非洲猪瘟研究进展摘译

非洲猪瘟病毒pE66L 蛋白可通过PKR/EIF2 途径抑制宿主翻译

非洲猪瘟病毒（ASFV）是对猪最具传染性和致命性的病毒之一，已在许多国家造成流行，近几年传播到中国，但目前尚未获得许可的疫苗或治疗方法。尽管科学家已进行了广泛研究，但ASFV编码的蛋白质如何抑制宿主翻译这一问题仍然未知。本文探讨了ASFV 干扰宿主翻译并优化自身基因表达的分子机制。

经研究，有14种ASFV蛋白对海肾荧光素酶（Rluc）活性的抑制作用超过5倍，其中抑制作用最强的是pE66L蛋白。结合生物信息学分析和生化试验结果，确定了pE66L的跨膜（TM）结构域（氨基酸13-34）在抑制宿主基因表达中的关键作用。另外，通过构建重组质粒，使TM结构域与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）相连，进一步证明该结构域可广泛抑制蛋白质合成；共聚焦试验和生化分析表明，TM结构域可帮助蛋白质定位到内质网（ER），之后激活PKR/eIF2α途径抑制宿主翻译。删除pE66L基因对病毒在巨噬细胞中复制几乎没有影响，但能显著恢复宿主基因的表达。

综上所述，ASFV 的pE66L 蛋白可通过激活PKR/eIF2 α通路诱导宿主翻译关闭。

某商品猪场非洲猪瘟暴发调查及传染源鉴定方法

非洲猪瘟（ASF）是一种由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起的家猪和野猪传染病。近年来，这种疾病在全球广泛蔓延，给猪肉生产造成了严重的经济损失。本研究描述了在中国一个大型商业养猪场发生的非洲猪瘟疫情。

疫情始于2018 年，在集约化养猪场中呈时空传播。靠近出口的猪舍感染风险更高（优势比=14.4，95% CI：1.5-140）。据推测，疫病的传入是由于运输车辆被ASFV污染（该车辆曾用于销售生产率较低的生猪）。本项调查显示了ASFV 感染和在假定有足够生物安全措施环境中的传播过程，将有助于大型养猪场控制ASF。

基于P30单克隆抗体的非洲猪瘟病毒胶体金试纸条的制备

由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起的非洲猪瘟（ASF）于1921 年在肯尼亚首次报道，但目前仍没有有效的疫苗或抗病毒药物。快速和有效的诊断是处理ASF 疫情的关键。本研究制备了两株针对ASFV磷蛋白P30的单克隆抗体（MAbs），分别命名为3H7A7和6H9A10。

表位分析显示MAb 3H7A7 和6H9A10 分别识别P30的aa 144-154和aa 12-18。基于这2株单克隆抗体，科研人员开发了用于快速检测ASFV 的胶体金试纸条。灵敏度和特异性分析表明，该条带的检出限为2.16 ng P30，且该试纸条仅与ASFV 反应，与其他常见猪病毒无交叉反应。通过检测153份临床现场样本（包括血清、血浆、组织和抗凝血处理过的血液），本试纸条与Real-time PCR 的一致性为95.42%。

冻干粉实时定量PCR检测中国家猪血液样本中非洲猪瘟病毒的新方法

非洲猪瘟（ASF）是一种严重的猪传染病，给中国造成了巨大的经济损失。因此，迫切需要开发一种快速、特异、灵敏的诊断方法检测非洲猪瘟病毒（ASFV）。本研究建立了一种新型的实时定量PCR 方法，该方法利用冻干粉末试剂（LPR），以主要结构蛋白P72为靶点，可用于ASFV的快速检测。

经试验，该方法对ASFV 质粒模板的灵敏度为100拷贝/ul，比OIE 推荐的qPCR 方法灵敏度高10 倍；特异性分析表明，针对ASFV 的qPCR-LPR 与其他重要的猪病原体没有交叉反应；在我国218 份家猪血液样本的临床诊断中，本试验建立的qPCR-LPR 方法和商用qPCR 试剂盒检测ASFV 的阳性率分别为80.73%（176/218）和76.61%（167/218），经SPSS 分析，两种方法的符合率为92.20%（201/218），kappa 值为0.768（p＜0.0001），两种检测方法的总体一致性为95.87%（209/218），进一步的Pearson 相关和线性回归分析显示两种方法之间有显著的相关性，R2值为0.9438。本研究建立的qPCR-LPR 方法，可在2 h 内完成从样本处理到结果报告的整个过程。

以上结果表明，qPCR-LPR检测是一种很好的实验室诊断工具，可以灵敏有效地检测ASFV。

2019-2020 年越南流行的非洲猪瘟病毒（ASFV）的分子特征

非洲猪瘟（ASF）是由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起的一种高度传染性动物疫病。为了确定在越南传播的ASFV菌株之间的遗传变异关系，对2019-2020 年从越南北部、中部和南部23个不同省份采集的家猪器官和血液样本中的26株ASFV分离株进行了遗传特征分析。

对部分B646L（p72）和EP402R（CD2v）基因序列以及全长E183L（p54）基因序列的分析表明，所有26 株ASFV分离株均属于基因型II和血清型VIII，这与Georgia/2007/1和中国所有测序菌株一致。I73R 和I329L 基因之间的TRS 包含10 个核苷酸的插入，这与2018 年从家猪分离的中国ASFV株CN201801一致，但在Georgia/2007/1和中国/吉林/2018株中未观察到。□