7项呼吸道病原体IgM抗体检测在儿童呼吸道感染中的结果分析

华纯芳　张纯林　高锦伟　张潘

【摘要】目的：探讨7项呼吸道病原体IgM抗体在儿童呼吸道感染中的诊断价值。方法：收集因呼吸道感染来无锡市第八人民医院住院的患儿2898例，采用间接免疫荧光法检测7种病原体，从病原体的构成、季节分布、性别差异、年龄差异等几方面分析其流行病学特征。结果：2898例患儿中共检出阳性1170例，阳性率40.37%，以肺炎支原体-IgM（MP-IgM）的检出率最高（27.78%） ;混合病毒感染检出107例（3.69%），占全部感染例数的9.15%，其中MP与乙型流感病毒-IgM（IFB-IgM）的混合感染在混合感染中所占比例最高为5.64%;不同季节呼吸道病毒检出率不同，以秋季的检出率最高（53.49%）;不同性别间差异具有统计学意义（P<0.05），女童呼吸道病毒检出率较高（45.95%）;不同年龄组呼吸道病毒检出率不同（P<0.05），4～6岁患儿阳性检出率最高（53.75%）。结论：儿童呼吸道病原体检出率较高，MP是无锡地区儿童呼吸道病毒感染的主要病原体，在4～6岁患儿和秋冬季高发，要加强防护。

【关键词】呼吸道病原体;间接免疫荧光法;儿童

[中图分类号]R725.6;R446.6 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249（2021）10-0184-02

急性呼吸道感染是一组严重危害人类健康的疾病，其传染力极强，传播速度快，发病率占急性传染病的首位，在我国每年都有不同程度的流行[1]。呼吸道病原体种类和致病率因不同国家、不同地区、不同季节等而有所差异，同一病原体可引起疾病的不同临床表现，相同的临床表现也可能是由不同或多种混合病原体引起。呼吸道感染是儿童时期常见的疾病之一，发病初期，快速诊断呼吸道感染病原体至关重要，否则，医生很难仅凭临床症状，对病原体进行针对性治疗，常会致抗生素的滥用，延搁患儿的诊断和治疗。本文通过对7项呼吸道病原体IgM抗体的检测结果分析，旨在为儿童预防呼吸道感染及临床诊断治疗提供依据。

1 解决方法与执行过程

1.1 标本来源 收集2019年1月1日～2019年12月31日來无锡市第八人民医院住院的呼吸道感染患儿2898例，临床表现为发热、咽痛、流涕、咳嗽等症状，其中男1590例，女1308例。年龄在1个月至18岁之间，<1岁318例（占10.97%），1～3岁1258例（占43.41%），4～6岁800例（占27.61%），>6岁522例（占18.01%）。

1.2 标本采集 清晨抽取患儿空腹静脉血3ml，3500r/min分离血清，当日完成检测。

1.3 试剂和仪器 试剂盒为欧蒙医学实验诊断股份公司提供的呼吸道病原体谱抗体IgM检测试剂盒，采用间接免疫荧光法对患者血清标本进行7项呼吸道病原体[甲型流感病毒-IgM（IFA-IgM），乙型流感病毒-IgM（IFB-IgM），肺炎支原体-IgM（MP-IgM），肺炎衣原体-IgM（CP-IgM），腺病毒-IgM（ADV-IgM），呼吸道合胞病毒-IgM（RSV-IgM），副流感病毒-IgM（PIV-IgM）]检测。仪器为倒置荧光显微镜（EUROStar Ⅲ Plus），旋涡混合器为上海医科大学仪器厂生产（XW-80A），台式离心机购置北京白洋医疗器械有限公司（G16），生物安全柜（苏净安泰BSC-130011132）。严格按照试剂盒说明书操作及结果判断。上述所有生物试剂都有正式批号，均在有效期内使用。

1.4 检测方法 ①取患儿血清22.5ul，用样本稀释液1：10稀释后，3000r/min离心10min去除沉淀，②取30ul稀释后的样本上清液加至除肺炎支原体以外的反应区;取22.5ul稀释后的样本上清液，再用PBS吐温缓冲液1：10稀释，取上述卜100稀释后的标本30ul加至肺炎支原体的反应区，阴阳性对照同样本，③18～25℃温育30min，用PBS吐温缓冲液冲洗后立即放入装有PBS吐温缓冲液中浸泡至少5min，④取出自然风干后滴加25ul FITC标记的抗人免疫球蛋白，⑤重复步骤③，⑥取出自然风干后，滴加10ul甘油，用荧光显微镜200倍观察荧光模型。

1.5 统计学分析 用SPSS22.0软件对数据进行统计学分析，各组间病原体阳性率比较采用x2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 单项呼吸道感染病毒阳性检出率 2898例标本中共检出阳性1170例，阳性率40.37%，以MP的检出率最高（27.78%），其它依次为IFB（7.25%），CP（2.24%），PIV（1.62%），IFA（0.93%），ADV（0.41%），RSV（0.14%）。

2.2 混合病原体感染结果 2898例标本中，三重感染本研究仅检出2例，都为MP+IFA+IFB，混合感染中以MP或IFB参与的感染最多，占比9.15%（107/1170），见表1。

2.3 不同季节呼吸道病原体检出率 MP在四季中的阳性率均最高，IFB在冬季的阳性率最高，PIV在秋季的阳性率最高。RSV全年仅4例，秋冬季各2例。详见表2。

2.4 不同性别与呼吸道病原体感染的关系 2898例标本中，男女性别间差异有统计学意义（x2=30.78，P<0.05）。见表3。

2.5 各年龄组中呼吸道病原体的检出情况 四个年龄组中，4～6岁患儿阳性检出率最高（53.75%），其次为>6岁组（40.8%），1～3岁组（38.79%），<1岁组（12.26%），前三组阳性检出率差异有统计学意义[6岁组无统计学意义（P>0.05）。MP、IFB、CP在4～6岁组均高于其他年龄组。

3 讨论

本研究对具有呼吸道感染症状的2898名患儿采用间接免疫荧光法进行7项呼吸道病原体IgM检测，该检测方法方便、快速，一次可检测7个项目，既可检测出单项感染，又可发现病原体的混合感染，其结果方便临床医生正确选择有效的抗感染药物，有利于对患者进行针对性治疗。2898例患儿共检测出1170例阳性，阳性率40.37%（1170/2898），与韩欢等[2]的研究结果有很大的区别，韩欢等研究结果的阳性率为19.20%，这可能与不同地区的气候差异、不同人群、不同检测方法有关，韩欢等采用的是直接免疫荧光法，RSV的感染阳性率最高，而本研究采用的间接免疫荧光法，以MP的感染最高27.78%，与陈文华等[3]报道的MP阳性率26.39%相近，其次是IFB（7.25%），MP、IFB感染率占阳性病例的86.75%。混合感染107例，混合感染率3.69%（107/2898），其中MP+IFB混合感染66例，MP+PIV混合感染 19例，MP+CP混合感染14例，三重感染本研究仅检出2例，都为MP+IFA+IFB，混合感染中以MP或IFB参与的感染最多，占阳性病例的9.15%（107/1170）。从统计结果来看，无锡地区秋冬季引起呼吸道感染的主要病原体为MP，其次为IFB，对于采取针对性的预防措施有一定的意义，可以起到一定的预防作用，减少MP的感染。肺炎支原体主要通过呼吸道飞沫传播，容易造成患儿的呼吸道感染，感染一种病原体后患者的身体处于较弱阶段，免疫力下降，如果与其他患儿接触，交叉感染的机会就会增加[4]。

综上所述，本地区儿童呼吸道病原体感染的首要病原是MP，在4～6岁的孩子中发病率最高，秋冬季高发，女童的阳性率高于男童。通过本次研究可知，7项呼吸道病原体IgM抗体检测在儿童呼吸道感染中具有较高的应用价值，能及时为临床提供病原学资料，为儿童呼吸道感染的精准医疗提供依据，并对减少抗生素滥用也具有重要意义。

参考文献

[1]于娟，李红，饶华祥，等.流感高发季节150例流感病毒核酸阴性的流感样病例鼻咽分泌物呼吸道病毒检测分析[J].山东医药，2018，58（31）：40-43.

[2]韩欢，古今刚，吴文文，等.11744例儿童7项呼吸道病毒抗原检测结果[J].武汉大学学报（医学版），2019，40（3）：425-428.

[3]陈文华，何宝明，毋崇岭.住院患儿呼吸道病毒感染检测结果分析[J].山西医药杂志，2018，47（20）：2478-2480.

[4]杨丽华，张清慧，吴毅凌，等.上海市松江地区急性上呼吸道感染患儿呼吸道病毒感染研究[J].国际病毒学杂志，2017，24（6）：388-393.

作者简介：华纯芳（1981.11-），女，本科学历，主管技师，研究方向：医学检验临床免疫学。