Microrna 在乳腺癌中的相关研究进展

2021-01-06白雨霆罗灿罗文依王舒淇王东生

世界最新医学信息文摘 2021年15期

白雨霆，罗灿，罗文依，王舒淇，王东生

(四川省南充市川北医学院附属医院检验科，四川南充 637000）

0 引言

微小RNA(miRNA)是广泛存在于动物、植物、微生物乃至病毒中的单链非编码RNA，长度大约在19-25 个核苷酸，通过与mRNA 的3 端非翻译区（3"-UTR）结合而导致翻译抑制和mRNA 的降解。miRNA 广泛参与了细胞学功能调节，包括细胞的分化与发育、细胞增殖、细胞凋亡等过程。大量研究表明，miRna 还参与了多种疾病的发生发展，包括肿瘤的发生发展。近年来大量研究发现，miRna 在乳腺癌的发生、转移、侵润等多个发面均发挥着重要作用[1]，本文将聚焦最近5 年来miRna 在乳腺癌早期筛查、预后的生物标志物、miRNA 作为乳腺癌不同亚型的预测靶点、miRNA 与乳腺癌的靶向治疗上的研究发展进程做一综述。

1 miRNA 用于乳腺癌早期筛查

乳腺癌的早期诊断和发现对于提高乳腺癌患者的生存率有重大意义。所以Gloria Bertoli 等人运用微证列和实时荧光定量技术发现失调的miRNA 在乳腺癌中的表达是有规律可循的[2]。失调的miRNA 包括上调表达和抑制表达俩种。如miR-9、miR-10b、miR-21、miR-155、miR-210、miR-221、miR-711 在乳腺癌中为上调表达，而 miR-101、miR-122a、miR-125b、miR-136、miR-143、miR-145、miR-205、miR-214、miR-218、miR-340 和miR-489 在乳腺癌中为抑制表达,这些也许能成为乳腺癌的早期标志物[2]。并且大量研究发现miRNA 在乳腺癌的不同亚型上有差异表达。如Lowery AJ等人发现miR-342、miR-299-3p、miR-217、miR-190、miR-135b、miR-218 与雌激素受体有关，miR-520g、miR-377、miR-527-518a、miR-520f-520c 与孕激素受体有关，miR-520d、miR-181c、miR-302c、miR-376b、miR-30e-3p 与人表皮生长因子受体2 有关。这些miRNA 在乳腺癌的病理分型中发挥着重要作用[3]。另外研究发现，miRNA 稳定存在于体液中（如血液，尿液，唾液等）当疾病发生时这些稳定存在于体液中的miRNA 能够特异性表达，如 Mitchell[4]等为研究miRNA 可否作为稳定的血液标志物，利用qRT-PCR 技术定量检测血浆miR-15b、miR-16、miR-24 的表达水平，发现无论是使血浆在室温中孵育长达24 h 还是冷冻8 个周期后，三者的表达水平仅发生微小变化。Erbes T[5]发现乳腺癌患者中尿miR-155 水平显著高于健康人，而miR-21、miR-125b和miR-451 水平显著低于健康人这些稳定表达于体液中的miRNA 易获得无侵入性亦可作为早期筛查。

2 miRNA 用于预后的生物标志物

miR-21 是现已知道的一种致癌基因，能抑制多种抑癌蛋白加速癌症的生长。LI-XU YAN[6]等人用miRNA 探针芯片技术，研究了miRNA 在乳腺癌中的基因组表达谱，发现miR-21 在乳腺癌中的上调表达是正常癌旁组织的2 倍，又通过逆转录聚合酶链技术对miR-21 进行定量分析发现miR-21 的高表达与临床晚期、淋巴结转移、患者生存期缩短显著相关。所以miR-21 可作为乳腺癌预后的生物标志物。miR-155 是另一种已知的致癌基因，miR-155 的表达与晚期、淋巴结转移和预后不良以及三阴乳腺癌有关。W Kong[7]等人发现miR-155 的过度表达通过下调von Hippel-Lindau 抑癌基因的表达，通过细胞增殖、肿瘤坏死和炎症细胞的募集来诱导广泛的血管生成。因此，miR-155 是乳腺癌一个很好的预后标志物。

MiR-27a[8]是已知的致癌基因，在乳腺癌组织中表达也显著上调。Tang 等人证明miR-27a 通过表达低水平的ZBTB10来调控肿瘤的生长和转移。Tang 等人用原位杂交和免疫组化的技术检测了102 位乳腺癌病人组织中的miR-27a 和ZBTB10 的表达，用spearman 秩相关分析了俩者之间的相关性（rs=20.478P＜0.01)呈负相关。Tang 等人又用χ2检验分析miR-27a 和ZBTB10 的表达与临床病理特征的关系，分析发现miR-27a 和ZBTB10 的表达与肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移等临床病理参数有显著相关性（P＜0.05）因此miR-27a是乳腺癌患者总生存的预测因子。

3 miRNA 在乳腺癌不同亚型的差异表达

随着乳腺癌个体化治疗的要求不断提高，并伴随着分子生物学技术的发展，把传统的从形态学上乳腺癌的分类转向为以分子学为基础的新的分类基础。即通过三种免疫表型ER（雌激素受体)PR（孕激素受体）和HER-2（人表皮生长因子受体-2）将乳腺癌分为四种类型：luminal A 型（ER/PR阳性，HER-2 阴性）、luminal B（ER/PR 阳性，HER-2 阴性或者HER-2 阳性型）、HER-2 过表达性、三阴乳腺癌型。

Lowery AJ 和 Miller N[9]研究发现，miRNA 分析显示miR-342、miR-299-3p、miR-217、miR-190、miR-135b、miR-218 与雌激素相关；miR-520g、miR-377、miR-527-518a、miR-520f-520c 与孕酮相关；而miR-520d、miR-181c、miR-302c、miR376b 和miR-30e-3p 与HER2 相关。

3.1 miR-200

miR-200 是有两个簇的五个家族成员所组成，一个是个位于1 号染色体上的簇编码miR-200b/200a/429，另一个位于12 号染色体上的簇编码miR-200c/141.11MiR-200 家族成员,通过直接靶向锌指电子盒结合同源盒因子1[10]（ZEB1）和2（ZEB2）抑制上皮间质转化。miR-200 与乳腺癌的转移有关。Yamei Pang[11]等人致力于研究miR-200 抑制三阴乳腺癌的机制且miR-200 与MYC 原癌基因、DNA 甲基转移酶3A之间的相互作用。他们发现在侵袭能力最强的三阴乳腺癌中，MYC 原癌基因和DNA 甲基转移酶3A 能共同协同启动甲基化、miR-200 的抑制表达。

3.2 MiR-210

miRNA-210[12]位于第 11 号染色体上miRNA-210 , 是参与细胞增殖、线粒体呼吸作用、DNA 修复、血管生物学过程和血管再生的重要因子。miRNA-210 可以靶向调控 E2F3.由于 E2F3 基因有调节细胞周期 G1 到 S 期以及启动DNA复制的功能，故 miRNA-210 能通过对其调控来抑制多种癌症细胞系的细胞增殖.miRNA-210 过表达对于部分实体肿瘤患者的不良预后有提示作用.有研究认为 miRNA-210 是三阴性乳腺癌预后的独立预测因子，在三阴性乳腺癌患者中 miRNA-210 低表达的无病生存和总生存情况均优于高表达者。

4 乳腺癌的靶向治疗

随着信号通路、细胞凋亡等分子生物学方法在肿瘤研究中的深入, 乳腺癌分子靶点和靶向治疗逐渐成为抗乳腺癌研究的趋势和热点。

4.1 miR-221、miR-222

三苯氧胺是雌二醇在雌激素受体的竞争性部分激动剂抑制剂。这种药是非甾体类药物。三苯氧胺辅助内分泌治疗广泛应用于ER+的乳腺癌中。在HER2 过度表达的乳腺癌和三阴如乳腺癌的患者中产生了耐药性，因为缺乏ER 的表达，因此三苯氧胺的使用受到限制。JJ ZHAO[13]等研究人员发现在ER+的乳腺癌中，ER-BC 中miR-221 和miR-222的表达均被上调，表明其可能与乳腺癌中的三苯氧胺抗性有关。此外，ER-BC 患者往往具有较高的miR-221 水平，这表明miR-221 可能作为ER-乳腺癌和他莫昔芬耐药的生物标记物。

除miR-221/222 外，miR-342、miR519a、miR-10b、miR-27b、miR-214、miR-320a、miR-155 和miR1254 等miRNAs也与他莫昔芬抵抗有关。在这些miRNAs 中，miR-27b 和miR-320a 的表达下调，而miR-10b 和miR-155 在三苯氧胺耐药的乳腺癌细胞株中的表达上调[14-17]。miR-27b 表达下调是由于其启动子区甲基化所致。

曲妥珠单抗作为HER2 过度表达的BC 亚型患者的一线治疗是有效且耐受性良好的。然而，曲妥珠单抗的抗性是一个主要问题，miR-21/221 靶向PTEN 通路被发现与曲妥珠单抗的抗性有关。miR-21 水平的升高除了是一个不良的预后标志物外，还改变了HER2+乳腺癌对曲妥珠单抗的敏感性。miR-200c 是曲妥珠单抗耐药BC 细胞中最显著下调的miRNAs 之一。miR-200c 的修复通过靶向ZNF217 和ZEB1提高曲妥珠单抗的敏感性和抑制BC 细胞的侵袭，两者都在TGF-β 信号通路中起作用。除曲妥珠单抗外，miR-200c 还与BC 治疗中常用的阿霉素的耐药性有关。

另一项关于miR-125b 的研究发现，miR-125b 表达水平在阿霉素抵抗的MCF-7 细胞中显著升高，进一步研究发现miR-125b 可增强阿霉素的细胞毒性。因此，miR-125b 在乳腺癌细胞对化疗药物产生耐药过程中发挥重要作用。