ET-1、EMP和hs-cTnT在缺血性心脏病中的价值

张申伟，郭 静，张 铮，陈江红，赵 魁

（1.郑州市第七人民医院心血管内科，河南 郑州 450016；2.中国人民解放军火箭军总医院心内科，北京 100088；3.唐都医院心内科，陕西 西安 710038）

流行病学研究表明，缺血性心脏病的发病率为3.95%～6.34%[1-2]。在缺血性心脏病病情进展中，相关细胞因子，如肿瘤坏死因子、白细胞介素等会发生改变，可用于反映血管内皮细胞的损伤程度，评估心肌细胞膜完整性的损伤。内皮素-1（endothelin-1，ET-1）表达升高可促进血管内皮细胞凋亡和血管平滑肌痉挛，进而促进心肌细胞缺血缺氧性损伤和心肌细胞凋亡[3]。内皮微粒（endothelial microparticle，EMP）是血管内皮细胞凋亡状态下释放的微小颗粒囊泡，反映了血管内皮细胞的完整性[4]。高敏心肌肌钙蛋白T（high-sensitivity cardiac troponin T，hs-cTnT）是敏感的心肌细胞损伤标志物，可反映心肌细胞膜的损伤程度，评估心血管不良结局的发生风险。本研究拟探讨ET-1、EMP和hs-cTnT表达与缺血性心脏病的关系。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2016年1月—2018年1月郑州市第七人民医院住院治疗的缺血性心脏病患者98例（缺血性心脏病组），其中男55例、女43例，年龄（60.32±6.92）岁，体质量指数（body mass index，BMI）为（22.01±2.10）kg/m2，按纽约心脏病学会（New York Heart Association，NYHA）心功能标准分为NYHAⅠ级27例、NYHAⅡ级34例、NYHAⅢ级25例、NYHAⅣ级12例。纳入标准：（1）符合《内科学》（第9版）诊断标准[5]；（2）急性心肌梗死，出现剧烈的胸骨后或心前区疼痛，血清心肌酶活性升高，血清肌酸激酶水平明显改变；不稳定型心绞痛，胸痛持续时间达30 min，卧床休息和含服硝酸酯类药物仅出现短暂或不完全性胸痛缓解；稳定型心绞痛，胸痛部位为胸骨体上段或中段之后，界限不清晰，持续3～5 min，含服硝酸甘油可缓解；（3）入院后进行冠状动脉造影或B型钠尿肽（B-type natriuretic peptide，BNP）等常规心力衰竭指标监测；（4）入院前未经过药物治疗；（5）患者及家属知情同意。排除标准：（1）合并有恶性肿瘤、糖尿病、肝功能不全、肾功能不全、内分泌疾病等；（2）入院前3个月内服用过激素类药物和免疫抑制剂；（3）有心脏手术史。另选取同期郑州市第七人民医院健康体检者100名（正常对照组），其中男60名、女40名，年龄（59.82±7.10）岁，BMI为（21.89±1.72）kg/m2，经详细体格检查排除高血压、糖尿病、心血管疾病、免疫系统疾病、肾脏疾病等。缺血性心脏病组和正常对照组性别、年龄、BMI差异均无统计学意义（P＞0.05）。本研究经郑州市第七人民医院伦理委员会批准，所有对象均知情同意。

1.2 方法

采集所有对象静脉血5 mL，其中3 mL静置30 min，112×g离心5 min，分离血清；采用免疫比浊法检测ET-1水平，试剂购自南京博奥生物检测公司，检测仪器为Array 360全自动特定蛋白分析仪（美国贝克曼库尔特公司）；采用cobas e411全自动生化分析仪（瑞士罗氏公司）及配套试剂（电化学发光法）检测hs-cTnT。剩余2 mL置于枸橼酸钠抗凝管中，193×g离心10 min获取血小板血浆，2 100×g获取乏血小板血浆。吸取50 μL乏血小板血浆，置于流式专用管中，然后加入CD42-PE、CD31-FITC抗体（瑞士罗氏公司），使用FACSCalibur流式细胞仪（美国BD公司）检测EMP。

1.3 冠状动脉狭窄程度判断

采用Gensini法评估冠状动脉狭窄程度。（1）狭窄程度：狭窄＜25%为1分、25%～49%为2分、50%～74%为4分、75%～90%为8分、90%～99%为16分、100%为32分；（2）病变部位：左主干为5分，左前降支或回旋支为2.5分，左前降支中段为1.5分，左前降支远段为1.0分，左回旋支中、远段为1.0分，右冠状动脉为1.0分，小分支为0.5分。Gensini评分为狭窄程度得分加上病变部位得分。总分≤24分为轻度狭窄、25～49分为中度狭窄、≥50分为重度狭窄。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0软件进行统计分析。呈正态分布的数据以±s表示，2个组之间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。呈非正态分布的数据以中位数（M）[四分位数（P25～P75）]表示，组间比较使用秩和检验。计数资料以率表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 缺血性心脏病组和正常对照组血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平比较

缺血性心脏病组血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平明显高于正常对照组（P＜0.05）。见表1。

2.2 缺血性心脏病组不同心功能分级患者血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平比较

NYHAⅣ级、NYHAⅢ级患者血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平明显高于NYHAⅠ级、NYHAⅡ级（P＜0.05），且NYHAⅣ级高于NYHAⅢ级患者（P＜0.05）。见表2。

2.3 缺血性心脏病组冠状动脉不同狭窄程度患者血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平比较

轻度狭窄、中度狭窄和重度狭窄患者血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平依次升高，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表1 缺血性心脏病组和正常对照组血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平比较

表2 缺血性心脏病组不同心功能分级患者血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平比较

表3 缺血性心脏病组不同冠脉狭窄患者血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平比较

3 讨论

目前尚缺乏对缺血性心脏病患者病情评估的可靠性指标。虽然冠状动脉造影能够评估缺血性心脏病的病情严重程度，但其属于有创检查，对于操作者的要求较高，且患者的接受程度较低。血清学指标可以在心血管疾病的病情评估中发挥重要作用[6]。为此，本研究通过检测缺血性心脏病患者血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平，探讨相关指标在缺血性心脏病病情评估中的作用。

ET-1是血管内皮收缩因子，其能够通过促进血管内皮细胞的痉挛，促进平滑肌细胞的持续性收缩，进而促进冠状动脉狭窄，加剧心肌组织的缺血性损伤和坏死[7]。EMP是血管内皮细胞凋亡过程中释放的细胞碎片，可反映冠状动脉内皮细胞的活性和损伤程度[8]。有研究结果显示，ET-1表达升高能加重心肌细胞的氧化应激性损伤，促进心肌细胞线粒体的损伤[9]。hscTnT是目前反映心肌损伤的常用指标，可用于评估心肌细胞或线粒体膜的破坏程度[10]。

本研究结果显示，缺血性心脏病患者血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平均明显高于正常对照者（P＜0.05），提示ET-1、EMP和hs-cTnT可能参与了缺血性心脏病的病情进展，其机制可能为：（1）ET-1升高不仅能促进冠状动脉痉挛，同时还能导致心肌组织血流灌注紊乱，加剧心肌细胞的缺血再灌注性损伤；（2）EMP升高能反映冠状动脉内皮细胞的凋亡程度，EMP水平越高，冠状动脉的病理性损伤越严重；（3）hscTnT水平反映了心肌细胞膜的稳定性，hs-cTnT水平越高，心肌细胞的破碎程度越严重[11-13]。徐仓宝等[14]的研究结果显示，在缺血性心脏病患者中，ET-1水平平均可升高45%以上，特别是在合并有心功能障碍或心力衰竭的患者中，ET-1水平可进一步升高。由此可见，心功能障碍越严重，ET-1、EMP和hs-cTnT水平越高，提示相关指标与缺血性心脏病的病情有关。这可能是由于ET-1、EMP和hs-cTnT水平升高可在一定程度上反映冠状动脉狭窄程度，狭窄越明显，ET-1、EMP和hs-cTnT水平升高幅度越大，心脏的血液供应就会越少，从而导致心肌细胞因缺氧而发生凋亡，心肌细胞肌纤维功能异常，进而促进缺血性心脏病的发生[15-17]。因此，可通过检测ET-1、EMP、hs-cTnT等血清学指标来评估缺血性心脏病患者的血管病变程度。

综上所述，缺血性心脏病患者血清ET-1、EMP和hs-cTnT水平明显升高，与患者心功能或血管的狭窄程度相关。但ET-1、EMP与缺血性心脏病的关系目前尚属于科研阶段，虽然可解释一部分缺血性心脏病的病因，但其具体的临床应用还有待进一步探讨。另外，本研究未分析ET-1、EMP和hs-cTnT水平与缺血性心脏病患者预后的关系，因此今后将收集更多的样本并追踪患者预后，探讨相关指标与缺血性心脏病患者预后的关系。