蓬安县规模化鸡场大肠杆菌的耐药性分析

赵秦会

（四川省南充市蓬安县农业农村局 637800）

为了解南充市蓬安县规模化鸡场大肠杆菌的耐药性，从而指导兽医在临床上对鸡大肠杆菌的防治。 本研究对蓬安县规模化养鸡场分离的310 株大肠杆菌采用纸片扩散法对其进行耐药性分析。 结果显示310 株大肠杆菌出现多重耐药，对9 类27 中抗生素出现不同程度耐药，严重者高达90.6%的耐药，对头孢类、氨基糖苷类、四环素类耐药率超过了60%；对亚胺培南、氨曲南、氟苯尼考和复方新诺明的比较敏感， 分别为：18.7%、11.6%、11.3%和18.1%。

大肠杆菌病在养殖行业极为常见，它可以引起多种动物的发病，鸡源大肠杆菌对养鸡业来说也是极大的挑战，鸡大肠杆菌往往威胁雏鸡，发病率和致死率都很高，给养殖业带来了巨大风险，严重制约了养鸡业的发展。 同时，抗生素被广泛应用于预防或控制动物的大肠杆菌感染， 但抗生素的广泛及不合理的使用造成了日趋严重的耐药现象，在抗生素的压力选择下，沙门菌对于抗生素的耐药和交叉耐药现象日益加剧使得我们对于沙门菌的防控越来越难，也间接地危害着人类的身体健康。 本实验通过27 种抗生素的监测，了解其耐药情况，从而指导临床用药，提高兽医在临床上养鸡水平。

1 材料与方法

1.1 菌株

经过分离鉴定的310 株蓬安县规模鸡场大肠杆菌

1.2 主要试剂

胰蛋白胨、酵母粉、琼脂粉，购自于英国OXID 公司，麦康凯琼脂粉购置于北京奥博星生物技术有限公司。 药敏纸片、购自杭州微生物生化试剂有限公司。

1.3 菌株复苏

1.3.1 将-80℃保存的经过鉴定的大肠杆菌分离株取出恢复室温时即划线于LB 平板，37℃培养18h。

1.3.2 挑取LB 平板上的单菌落接种于LB 液体培养基，37℃摇床培养至对数期。

1.4 药物敏感性试验

1.4.1 取200 μL 对数期菌液均匀滴加于LB 平板，用玻璃棒在平板涂抹均匀。

1.4.2 待LB 平板菌液晾干后， 在平板上均匀贴4～6 个药敏纸片，药敏纸片间及药敏纸片与平板边缘距离不小于30mm。

1.4.3 贴好药敏纸片的LB 平板37℃培养18h， 游标卡尺量取抑菌圈直径。 每个抑菌圈量取3 次，取平均值。

1.4.4 根据《动物源细菌抗菌药物敏感性试验纸片法与稀释法执行标准》[39-40]和《抗菌药物敏感性试验执行标准；第二十五版资料增刊》[39-40]判定药敏试验结果。

2 结果

310 株大肠杆菌出现多重耐药，27 中抗生素出现不同程度耐药，严重者高达90.6%的耐药，对头孢类、氨基糖苷类、四环素类耐药率超过了60%；对亚胺培南、氨曲南、氟苯尼考和复方新诺明的比较敏感，分别为：18.7%、11.6%、11.3%和18.1%，详细见下表。

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3 讨论

为初步摸清蓬安县鸡源大肠杆菌的耐药情况， 本研究选择不同种类的27 种抗生素进行试验，结果让人堪忧，随着养殖业的发展和抗生素的不合理使用甚至滥用， 导致目前临床用药对预防治疗鸡大肠杆菌带来了巨大挑战。

高崧等人2014 年对山东和江苏分离到的154 株致病性大肠杆菌做了药敏分析，12 种抗生素中，氨苄青霉素、强力霉素、磺胺异恶唑、先锋霉素VI 的耐药率超过80%等，刘秀梵对黑龙江分离的41 株鹅大肠杆菌进行药敏试验，发现仅对氧氟沙星、复达欣和复方新诺明敏感，对氨苄青霉素、阿米卡星、庆大霉素等高度耐药，做出来的效果和我们的基本一致，原来有效的抗革兰氏阴性的氨基糖苷类和广谱四环素类居然在长期的使用过程中，耐药性让人不敢相信，几乎没有效果，这给我们临床用药敲响的警钟。

在今后的研究中， 我们应进一步加强南充市蓬安县鸡源大肠杆菌的药物敏感性分析， 通过大样本量获取本县鸡源大肠杆菌的耐药规律， 为没有条件进行药物敏感性测定的养殖户及农户供用药指导为我们县养鸡行业带来福利。