食品微生物检验常用培养基配制、灭菌及贮藏研究

2021-01-19吴芳媛冯秋芳湖州市食品药品检验研究院

食品安全导刊 2020年36期

□ 吴芳媛冯秋芳林黎湖州市食品药品检验研究院

当前，各个领域的检测设备及其自动化已经得到了一定的发展，但在微生物检验领域，仍然采用传统的检测方法，即利用培养法，对微生物进行培养、分离以及生化鉴定。检测的过程中，微生物培养基的合理性对微生物的生长、分离以及鉴定结果的准确性具有一定影响。基于此，本文开展了食品微生物检验常用培养基配制、灭菌及贮藏研究。

1 食品微生物检验常用培养基配制

针对食品微生物检验常用培养基的配制，应当根据不同检验目的，选择不同的配制材料，表1 为3 种常见的培养基材料配比表。

表1 3 种常见的培养基材料配比

表1 中牛肉膏蛋白胨培养基主要用于食品微生物中细菌的培养，为保证培养基的质量，需要在125 ℃环境下持续进行15 min 的灭菌处理；Gause1 号培养基主要用于放线菌的培养，在配制的过程中，首先应当在淀粉中添加少量的冷水，通过搅拌得到糊状淀粉后，再将其倒入100 ℃的水中，然后加热并加入其余配制材料搅拌至溶化，配制后同样需要在125 ℃环境下持续进行15 min 的灭菌处理；Martin 琼脂培养基主要作用是食品微生物中真菌的分离，完成灭菌处理后，在使用前加入0.02%链霉素稀释液，通常为100 ～150 mL，保证每毫升培养基当中均含有25 μg 链霉素。在实际食品微生物检验过程中，根据不同的需要对配制材料进行选择。按照上述材料及配制方法完成培养基的配制，并将其装入立式压力蒸汽灭菌装置当中，根据需要对pH 值进行调节。

2 食品微生物检验常用培养基灭菌

培养基可选用物理法和化学法两种灭菌方法，其中物理法包括湿热灭菌法、干热灭菌法等，化学法包括抗生素抑菌法、消毒剂消毒法等。湿热灭菌法将培养基放置在高压蒸汽装置中，通过其潜热作用以及穿透力，使菌体蛋白质凝固并变性[1]。高压蒸汽装置压力通常在0.12 ～0.13 MPa，持续15 ～25 min 可得到最佳的灭菌效果。

干热灭菌法利用恒温干燥箱，将其内部温度调节至155 ～165 ℃，持续70 ～90 min 后，将培养基放置在干燥箱中，达到灭菌的效果。

消毒剂消毒法常用的试剂包括甲醛（HCHO）、高锰酸钾（KMnO4）、乙醇（C2H6O），用0.5% ～0.6% 氯化汞、12.5%次氯酸钠、饱和漂白粉等进行灭菌可达到良好的灭菌效果[2]。抗生素抑菌法中常见的抗生素包括青霉素、链霉素和新霉素，将抗生素添加在培养基当中可以有效预防微生物感染，以此达到抑菌的效果。