新瑞白注射后引起患者嗜酸性粒细胞假性增高2例

朱婕 谢春霞 牟晓峰 王爱玲

(青岛市中心医院检验科，山东 青岛 266042)

病例1：患者，女，54岁，左侧肺癌并双肺转移(cT4NXM1 Ⅳ期)化疗后，血常规检查：白细胞计数1.63×109/L，其中中性粒百分比67.4%,嗜酸性粒细胞百分比0.4%，红细胞计数2.44×1012/L，血小板计数104×109/L，结果提示三系细胞下降明显，临床诊断为Ⅳ度骨髓抑制，考虑因化疗药物引起，给予患者新瑞白(PEG-rhG-CSF，生产厂家：齐鲁制药，批号：201908080KDB)升白细胞治疗，升白细胞后第3天血常规检查仪器结果显示，白细胞计数78.12×109/L，其中中性粒细胞计数53.17×109/L，百分比为68.1%，嗜酸性粒细胞计数23.18×109/L，百分比为27.4%。分析仪白细胞分类计数(WDF)散点图显示有密集的红色(代表嗜酸性粒细胞颜色)散点存在(图1)，但与正常嗜酸粒细胞散点位置不同，经推片瑞氏染色镜检，发现有一类含有特殊颗粒的白细胞，该类细胞胞体大小、胞核形态和分叶均与中性粒细胞相似，但胞质内含有一些特殊颗粒，颗粒较粗大、大小不等、分布不均，颜色偏橘红色。为确认颗粒性质，制作血涂片进行了中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色，含有特殊颗粒的这类细胞部分出现阳性反应，且NAP积分为65分，可确认该类细胞为中性粒细胞。瑞氏染色镜检后白细胞分类结果为中性粒细胞百分比95.5%，嗜酸粒细胞百分比0。患者新瑞白治疗后1周复查白细胞计数，中性粒细胞百分比77.2%，嗜酸性粒细胞百分比1.2%，出院随诊。

病例2：患者，女，64岁，宫颈癌(rT4N0M0 ⅣB期)术后复发放化疗后，血常规检查示白细胞计数0.81×109/L，其中中性粒百分比58%,嗜酸性粒细胞百分比0，红细胞计数3.02×1012/L，血小板计数87×109/L，结果提示三系细胞减低，临床诊断Ⅳ度骨髓抑制，给予新瑞白进行升白细胞治疗。使用后第3天血常规检查仪器结果显示，白细胞计数3.10×109/L，其中中性粒细胞计数1.30×109/L，百分比41.9%，嗜酸性粒细胞计数1.09×109/L，百分比35.2%。分析仪WDF散点图显示有较密集的红色(代表嗜酸性粒细胞颜色)散点存在(图2)，与正常嗜酸粒细胞散点位置不同，经推片瑞氏染色镜检，发现有一类含有特殊颗粒的白细胞，形态特征同病例1，NAP积分为45分。瑞氏染色镜检后白细胞分类结果为中性粒细胞百分比77.0%，嗜酸粒细胞百分比0.5%。患者新瑞白治疗后1周复查白细胞计数，中性粒细胞百分比84.7%，嗜酸性粒细胞百分比0，考虑升白细胞治疗有效，出院随诊。

讨论化疗作为肿瘤患者的一种治疗方法,白细胞减少是许多化疗药物治疗时经常会出现的不良反应，国际肿瘤组织与学会均已制订了防治中性粒细胞减少症或发热性中性粒细胞缺乏症(FN)的管理办法。PEG-rhG-CSF与瑞白(rhG-CSF)均为治疗肿瘤化疗相关中性粒细胞减少症或FN的有效药物[1]，近年来，rhG-CSF被大量地应用于临床,主要是针对放化疗后患者出现中性粒细胞及白细胞减少等症状，其通过与细胞表面的相应受体联合，促进粒细胞增殖与分化，从而增强造血干细胞、粒细胞的功能[2]，但因其半衰期短，需要经常用药，在改善骨髓造血状态同时也增加了患者痛苦[3]。随着PEG-rhG-CSF的问世，肿瘤患者治疗期间的骨髓抑制不良反应发生率显著降低，生活品质也得到了很大改善。PEG-rhG-CSF是rhG-CSF和单甲氧基聚乙二醇的共价结合体，较传统rhG-CSF半衰期明显延长，血浆浓度更加稳定[4]。

A:WDF(SSC-SFL)散点图，B:WDF(SSC-FSC)散点图

A:WDF(SSC-SFL)散点图；B:WDF(SSC-FSC)散点图

本实验室选用SYSMEX XN-9000型血细胞分析仪进行血常规的检测，该仪器采用了半导体激光核酸荧光染色流式细胞术法[5]，在WDF通道中，用散射光信息和核酸荧光信息对待检细胞进行分析,散射光(FSC、SSC)反映细胞的大小及细胞内容物的复杂程度,侧向荧光(SFL)反映细胞内核酸含量[6-7]。正常情况下，根据不同种类白细胞的荧光强度信号与散射光强度信号的不同，在WDF散点图上区分出淋巴细胞、单核细胞及其他种类白细胞。病理情况下，如细胞数量或者形态发生异常，以及出现原始、幼稚细胞时，均可能引起仪器散点图图形出现各种异常改变，从而影响血细胞的计数。这2例患者中，因为放化疗后骨髓抑制而注射了PEG-rhG-CSF，其通过与特异性细胞表面受体结合，促进造血干/祖细胞，刺激粒系单核系祖细胞的增殖、分化，同时激活终末细胞[4]，刺激了体内成熟中性粒细胞功能活化，部分中性粒细胞胞质中出现了特殊颗粒，当其颗粒变多、变粗时，细胞内容物激光强度就会增加，因此将其误判为嗜酸性粒细胞。同时在病理状态下，伪嗜酸性粒细胞与染色剂结合能力变弱后其内容物的前向散射光强度就会降低，从而无法与中性粒细胞进行准确划分。

血液分析仪作为全血细胞计数的检测仪器，测定方法各有不同，检测能力也参差不齐。虽然其自动化程度有较大提高，精密度和准确度也已大大改善，但是仍有一定的缺陷，如无法对细胞形态实现完全准确识别等，使得血常规结果常常受到明显影响[8]，因此在异常情况尤其是病理因素影响下不能完全依赖分析仪的检测结果，本文也再次验证了血细胞分析仪不能完全替代显微镜涂片检查[9]。该2例患者如果检验人员直接采用仪器检测结果，临床很可能将第一例患者考虑为慢性粒细胞白血病或嗜酸性粒细胞型类白反应或过敏反应，会对病人进行骨髓穿刺等血液病相关筛查或药敏排查；很可能将第2例患者考虑为药物过敏反应等，会对病人进行所用药物的过敏排查，从而延误2例患者的正确诊断和及时治疗。

综上所述，在进行血细胞计数的过程中，如遇到异常散点图，应引起检验人员的重视，须通过手工染色镜检复查，为临床提供准确可靠的实验结果。本组研究临床样本数较少，有待于后续扩大临床样本数进一步验证新瑞白是否可能会对仪器血细胞分类计数散点图造成影响。