农产品农药残留检测能力验证的前处理方法比较

郝玉敏

（长治市农产品质量安全检验监测中心，山西 长治 046000）

能力验证是内部质量控制的补充，是评价实验室能力的一种方法，是保证检测工作质量持续有效的手段[1]。能力验证考核需要在规定时间内完成前处理、上机测定、定性定量结果分析及原始记录填写等。前处理过程及数据分析是最为重要的2个环节，而传统方法前处理时间较长。因此，缩短前处理时间，确保检测结果准确是能力验证的关键。通过3种不同的前处理净化方式的比较，确定能力验证中最优前处理方法，以便提高能力验证完成速度。

1 材料与方法

1.1 仪器设备

超高效液相色谱-串联质谱仪（美国Waters I-class XEVO-TQD），电子天平（上海光正医疗仪器有限公司YP20002），匀浆机（上海弗鲁克F6/10），电热板（北京莱伯泰科仪器有限公司EG20A plus），氮吹仪（天津奥特赛恩斯仪器有限公司MTN003-007），氮气发生器（北京中惠普分析技术研究所PSAN-20），固相萃取装置（Lebtech w-spe24），离心机（中科中佳HC-3018），漩涡混合器（上海跃进医疗器械厂MX-S）。

1.2 试剂与材料

乙腈、甲醇、甲酸（Fisher色谱纯），氯化钠，QuEChERS EN提取盐包（4 g无水硫酸镁，1 g NaCl，1 g柠檬酸三钠二水合物，0.5 g柠檬酸二钠倍半水合物）及净化管（150 mg无水硫酸镁，50 mgPSA），氨基固相萃取柱（500 mg，6 mL）。烧杯，量筒，100 mL具塞量筒，50 mL及15 mL共2种规格离心管，10 mL移液枪及枪头，0.22μm有机相滤膜，一次性注射器，进样瓶等。

多菌灵、烯酰吗啉标准品购买自农业部环境保护科研监测所，浓度为100μg/mL，用甲醇稀释成10μg/mL储备液，-18℃冰箱中贮存备用。样品西葫芦及橙子由农业农村部环境质量监督检验测试中心（天津）邮寄。

1.3 实验条件

1.3.1 色谱条件

BEH-C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 um）；流动相A为甲醇，B为0.05%甲酸水溶液（V/V）。梯度洗脱条件：初始10%A；0～1 min，10%～50%A；1～2 min，50%～60%A；2～4 min，60%～80%A；4～8 min，80%～95%A；8～9 min，95%A；9～12 min，95%～10%A；流速0.3 mL/min；柱温：40℃；进样量5μL。

1.3.2 质谱条件

电喷雾离子源正离子扫描模式（ESI+）；离子源温度150℃；毛细管电压3 kV；锥孔电压30 V；脱溶剂气温度450℃；脱溶剂气流速1 000 L/hr；锥孔气流速50 L/hr；碰撞能量20 eV；多反应监测MRM模式，质谱参数见表1。

表1 质谱参数Tab.1 The mass spectrum parameters

1.4 样品前处理方法

（1）按NY/T 761-2008第三部分[2]进行前处理。

（2）同NY/T 761-2008标准中提取过程，从具塞量筒中取10.00 mL乙腈于烧杯中，缓缓通入空气，蒸发至近干后用70%甲醇定容至5.0 mL。过0.22μm有机相滤膜，装入2 mL样品瓶。

（3）称10.0 g样品于50 mL离心管，加10.0 mL乙腈，震荡，加提取盐包，震荡1 min，5 000 r/min离心5min，取上清液2 mL加入2支EN净化管填料，漩涡混匀，8 000 r/min离心5 min。注射器吸取样品过0.22μm有机相滤膜，装入2 mL样品瓶。

1.5 测定

样品先进行初检定性，明确样品中目标农药及大致浓度，再准确定量测定。样品测定及添加回收测定在相同的条件下进行。每个样品平行测定2次。

1.5.1 结果质量控制

测定样品的同时，选择接近初检农药浓度水平进行相同样品的目标农药添加回收测定。加标后静置1 h，然后分别按照3种方法进行前处理测定。最终能力验证上报结果可以根据需要选择是否进行回收率校正。

1.5.2 溶剂及基质标样配制

准确吸取10μg/mL储备液各1 mL于10 mL容量瓶中，分别配制所需浓度的溶剂标及基质标。

2 结果与分析

2.1 基质效应

基质效应[3]=基质标样峰面积/溶剂标样峰面积×100，多菌灵溶剂标样峰面积为596 188，基质标样峰面积为293 794，基质效应为49%；烯酰吗啉溶剂标峰面积为476 447，基质标样峰面积为254 838，基质效应为53%。基质效应<70%为强基质效应，因此测定液质联用仪测定多菌灵与烯酰吗啉应采用配基质标样进行测定，用溶剂标样测定结果偏低。

2.2 3种前处理方式测定结果

采用3种方法前处理后，测定结果如表2所示。通过比较发现采用方法一和三处理后多菌灵测定回收率偏低，分别为75.0%和50.3%，采用方法二测定多菌灵回收率为88.7%，采用方法一和二烯酰吗啉测定回收率均大于90.0%，综合考虑，采用方法二结果校正后上报能力验证系统。

2.3 能力验证结果

将烯酰吗啉和多菌灵检测结果进行回收校正后上报能力验证系统，通过稳健统计Z值法进行结果统计与评价：|Z|<3，满意结果；|Z|≥3，不满意结果。能力验证结果见表3。烯酰吗啉能力验证Z值为0.7，多菌灵能力验证结果为1.0，结果均满意，判定合格。

表2 三种方法测定结果Tab.2 The results of three methods

表3 能力验证结果Tab.3 The results of proficiency test

3 结论

不同的农药性质不同，前处理的净化过程可以降低基质的干扰，达到较好的净化效果，但同时有些吸附剂对农药有较强的吸附作用，如多菌灵含有苯环平面结构容易被吸附从而降低回收率。通过能力验证中3种前处理方式的比较，方法一按照NY/T 761-2008第三部分方法，方法二在方法一的基础上去掉净化步骤，方法三是采用QuEChERS方法，通过检测发现QuEChERS方法测定多菌灵回收率低至50.3%，方法二提取液不经过净化直接蒸发至近干多菌灵的回收效果是三种方法里最好的。通过能力验证选取最优前处理方法应用于检测工作中，不仅能确保检测数据真实、可靠，而且还能提高检测技术水平和工作效率。