窒息新生儿β-内啡肽和细胞因子的表达研究

吴宏伟，刘刚

（徐州医科大学附属徐州儿童医院，江苏 徐州 221006）

0 引言

新生儿窒息是儿科常见疾病，发病率达5-10%，也是导致新生儿伤残、死亡的主要原因[1]。研究发现[2]，窒息缺氧会抑制机体免疫系统，使新生儿的肾、脑、心肺、血液、免疫等方面受到损伤。β-内啡肽为内源性阿片肽，是机体合成的具阿片样作用肽类物质。β-内啡肽十分重要，是31个氨基酸组成，主要分布在中枢系统、外周系统中。β-内啡肽是分子量大前体蛋白前阿黑皮素分泌，浓度最高的处于垂体中间，表现出乙酰化形式。其组织特异性会引起肽类物质产生。有研究发现，研究β-内啡肽和许多危重疾病发病具有密切的关系。本文对窒息新生儿与健康儿分组均接受β-内啡肽和细胞因子的各项检测，分析新生儿窒息病理生理变化过程，以此为临床确诊和治疗提供参考，分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料。对2018年1月至2020年2月我院收治的新生儿窒息28例、外院健康新生儿30例一般资料进行分析，窒息组28例，平均胎龄（38.5±2.9）周；平均出生体重（3350±310）g；平均日龄（4.1±2.9）h；轻度窒息18例，重度窒息10例；健康组平均胎龄（38.6±2.8）周；平均出生体重（3280±340）g；平均日龄（4.4±2.8）h；两组新生儿胎龄、出生体重、日龄等基础资料，比较无明显差异（P＞0.05）。纳排标准：入选对象均足月，窒息组产前经胎心监护，发现有宫内窘迫，检测脐血pH≤7.2，出生5分钟Apgar评分≤7分。家长均知情研究并签署同意书。排除了产妇有产伤史，感染性疾病。排除了新生儿非窒息导致颅内出血和头颅血肿。

1.2 方法。两组新生儿均在出生24-48 h内采集血液标本，取静脉血3 mL，1.5 mL在低温下用EDTA-2Na、抑肽酶进行试管离心处理，将血浆分离保存，检测β-内啡肽水平。另外1.5 mL置于干燥管中，进行血清分离，进行细胞因子（血清白介素2、可溶性白介素2受体、白介素6、肿瘤坏死因子-α、干扰素γ）的检测。

1.3 观察指标。β-内啡肽（β-EP）根据放射免疫法进行检测；细胞因子：血清白介素2（IL-2）、可溶性白介素2受体（SIL-2R）、白介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）根据酶联免疫吸附法检测。检测试剂盒提供方是北京海科锐生物科技中心[3]。

1.4 统计学分析。使用SPSS 20.0统计学处理，t检验计量资料，以（均数±标准差）表示，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

表1 比较两组β-内啡肽、细胞因子水平（±s）

表1 比较两组β-内啡肽、细胞因子水平（±s）

组别 例数 IL-2（pg/mL） SIL-2R（U/mL） IL-6（pg/mL） TNF-α（pg/mL） IFN-γ（pg/mL） β-EP（pg/mL）窒息组 28 12.10±2.86 558.50±179.63 16.01±5.22 378.65±157.4 362.15±140.45 318.25±90.50健康组 30 29.25±6.12 213.51±79.62 31.68±7.42 186.20±83.11 176.25±42.85 122.46±24.38 t - 7.3501 7.3521 6.2578 7.6100 7.8517 8.5798 P - 0.0067 0.0066 0.0123 0.0058 0.0050 0.0033

窒息组新生儿的细胞因子水平发生紊乱，β-内啡肽水平高于健康组，各指标水平比较有显著差异（P＜0.05），见表1。

3 讨论

新生儿窒息会引起急性缺氧、二氧化碳蓄积，导致组织供氧障碍，影响脑组织缺氧耐受性。研究发现，窒息新生儿β-EP明显升高，而且此项指标会参与到新生儿脑损伤、脑水肿等病理生理过程。窒息新生儿的β-EP升高，还会加重窒息的程度。本文对窒息新生儿β-内啡肽和细胞因子的表达情况进行简单的阐述，讨论如下。

3.1 β-内啡肽的作用机理。β-内啡肽是神经肽的一种，可以对中枢神经系统起到抑制和调节的作用。研究新生儿缺氧、缺血性脑病发现，研究β-内啡肽和缺氧缺血相关脑损伤具有相关性。当患儿大脑缺氧缺血时，检测患儿的β-内啡肽明显升高。表明患儿缺氧缺血性脑病因应激状态影响，下丘脑会过度释放因子，垂体前叶有肾上腺皮质激素、β-内啡肽等释放，导致有些β-内啡肽会释放到血液中，有些成分会经下丘脑外侧进到脑脊液中，经第三脑室周β-内啡肽神经纤维，向脑脊液中分泌，可以检测出患儿的脑脊液中β-内啡肽明显升高。而且随着患儿病情的加重，β-内啡肽含量越高。当患儿处理恢复期时，β-内啡肽会明显降低。如果患儿俣并脑水肿，β-内啡肽数值明显升高。β-内啡肽作为抑制性调节剂，会使脑水肿、脑损伤等疾病加重。所以，可以将β-内啡肽浓度作为新生儿缺氧、缺血等脑病预后重要的衡量指标。

3.2 分析窒息新生儿的细胞因子情况。IL-2是T辅助细胞产生多肽，可以促进T细胞、淋巴因子的活化和杀伤能力，促进杀伤细胞增殖，提高机体的免疫力。由于窒息缺氧会引起T细胞亚群比例失调，降低T辅助细胞，从而降低IL-2表达。白介素2受体活化出的SIL-2R是位点特异性蛋白酶裂解的片段，可以反映细胞免疫水平和细胞功能[4]。作为重要免疫抑制因子，SIL-2R水平可以观察窒息新生儿，当水平升高时表明病情严重。而IL-6水平和新生儿的免疫功能有着密切的关系，作为多功能细胞因子，能促进淋巴细胞成熟和分化，提高NK细胞、细胞毒T细胞免疫活性，降低IL-6水平，影响新生儿免疫功能的调节作用，导致病情加剧。TNF-α对中性粒细胞起到激活作用，从而将病原微生物杀灭，对细胞产生的IL-6细胞因子进行刺激，进而活化T淋巴细胞。提高窒息患儿的TNF-α水平能改善新生儿免疫抑制状态，也能保护新生儿的免疫功能。如果TNF-α水平过高，就会引起全身性反应，影响机体正常功能。IFN-γ是白细胞产生的多肽，可以抗病毒、抗肿瘤，如果IFN-γ水平适量，能促进机体免疫和应答，若IFN-γ水平过度会导致免疫功能受到抑制。窒息新生儿因缺氧会出现应激反应，受到不良影响，影响IFN-γ水平，使β-EP出现生物效应[5]。β-EP是疼痛与应激间介质，也是神经内分泌和免疫调节重要的介质，对于机体具有免疫调节的作用。有研究发现，窒息与内源性阿片样物质活性具有相关性。

3.3 研究结果讨论。本次研究结果显示，窒息组新生儿的细胞因子水平发生紊乱，β-内啡肽水平高于健康组，各指标水平比较有显著差异（P＜0.05）。表明窒息刺激会使下丘脑垂体前叶中β-EP分泌，降低β-EP水平，增加外周血中β-EP的含量。窒息还会引起单个核细胞β-EP升高。促皮质激素释放能促进外周血中β-EP的分泌入血，导致β-EP升高。β-EP也能抑制淋巴细胞中IL-2、IL-2R的释放，对淋巴细胞转化起到抑制作用。表明β-EP升高会降低IL-2，两者间呈负相关。可见，窒息新生儿研究血浆中β-内啡肽浓度，可以作为淋巴细胞释放和淋巴细胞转化的观察标准，分析二者间相关性，表明掌握窒息新生儿的应激反应免疫指标，可以及时发现细胞因子水平变化，及时实施正确治疗措施，合理使用抗生素和免疫抑制药，减少应激反应对患儿造成的损害。

综上所述，通过以上研究可以发现，要重视窒息新生儿的相关免疫指标，通过对β-EP与细胞因子各项指标的检测，可以对医生临床诊断治疗提供数据参考，了解新生儿窒息程度和脑损伤情况。对于严重异常的细胞因子的表达，是否需要使用皮质类固醇激素等需要进一步进行相关研究。