为0.569 3、0.576 3 和0.579 4，枝条抗寒性综合评价均为中抗；BR 750 倍液、BR 3 000 倍液和CK 的平均隶属度分别为0.247 4、0.296 8 和0.219 0，枝条抗寒性综合评价均为不抗（表2）。

表2 不同外源物质处理的抗寒性综合评价Table 2 Comprehensive evaluation of cold resistance of apple shoots treated with different exogenous substances

3 结论与讨论

低温胁迫会对植物细胞膜的稳定性造成破坏，其破环程度随着低温胁迫程度的增大而加剧[14，15]。相对电导率的变化可以直观地反映细胞膜的稳定性，前人研究表明，抗寒性强的植物在遭受低温胁迫时，膜系统稳定性强，相对电导率小；反之，亦然[10，16，17]。因此，相对电导率被作为衡量细胞膜破坏程度的重要指标，并配以Logistic 方程计算得出的植物LT50成为比较植物抗寒性差异的重要方法，已经在葡萄[16]、梨[18，19]、苹果[10，20，21]等果树以及杨树[22]上得到了广泛应用。MDA是膜脂过氧化过程的最终分解产物，其含量可以反映膜系统受伤害的程度和植物的抗逆性[22]。本研究中通过喷施不同的外源物质发现，低温胁迫下SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理均可显著降低叶片的相对电导率、LT50和MDA 含量，有效维持细胞膜的稳定性，提高苹果叶片的抗寒性。这与SA 在番茄[23]和栝楼[24]幼苗，CaCl2在库尔勒香梨[25]，BR 在菜用甘薯[26]和葡萄[27]幼苗上的作用结果一致。

脯氨酸和可溶性糖为细胞中主要的渗透调节物质，在果树抗寒锻炼中起着非常重要的作用。低温胁迫下，植物常见的生理反应是积累脯氨酸，其具有增加膜稳定性、减轻质膜损伤和清除自由基等功能[28]。植物组织中通过提高可溶性糖含量和细胞液浓度，使胞质冰点值下降，从而提高植物体的代谢效率，增强其抗寒性[29]。SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理虽然均显著地提高了叶片的脯氨酸含量和可溶性糖含量，但提高的幅度不同，其中CaCl2和SA 处理对提高叶片脯氨酸含量效果较好，BR 1 500 倍液处理对提高叶片可溶性糖含量效果最好。本研究结果与外源SA 处理对番茄幼苗[23]、CaCl2处理对楠木幼苗[30]、外源BR 处理对葡萄幼苗[27]上的影响结果一致。

SOD、POD 和CAT 是植物体内的重要保护酶，可以降解逆境产生的活性氧自由基，保护膜系统免受过氧化物的伤害，维持膜系统的稳定性[31]。本研究结果显示，SA、CaCl2和BR 1 500 倍液处理均可显著提高苹果叶片的SOD、POD 和CAT 活性，但对3 个保护酶活性的影响程度存在差异，其中CaCl2处理对提高叶片CAT 活性效果最好，SA 处理对提高叶片SOD 活性效果最好，BR 1 500 倍液对提高叶片POD 活性效果最好。

目前，关于果树抗寒物质筛选的研究大多是通过测定一些生理生化指标的变化来衡量其抗寒效果，但由于植物抗寒生理生化变化较为复杂，且不同指标存在交互作用，如果孤立地使用单一指标很难全面、准确地衡量其抗寒性强弱[12]，只有对这些指标进行综合分析，才能准确地判断各物质处理的抗寒效果。因此，众多学者将聚类分析法[32]、主成分分析法[33]和隶属函数法[34～36]等应用于植物的抗寒性研究，其中隶属函数法应用得较为广泛。本研究中通过隶属函数法确定了几种外源物质处理的抗寒性综合排名，筛选出了效果较好的3 个处理分别为BR 1 500 倍液、2 g/L 的CaCl2溶液和 200 mg/L 的 SA 溶液，与根据 Logistic 方程计算得到的LT50结果基本一致。说明可以利用隶属函数法进行苹果抗寒性的综合评价，同时表明本试验筛选出的3 个处理方法对于防御降温幅度不是很大的晚霜冻是有效的。