不同产地鲜品白及的多糖含量测定
2021-01-21曾庆鸿牛敏敏常凡群杨丽丽宋智琴吴明开
韩 雪, 曾庆鸿, 牛敏敏, 常凡群,孔 娇, 杨丽丽, 宋智琴, 刘 海, 吴明开*
(1.贵州省农业科学院 现代中药材研究所/贵州省农作物品种资源研究所, 贵州 贵阳 550006; 2.安顺学院, 贵州 安顺 561000; 3.贵州省农业科技发展中心, 贵州 贵阳 550006; 4.贵州省农业生物技术重点实验室, 贵州 贵阳 550006)
白及(Bletillastriata)为传统名贵中药材,历代本草以及《中国药典》均有收录[1-3],具有收敛止血,养肺生津的功效。现代医学表明,白及还具有消肿生肌功效,用于内外出血诸证及痈肿、烫伤、手足皲裂等[4-8]。一直以来白及依赖野生资源,在大肆采挖后野生资源稀缺,而贵州省作为白及的道地产区,近几年白及种植面积达6 000余hm2,占全国种植面积的70%以上。贵州省各地均适合种植白及,种植面积广,因此黔产白及具有很高的研究价值。
硫酸苯酚法作为多糖的常用方法,经常用于中药中多糖成分含量测定[9]。多糖成分一直以来被认为是白及的主要有效成分[10-12],可为白及质量评价提供理论依据,对贵州省内不同产地的白及间多糖成分差异研究,揭示其差别,为鲜品白及的质量控制评价提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 白及 白及块茎由国家地理标志保护产品“安龙白及”种子经组培快繁、大棚驯化获得白及马鞍型驯化苗,2017年进行大田移栽于贵州义龙新区龙广镇、安龙县、红花岗区、施秉县、普安县、平塘县,安徽省枞阳县,2020年7月采集以上各基地的白及块茎。
1.1.2 仪器 HP8453型紫外分光光度计,数显恒温水浴锅 (上海梅香仪器有限公司)。
1.1.3 试药 葡萄糖标准品(批号为P-012-140730)购自中国食品药品检定研究院,苯酚、硫酸均为分析纯,超纯水为自制。
1.2 方法
1.2.1 样品的制备 将100 g白及切碎至大小均匀的颗粒,随机取2份,每份取2 g,加60 mL纯水,水浴90℃回流2 h后补足损失液体,取20 mL提取液,加20 mL无水乙醇,离心后取白色的沉淀,用纯水溶解后定容至100 mL,即为供试品溶液。取供试品1.0 mL,平行3份,分别加入5%苯酚溶液1.0 mL,震荡混匀后各加浓硫酸6.0 mL,迅速震荡混匀,于室温放置30 min后测定490 nm处吸光度。
1.2.2 标准品的制备 将葡萄糖标准品置于105℃的干燥箱中干燥至恒重,待冷却后用分析天平称取葡萄糖标准品10 mg,将其置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水溶解稀释至刻度线,充分振摇,摇匀后即得。
1.2.3 标准溶液的制备 分别取标准品溶液0 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL、0.6 mL、0.7 mL葡萄糖标准溶液,分别加入纯水1.0 mL、0.9 mL、0.8 mL、0.7 mL、0.6 mL、0.5 mL、0.4 mL、0.3 mL后,再各加5%苯酚溶液1.0 mL,震荡混匀后各加浓硫酸6.0 mL,迅速震荡混匀,于室温放置30 min后在490 nm处测定吸光度。
2 结果与分析
2.1 标准曲线
所得数据分别以标准溶液浓度和吸光度为横坐标和纵坐标,得到标准曲线方程为y=12.512x+0.001 72,r=0.998 299(图1)。
2.2 鲜品白及多糖含量
通过供试品的吸光度,得到不同产地鲜品白及多糖的含量,其中贵州安龙白及的多糖含量最高,达23.20%;安徽省枞阳县白及次之,为21.65%;而贵州普安县(19.29%)、平塘县(17.08%)、红花岗区(15.84%)、义龙新区龙广镇(12.23%)的白及均高于贵州施秉县白及(11.70%)。
3 小结
贵州不同产地鲜品白及的多糖含量差异较大,其中安龙白及的多糖含量最高,达23.20%;最低的为施秉白及,仅11.70%。白及的多糖含量与不同的采收时间、生长年限、产地处理方式的关系有待深入研究,揭示白及中多糖的含量变化规律及其药效关系。该研究结果为鲜品白及的质量控制提供了理论依据。