乳腺癌中CDC25A和P57kip2蛋白表达与病理分级及临床分期的关系

程波

（九江市第三人民医院病理科，江西 九江 332000）

乳腺癌是威胁人类健康的癌症之一。乳腺癌潜伏、发展时间较长，病情发展包括多个阶段，并伴随基因改变，但P57kip2、CDC25A 表达与临床分期有无关系，现代临床研究尚无定论[1]。有学者对P57kip2、CDC25A 进行研究发现[2]，CDC25A 能调节细胞运转，促进 G1/S 期，P57kip2 对细胞增殖有阻碍作用，同时底物磷酸化受到抑制，细胞G1期持续时间延长。为进一步探析P57kip2、CDC25A与乳腺癌进程的相关性，本研究采用免疫组化法对癌细胞进行染色检测，以探讨蛋白表达与病理分级及临床分期的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2016年4月至2019年5月本院收治的120例乳腺癌患者为研究对象。所有患者均为女性，年龄35～79岁，平均年龄（45.56±2.47）岁。按照UICC分期标准将患者分为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期，各35例、40例、45例；按照WHO病理分级标准将患者分为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级，各44例、36例、40例。患者临床资料差异无统计学意义，具有可比性。本研究经医院伦理委员会审批同意。

纳入标准：经CT、MRI等检查确诊为乳腺癌；患者知晓研究并签署知情同意书；精神状态正常可配合检查者；近期未服用抗癌药物进行化疗。排除标准：拒绝参与研究者；对本研究试剂过敏者；有化疗史者；无法全程配合检查者。

1.2 方法 检测试剂主要为P57kip2、CDC25A、EliVision试剂盒，并准备硝酸纤维素膜，所有试剂由福州迈新公司提供。

取患者乳腺癌组织放置在试管中（试管编号对应患者姓名），制成石蜡标本。将标本置于20℃条件下存储，防止癌细胞继续生长影响实验结果。将标本切片进行染色，切片厚度为4μm，切片置于完全消毒的载玻片上，盖上盖玻片，在玻片一端滴入染色试剂，另一端用吸水纸吸引试剂快速染色，玻片中无气泡表明染色成功，观察组切片颜色，进而判断其阴性、阳性。若颜色呈现棕黄色，则说明P57kip2蛋白、CDC25A表达率高，如果表达率下降，则颜色变暗，呈棕色、褐色。

1.3 观察指标 统计患者年龄、临床分期、病理分级及淋巴结转移情况，记录染色后阴性、阳性例数，分析P57kip2、CDC25A表达与上述因素的相关性。

1.4 统计学方法 采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析，计数资料用[n（%）]表示，比较采用Z检验，计量资料用“±s”表示，比较用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CDC25A 表达与病例分级及临床分期的相关性分析患者年龄与CDC25A 表达无相关性；病理分级与CDC25A 表达有相关性，分级越高，CDC25A表达越低（P＜0.05）；临床分析与CDC25A 表达存在相关性，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期CDC25A 表达率逐渐下降（P＜0.05）；淋巴结转移与CDC25A 表达有相关性，转移越多，CDC25A表达率越低（P＜0.05），见表1。

2.2 P57kip2 蛋白表达与病理分级及临床分期的相关性患者年龄与P57kip2 蛋白表达无相关性；淋巴结转移数越多，P57kip2 蛋白表达越低（P＜0.05）；临床分期越低，P57kip2 蛋白表达率越高（P＜0.05）；病理分级越低，P57kip2蛋白表达率越高（P＜0.05），见表2。

表1 CDC25A表达与病例分级及临床分期的相关性分析Table 1 Correlation analysis of CDC25A expression with pathological grade and clinical stage

表2 P57kip2蛋白表达与病理分级及临床分期的相关性Table 2 Correlation between P57kip2 protein expression and pathological grade and clinical stage

3 讨论

乳腺上皮细胞癌变称之为乳腺癌，诱发癌变因素较多，目前临床对其诱因尚无完整定论。乳头溢液、肿胀等是乳腺癌早期症状，随病情发展，癌细胞逐渐向周围组织、器官扩散[3]。全球调查显示[4]，发展中国家的乳腺癌发病率较高，女性为高发人群，发病率超过24%。Masuoka等[5]在1995年，采用双杂交系统将P57kip2 蛋白成功克隆，经长期研究，发现P57kip2 是抑癌基因，在细胞增殖分化过程中，负责负性调控。人体染色体中的11p15.5是P57kip2的基因位置，57 KD为其分子量，能同时进行多个氨基酸多肽的编码，最多编码数量为316 个。在此之后，关于P57kip2 表达与乳腺癌发生发展的研究逐渐增多，有学者研究显示[6]，P57kip2蛋白能与促进细胞增殖的相关因子进行结合，如cyclin E-CDK2，细胞增殖被抑制，长时间停滞在GI期，当癌症发展到后期，P57kip2表达率逐渐下降[7-8]。这一结论与本研究结论一致，对临床分期Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者的癌细胞阳性、阴性检出率进行统计，发现随分期程度、病理分级、淋巴结转移程度加深，P57kip2 表达率逐渐下降（P＜0.05），但患者年龄与P57kip2表达无相关性。本研究对CDC25A表达与临床分期、病理分级进行分析，发现其与P57kip2 蛋白一样，在临床分期、病理分级中CDC25A表达呈现线性变化[9-10]。本研究结果显示，随分期程度增加、分级程度增加及淋巴结转移枚数增多，阳性检出率越高，CDC25A 表达越低（P＜0.05）。由上述结果可知，CDC25A、P57kip2与癌细胞分化、癌症发展密切相关，两者在癌细胞Ⅰ期表达较多，患者阳性检出率较低，随分期增加阳性检出率增加，两者表达率降低。在癌症发展中，CDC25A、P57kip2 有一定协同作用，但此结论尚需大样本量的临床研究证实。

综上所述，乳腺癌发展过程中，CDC25A、P57kip2 表达会对癌症进程产生影响，在临床诊断中可将其作为诊断标记。