防城港地区脐血血细胞参数参考范围的建立及其在珠蛋白生成障碍性贫血早期筛查中的应用*

唐金华，何嘉凝，李培颜，严芝光

广西壮族自治区防城港市第一人民医院检验科，广西防城港 538001

珠蛋白生成障碍性贫血是我国南方地区常见的遗传性血液疾病[1-2]。早期筛查对于珠蛋白生成障碍性贫血患者的治疗和预后有重要的作用，但目前确诊该病的费用高，耗时长[3]。血液学的改变是珠蛋白生成障碍性贫血患者的临床特征之一，血细胞参数分析为珠蛋白生成障碍性贫血的早期诊断提供了一个简便、快捷、经济的筛查方法[3-5]。脐血血细胞分析是新生儿常规检查项目，对于新生儿的疾病诊断有重要的参考价值，可用于珠蛋白生成障碍性贫血患儿的早期筛查[6]。但目前脐血血细胞参数的参考范围的相关研究较少，脐血血细胞分析结果的合理性值得探讨。本研究旨在建立防城港地区脐血血细胞参数参考范围，同时探讨其在珠蛋白生成障碍性贫血新生儿中的最佳临界值，为珠蛋白生成障碍性贫血新生儿的早期筛查提供一个简便、经济的方法。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取本院2017-2019年3 030例新生儿为研究对象，其中男1 625例、女1 405例。所有研究对象均获得监护人的知情同意且已签署知情同意书。所选的新生儿均无心、肺、肝、肾、脑、耳、鼻、喉、眼等疾病；无恶性肿瘤及感染性疾病。

1.2仪器与试剂 BC-6800全自动五分类血液细胞分析仪及配套M-68LD血细胞分析用溶血剂购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司；HYDRASYS LC全自动电泳分析仪及配套血红蛋白测定试剂盒购自法国Sebia公司。

1.3方法 新生儿脐血血细胞参数检测，采集2管1.8 mL新生儿脐血，迅速置于含有乙二胺四乙酸的抗凝试管中，充分混合均匀，使标本无凝块及微小凝集，同时避免用力过猛导致溶血及气泡产生。其中1管用全自动电泳分析仪进行血红蛋白电泳分析，血红蛋白(Hb)Bart′s阳性可视为珠蛋白生成障碍性贫血新生儿，设置为试验组，Hb Bart′s阴性视为健康新生儿，设置为对照组；另1管用全自动血液细胞分析仪检测白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、Hb、红细胞比容(HCT)、平均红细胞容积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板计数(PLT)。

2 结 果

2.1珠蛋白生成障碍性贫血新生儿的筛选 对本院2017-2019年3 030例新生儿进行血红蛋白电泳分析，筛选出308例Hb Bart′s阳性新生儿，视为珠蛋白生成障碍性贫血阳性，设置为试验组，其中男164例、女144例；其余2 722例健康新生儿作为对照组，其中男1 461例、女1 261例。

2.2健康新生儿脐血血细胞参数的参考范围 与行业标准全国临床检验操作规程(WS/T 405-2012)[7]比较，男、女新生儿的RBC、Hb、HCT、MCH、MCHC的参考范围无明显改变，WBC、MCV、PLT的参考范围的上限和下限有所上升。见表1。

表1 健康新生儿脐血血细胞参数的参考范围

2.3健康和珠蛋白生成障碍性贫血新生儿脐血血细胞参数的参考范围比较 与健康新生儿比较，珠蛋白生成障碍性贫血的男、女新生儿的MCV、MCH、MCHC的参考范围均下降(P<0.05)，RBC、PLT的参考范围上升(P<0.05)，WBC、Hb、HCT的参考范围则无明显改变(P>0.05)。珠蛋白生成障碍性贫血新生儿MCV、MCH的参考范围均低于健康新生儿参考范围的下限。男新生儿的各项参数的参考范围与女新生儿比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.4珠蛋白生成障碍性贫血新生儿脐血血细胞参数的诊断效能评价 珠蛋白生成障碍性贫血新生儿各项参数的最佳临界值分别为：男MCH<32.05 pg，MCV<100.15 fL，MCHC<321.50 g/L，RBC>4.73×1012/L，PLT>322.50×109/L；女MCV<100.15 fL，MCH<32.85 pg，RBC>4.61×1012/L，MCHC<322.50 g/L，PLT>320.50×109/L。珠蛋白生成障碍性贫血男新生儿的各项参数的约登指数MCH(88.18%)>MCV(87.82%)>MCHC(46.89%)>RBC(45.99%)>PLT(19.65%)，珠蛋白生成障碍性贫血女新生儿的各项参数的约登指数MCV(94.57%)> MCH(91.65%)>RBC(48.73%)>MCHC(35.72%)>PLT(24.31%)。MCH和MCV的最佳临界值对诊断新生儿珠蛋白生成障碍性贫血的准确性最高，RBC和MCHC的最佳临界值也有一定的参考价值，PLT的最佳临界值准确性最低。

表2 健康和珠蛋白生成障碍性贫血新生儿脐血血细胞参数的参考范围比较

表3 珠蛋白生成障碍性贫血新生儿脐血血细胞参数诊断效能评价

2.5MCV、MCH联合诊断效能 将男新生儿以MCH<32.05 pg，MCV<100.15 fL作为新生儿珠蛋白生成障碍性贫血诊断的阳性标准，其并联和串联诊断的约登指数分别为88.01%，87.98%，两种诊断方法的准确性差别不大；女新生儿以MCV<100.15 fL，MCH<32.85 pg作为新生儿珠蛋白生成障碍性贫血诊断的阳性标准，其并联和串联诊断的约登指数分别为94.61%，91.61%，并联诊断的准确性略高于串联诊断。

表4 MCV、MCH联合诊断效能(%)

3 讨 论

由于地域、环境、年龄、性别、遗传等因素的影响，WS/T 405-2012制订的血细胞分析的参考范围可能并不完全适用于每个地区，各个地区的脐血血细胞参数的参考范围往往也会有不同程度的差异[7]。高原等[8]发现，上海、长沙、昆明儿童的脐血血细胞参数Hb、MCV、HCT、PLT的参考范围均呈现不同程度的差异。根据各个地区情况的不同制订适合当地的实验室检验标准，将更加有助于对当地人群的健康情况进行评估。本研究显示，防城港地区新生儿WBC、MCV、PLT的参考范围与WS/T405-2012成人参考范围比较，上限与下限均上升，套用成人的参考范围是不合适的。研究发现，新生儿WBC水平的升高，可能与产妇分娩时的压力及环境改变等刺激，致使外周血中性粒细胞增多有关[9]。MCV和PLT的参考范围在新生儿中同样偏高，并随着年龄的增加而逐渐趋向于成年人[10-11]。本研究表明，建立符合当地的脐血血细胞参数参考范围，更适用于当地人群的脐血血细胞分析，更加有助于临床诊断。

MCV、MCH、MCHC的检测对于珠蛋白生成障碍性贫血的早期筛查有重要的作用[12]。在临床诊断中，β-珠蛋白生成障碍性贫血往往以外周血MCV<80 fL，MCH<28 pg，MCHC<320 g/L为诊断标准[5]。但是若沿用这种经验性的诊断界值，并没有考虑到当地的脐血血细胞参数参考的实际范围，诊断的准确性尚未明确。李冬等[13]应用MCV、MCH两项指标在筛查云南省腾冲市常见珠蛋白生成障碍性贫血的研究中发现，MCV、MCH用于α-珠蛋白生成障碍性贫血的最佳临界值分别为88.5 fL、27.95 pg。因此，本研究采集防城港地区健康新生儿和珠蛋白生成障碍性贫血新生儿的脐血血细胞参数并统计参考范围，优点在于更加符合当地的实际情况，提高珠蛋白生成障碍性贫血诊断的准确性。本研究结果显示男新生儿MCH<32.05 pg，MCV<100.15 fL时，约登指数分别为88.18%，87.82%；女新生儿MCV<100.15 fL，MCH<32.85 pg时，约登指数分别为94.57%，91.65%。男新生儿MCH、MCV并联和串联诊断的约登指数分别为88.01%，87.98%；女新生儿MCH、MCV并联和串联诊断的约登指数分别为94.61%，91.61%。说明该参考范围对于绝大多数进行脐血血细胞分析的新生儿，能正确诊断出其是否是珠蛋白生成障碍性贫血的患者或潜在无症状患者。此外，MCHC和RBC也具有一定的诊断价值，其约登指数接近50.00%。值得注意的是，MCV、MCH、MCHC、RBC参考范围的改变，在缺铁性贫血及珠蛋白生成障碍性贫血中有很高的相似度，对二者的鉴别需要进一步检测，如红细胞形态和骨髓涂片检查[14]。因此，在实际临床工作中，对于脐血血细胞参数的参考范围符合珠蛋白生成障碍性贫血的患者，才有进一步检测的必要，这样做不仅减轻了患者的负担，也大大避免了医疗资源的浪费。

综上所述，本研究建立了防城港地区脐血血细胞参数的参考范围和珠蛋白生成障碍性贫血脐血血细胞参数的最佳临界值。男新生儿MCH<32.05 pg，MCV<100.15 fL；女新生儿MCV<100.15 fL，MCH<32.85 pg作为诊断防城港地区新生儿珠蛋白生成障碍性贫血的标准准确性高。本研究为本地区新生儿脐血血细胞检测分析提供了理论依据，同时为临床提供了一个准确、经济、便捷、快速的珠蛋白生成障碍性贫血早期筛查的方法，值得临床推广。