注射用喷昔洛韦的制备及质量研究

王校生(浙江尖峰药业有限公司，浙江 金华 321000)

0 引言

注射用喷昔洛韦适用于严重带状疱疹患者，如出血性带状疱疹，坏疽性带状疱疹，播散性带状疱疹，严重疼痛的早期带状疱疹等和免疫机能障碍并发的带状疱疹。长期以来，喷昔洛韦在用药剂型上一直有着较大的局限性。国内外只有外用霜剂和乳膏剂两种剂型。而这些剂型用于重症患者以及免疫功能低下患者都容易产生严重的并发症，实践证明，用注射给药方式更有利于快速控制病情。本文对注射用喷昔洛韦(冻干粉针)的处方及制备工艺进行了筛选，对其质量及安全性等进行了研究与评价。

1 处方研究

喷昔洛韦与阿昔洛韦一样，水中溶解度较小，参照注射用阿昔洛韦工艺，将喷昔洛韦转为钠盐，加入合适的赋形剂，灌装，冷冻干燥。

1.1 赋形剂的选择

在实验室用的冷冻干燥机上，我们对比了不加赋形剂及使用目前冻干制剂中常用辅料低分子右旋糖酐和甘露醇作为赋形剂，方法如下：取喷昔洛韦适量，加5%氢氧化钠溶液溶解至澄清，用水稀释至100 mg/mL的浓度。取低分子右旋糖酐适量，加水溶解配制1%、2%、4%三个溶液浓度。取甘露醇适量，加水溶解配制成4%、6%、8%三个溶液浓度。将喷昔洛韦溶液分别用水及不同低分子右旋糖酐液和甘露醇溶液等体积稀释一倍，用10 mL西林瓶灌装，5 mL/瓶，一同放入冻干机内冷冻干燥，结果表明加2%低分子右旋糖酐的成型好，无萎缩。

1.2 酸碱度

喷昔洛韦在水中的溶解度很低，因此提高溶解度是本品制备过程中需要解决的主要问题。经初步试验，加入有机溶媒和某些表面活性剂对喷昔洛韦溶解度的增加不显著，而在碱性条件下喷昔洛韦溶解度有较大提高，因此制备时加入氢氧化钠，使其成钠盐后呈较强的碱性，以250 mg/5mL，完全成钠盐溶解后pH值约为11.2～11.3，但冻干后溶于20 mL水中，pH值会降低0.4左右，参照阿昔洛韦注射剂质量标准，将pH值控制在10.5～11.5，配料时将pH值控制在11.3左右。

1.3 装量体积

从实验中发现，装量体积小于4 mL，制品在冻干过程中，由于冻干箱体传热不均匀，冻干曲线不易掌握，部分产品易出现局部萎缩，而且易碎，而装量在4～5 mL时，萎缩产品较少见，产品整齐美观。根据目前使用10 mL西林瓶情况，将装量定为4～5 mL/瓶。根据研究结果，确定注射用喷昔洛韦处方如下：以1 000瓶，0.25 g规格计：喷昔洛韦250.0 g，5%氢氧化钠适量，低分子右旋糖酐100.0 g，加注射用水至5 000 mL。

2 工艺研究

2.1 配料

按处方量称取喷昔洛韦，用5%的氢氧化钠溶解至澄清(控制pH值小于11.5)低分子右旋糖酐用注射用水先配制成10%的溶液，加0.5%的活性炭，煮沸30 min，冷却过滤。将上述两种溶液混合，再加入0.5%的活性炭，搅拌30 min，过滤，取样测含量，加注射用水至规定体积，测pH值。

2.2 过滤除菌

上述溶液经0.22 μm滤膜过滤至A级洁净区内。

2.3 灌装

经灌装机灌装，5.0 mL/瓶，半落塞。

2.4 冷冻干燥

灌装制品进箱后，预冻4 h，搁板温度至-45 ℃以下，制品温度为-20 ℃以下，开真空泵制品开始升华，升华阶段制品温度控制在-15 ℃以下(制品共熔点约为-9 ℃)，待水线到底后，制品温度缓慢升温至37 ℃左右，搁板温度为40 ℃，保温8 h，真空下压塞出箱。由于本品有较强的引湿性，故保温时间比一般冻干制剂产品延长，以保证水分控制在标准以内。

2.5 成品

制品出箱后，轧盖，检验合格后，包装得成品。

3 注射用喷昔洛韦的质量评价

(1)性状。本品三批样品(批号200801、 200802 、200803 以下同)均为白色疏松块状物。

(2)碱度。取本品三批直接测定，三批样品pH值分别为11.4、11.3、11.3。

(3)溶液的澄清度和颜色。取本品，依照相关规定进行检查，结果三批样品均符合规定。

4 质量控制方法研究

4.1 材料与仪器

新世纪T6型紫外分光光度法计，AE-240型电子天平，喷昔洛韦对照品由中国药品生物制品检定所提供，对照品含量为99.3%，注射用喷昔洛韦由浙江尖峰药业有限公司提供(规格为0.25 g)。

4.2 实验方法与结果

4.2.1 标准溶液的配制

取喷昔洛韦对照品约50 mg，精密称定，置50 mL容量瓶中，加水溶解并定量稀释至刻度，精密吸取1 mL，置100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀作为对照品溶液。

4.2.2 标准曲线的制备

精密称取喷昔洛韦对照品50 mg，置50 mL容量瓶中，加水溶解并定容得1.0 mg/mL溶液，各精密量取该溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，分别置100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，以水为空白对照，在253 nm波长处测定吸收度，以吸收度对浓度进行回归计算，得回归方程：Y=0.044 4+0.05114x,r=0.999 6,结果表明：喷昔洛韦在水中溶解后，浓度在10.0～50.0 μg/mL范围内，浓度与吸收度呈现良好的线性关系。

4.2.3 样品溶液的含量测定

取装量差异项下的内容物，精密称定适量(约相当于喷昔洛韦0.25 g)，置250 mL容量瓶中，加水200 mL溶解后，加稀盐酸1 mL，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取1 mL至100 mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，照紫外-分光光度法(中国药典2015版四部)，在253 nm波长处测定吸收度。另精密称取喷昔洛韦对照品，加水溶解并定量稀释成每1 mL中约含10 μg的溶液，同法测定，计算，即得。含量测定结果分别为：64.6%、66.76%、67.36%，标示含量分别为96.40%、99.6%、97.0%。

4.2.4 精密度试验

取同批对照品溶液，重复测定5次，结果RSD=0.20%。精密度良好。

4.2.5 回收率试验

取已知含量的喷昔洛韦供试品(约相当于喷昔洛韦0.25 g)，精密称定(共5份)，按样品溶液的配制方法制备供试液，按样品测定方法测定，计算回收率。结果，平均加样回收率为99.34%。RSD=0.31%(n=5)。

4.2.6 重复性试验取同一批次供试品5份，分别按样品溶液配制方法操作、测定、计算喷昔洛韦含量，得平均值X=66.10%，RSD=0.20%

4.2.7 稳定性试验

取同一批供试品溶液，分别在不同时间测定，结果表明，供试品在6 h内稳定。

4.2.8 有关物质检查

取本品1瓶，加水200 mL溶解，加入1 mL稀盐酸，再用流动相稀释制成每1 mL中含0.2 mg的供试品溶液和每1 mL中含2 μg的对照溶液。照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部)测定，用十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂，甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(1:9)为流动相，检测波长为253 nm，理论板数按喷昔洛韦峰计算应不低于2500，喷昔洛韦与其相邻杂质峰的分离度不小于1.5。取对照溶液20 μL注入液相色谱仪，调整检测器灵敏度，使主成分峰高为满量程20%～25%，再精密取供试品溶液20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，量取各杂质峰面积总和，不得大于对照溶液的主峰面积(1.0%)。三批样品检测结果分别为0.5%、0.5%、0.7%，结果符合规定。

5 结语

通过实验和查阅相关文献，我们对处方和工艺进行了研究，筛选了工艺条件，得出最佳处方和制备工艺，并建立了用紫外分光光度法测定喷昔洛韦含量的方法。

实验结果表明：应用紫外分光光度法测定注射用喷昔洛韦的含量操作简便，灵敏度高，结果可靠，可用于注射用喷昔洛韦的含量测定。文献报道有喷昔洛韦栓、喷昔洛韦脂质体和喷昔洛韦注射液的制备和质量控制，而本文讲述了注射用喷昔洛韦(冻干粉针剂)的制备和质量研究，该剂型具有比其他任何剂型稳定等特点，而且注射剂型起效更迅速，可快速控制病毒感染，对严重带状疱疹具有更快更好的疗效，因此具有广阔的市场，将非常适合我国目前医药卫生状况，适应广大患者的要求。