妇科肿瘤患者外周血T 淋巴细胞亚群研究进展

王聪，贾喜花，李敏

（1.承德医学院，河北 承德 067000；2.保定市第一中心医院，河北 保定 071000）

0 引言

子宫颈癌、子宫内膜癌及卵巢癌是女性生殖器系统常见的三大恶性肿瘤，严重困扰了女性身体健康和生命安全。目前，随着免疫治疗的兴起，机体的免疫状态与肿瘤的关系也越来越受到关注。其中，T 淋巴细胞亚群主要以细胞免疫功能来作为机体免疫功能的一大组成部分，不仅参与肿瘤免疫激活，在免疫逃逸中也发挥着重要作用。随着肿瘤的发生、发展，机体的免疫状态也会随之发生动态的波动。因此，通过检测肿瘤患者外周T 血淋巴细胞亚群的数量及比例，来对肿瘤患者的免疫状态进行评估和监测，从而为临床医生早期诊断以及设计切实可行的免疫治疗方案提供依据。

1 T 淋巴细胞亚群相关概述

淋巴细胞主要是由骨髓中的造血干细胞分化、发育而来，其中的一部分造血干细胞随血流进入胸腺，并在胸腺中发育成熟，成为T 淋巴细胞，另一部分在骨髓中发育成熟，称为B淋巴细胞[1]。根据T 细胞表面标志及功能主要分为：CD4+ T 细胞、CD8+ T 细胞、CD4+CD25+T 细胞等。其中CD4+ T细胞又称为辅助T 细胞(helper T cell，Th)，具有协助体液免疫和细胞免疫的功能。CD8+ T 细胞又称为细胞毒性T 细胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)，具有直接杀伤靶细胞的功能。CD4+CD25+T 细胞又称为调节性T 细胞(regulatory T cell，Treg)，是一类发挥免疫抑制作用的T 细胞亚群。

1.1 CD4+T 细胞在肿瘤免疫中的作用

CD4+T 细胞又称为辅助性T 细胞，在细胞免疫以及体液免疫中均参与发挥免疫反应，主要组织相容性复合体- Ⅱ(major histocompatibility complex- Ⅱ，MHC- Ⅱ) 递呈的多肽抗原反应可以将其激活，Th 细胞被激活后能够通过分泌多种细胞因子来辅助调节或者增强免疫反应[2-3]。根据其分泌的细胞因子和功能的不同，将其主要分为Th1 亚群和Th2 亚群，其中Th1 细胞被认为是参与肿瘤免疫激活的主要亚群，其主要分泌IL-2、 IFN-γ、肿瘤坏死因子 (tumor necrosis factor，TNF)等介导细胞免疫，协助CTL 激活，使其扩增来发挥特异性免疫反应，另外也可以增加NK 细胞的细胞毒性，发挥抗肿瘤作用；Th2 细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-10 等细胞因子，产生刺激信号，介导机体体液免疫应答，作用于B 细胞的增殖分化，来增强肿瘤非特异性免疫反应。同时Th2 还有抑制Th1 增殖的功能[4]。

1.2 CD8+T 细胞在肿瘤免疫中的作用

CD8+T 细胞又称为细胞毒性T 细胞，能直接攻击带有变异抗原的肿瘤细胞，在肿瘤细胞免疫中起主要作用。抗原提呈细胞（APC）将肿瘤抗原加工后与主要组织相容性复合体-Ⅰ（MHC-Ⅰ）类抗原结合形成MHC-Ⅰ复合物，提呈于细胞表面，T 细胞通过其特异性受体(TCR)识别，与该复合物结合特异性杀伤肿瘤细胞[5]。CTL 的特异性杀伤作用主要有两条途径来进行，一是穿孔素-颗粒酶途径，CTL 细胞被激活后通过释放细胞毒素来杀伤靶细胞，其中穿孔素的作用是使靶细胞膜穿孔形成孔道，颗粒酶含有颗粒溶解素，其通过孔道进入靶细胞，使细胞溶解凋亡；二是死亡受体途径，即CTL 表面的Fas 配体通过与靶细胞表面的Fas 分子相结合，使靶细胞内Caspase 酶活化，从而诱导靶细胞凋亡[6-7]。

1.3 CD4+CD25+Treg 细胞在肿瘤免疫中的作用

CD4+CD25+Treg 属于调节性T 细胞，主要通过各种细胞和体液机制发挥其免疫抑制功能。多项研究表明，在多种癌症患者的外周血以及肿瘤组织微环境中CD4+CD25+Treg细胞数量增加[8]。Treg 细胞可以抑制多种效应淋巴细胞，其主要机制有：通过细胞毒性T 淋巴细胞抗原-4(CTLA-4)与APC 介导抑制效应T 细胞的激活；分泌具有免疫抑制功能的细胞因子(如IL-10、IL-35 和TGF-β)；将ATP 转化为腺苷，防止T 细胞活化；分泌颗粒酶、穿孔素破坏效应细胞[9-11]。另外，有证据表明程序性细胞死亡-1(PD-1)是Treg 细胞和效应T 细胞的负调节因子，提示PD-1 阻断增强了Treg 细胞的抑制功能[12]。Treg 细胞通过抑制抗肿瘤免疫反应，增强肿瘤逃避免疫清除的能力，使其成为肿瘤免疫治疗的重要方式之一。通过减少Treg 细胞的数量和抑制其活性可能是一种潜在且有效的对抗肿瘤进展的策略。

2 常见妇科肿瘤与T 淋巴细胞亚群研究进展

2.1 子宫颈癌与T 淋巴细胞亚群研究进展

已有研究表明，宫颈癌是一种免疫原性恶性肿瘤，提示高危型人乳头状瘤病毒（HPV）持续性感染与宫颈癌的发生有密切关系[13]。当女性感染HPV 病毒后，大多数能依靠机体自身免疫系统将其清除。但是当机体免疫功能降低，高危型HPV 持续性感染，就可能产生宫颈病变，直至发展成为宫颈癌。宋利[14]、刘春玲[15]、于鸿等[16]通过检测宫颈癌患者与健康女性外周血T淋巴细胞亚群数量及比例对比分析，研究结果提示：宫颈癌患者外周血CD3+、CD4+T 细胞以及CD4+/CD8+比值相比正常健康女性显著降低，而CD8+T 淋巴细胞增高，并且CD3+、CD4+T 淋巴细胞比值随患者临床分期的增加而逐渐降低，反之，CD8+T 细胞随患者临床分期增加而逐渐增高。从而提示机体的免疫功能随着临床分期的增加而降低，两者呈负相关。Hogan 等[17]研究提示手术创伤会抑制机体的免疫反应，主要是由于创伤导致的神经内分泌反应释放激素抑制。王新会等[18]、童武松[19]、肖秀兰[20]探究了放化疗或单纯放疗对机体细胞免疫功能的影响，在治疗前后检测患者淋巴细胞亚群水平，结果提示：宫颈癌患者在放疗或放化疗治疗后外周血CD3+、CD4+T 以及CD4+/CD8+T 比值相比治疗前均明显偏高，CD8+T 细胞、treg 细胞所占比值比治疗前下降，并且这一现象在放化疗组更为显著。综上所述，宫颈癌患者的免疫功能的变化贯穿了整个疾病的发生发展及治疗的过程，检测机体免疫功能变化，为宫颈癌患者的诊断、治疗及预后都有着重要意义，手术、放化疗在治疗肿瘤的过程中也对机体的免疫功能造成损伤，因此免疫治疗也更成为宫颈癌治疗的新探索。

2.2 子宫内膜癌与T 淋巴细胞亚群研究进展

国内外一些研究通过检测子宫内膜癌患者与正常健康对照人群外周血T 细胞亚群的差异，探索T 细胞亚群检测是否可以为子宫内膜癌的提供诊断依据。Pascual-García 等[21]的研究纳入了35 例子宫内膜癌、22 例健康对照，通过检测外周血中T 淋巴细胞亚群比例，研究表明：子宫内膜癌患者外周血中CD3+、CD4+T 细胞数目相对于健康献血者明显降低，CD8+T 细胞数目所占比例无明显变化。Zhang 等[22]研究提示了相比于健康人群，子宫内膜癌患者外周血中Treg 细胞水平显著增加。此外，有多项研究表明，CD8 高表达的子宫内膜癌患者的无进展生存期显著延长，可作为患者总生存率的独立预测指标[23-24]。上述研究均表明了T 淋巴细胞亚群检测在子宫内膜癌检测的应用价值，动态监测子宫内膜癌患者T 淋巴细胞亚群的变化，对判断早期诊断、判断患者预后、指导个体化治疗均有重要意义。

2.3 卵巢癌与T 淋巴细胞亚群研究进展

多项国内外研究显示，相比于健康对照组，卵巢肿瘤患者外周血和肿瘤组织中CD4+CD25+Treg 细胞的比例明显升高，而Treg 细胞的增多将抑制机体其他免疫细胞的激活和活化，增加肿瘤细胞免疫逃逸，利于肿瘤生长[25-26]。隋雪梅等[27]纳入114 例卵巢癌患者，应用流式细胞仪检测其外周血T 淋巴细胞亚群水平，研究结果提示：随着肿瘤临床分期的增加，患者CD3+、CD4+T 细胞、CD4+/CD8+T 比值逐渐减少而CD8+T细胞逐渐升高，这也证实了患者免疫状态与临床分期有直接关系。随着肿瘤患者的临床分期的增加，其外周血T 淋巴细胞亚群受到抑制的程度也随之逐渐增强，从而导致机体抗肿瘤免疫功能逐渐降低，进一步促进了肿瘤进展。因此，外周血T 淋巴细胞检测对于检测卵巢癌患者的免疫功能状态的变化，以此判断治疗疗效、判断预后以及对于免疫治疗的探索均有积极作用。

3 小结

在抗肿瘤免疫中，T 淋巴细胞亚群所代表的细胞免疫起着主要作用。其数量和比例在一定条件下可以体现机体的免疫状态。在预测疗效、预后等方面均有一定潜力，这还需要大样本的临床试验验证。抗肿瘤免疫的免疫治疗是继传统手术、化学药物、放射治疗之后的具有突破性且疗效佳的抗肿瘤疗法，成为肿瘤生物治疗的又一法宝。T 淋巴细胞亚群可以作为反映肿瘤患者免疫状态的指标，具有方便、可重复的优势。如何更加标准化的进行随访、检测，通过检测患者免疫状态寻找免疫治疗的最佳时机，为免疫治疗与化疗、放疗联合提供依据，这可能将成为接下来值得关注的重点。