复方元胡止痛片的薄层色谱鉴别

刘斯亮，姜范成，康凯

（大连市检验检测认证技术服务中心，辽宁 大连）

0 引言

复方元胡止痛片收载于《卫生部药品标准》中成药制剂第七册，标准号为WS3-B1386-3。处方由延胡索，醋香附，川楝子，徐长卿等四味药材组成，具有疏气止痛作用，用于肝胃气痛，胃脘胀痛，胸肋痛，月经痛。原部颁标准只有三项化学鉴别，不能全面控制该药品的质量。为了提高该制剂的质量，拟采用薄层色谱对方中徐长卿，香附，延胡索进行鉴别，为修订提高制剂的质量标准提供科学依据。

1 实验材料

1.1 仪器

BS42000S 型电子天平（Sartorius）；双槽层析薄层缸；HH-4 型恒温水浴锅。

1.2 药材与试剂

徐长卿，香附，延胡索；乙醚，乙酸乙酯，甲苯，环己烷，三氯甲烷，甲醇，丙酮。

2 方法与结果

2.1 徐长卿的薄层鉴别[1-3]

取本品7 片，研细，将其放在有瓶塞的锥形瓶中，在里面加入20ml 乙醚，用瓶塞塞紧，振摇60min，滤过，待滤液挥干后将残渣加入1ml 的乙酸乙酯，将其进行溶解，所得溶液作为供试品溶液。另取徐长卿对照药材lg，同法制成对照药材溶液。另取丹皮酚对照品，加乙酸乙酯制成每lml 含1mg 的溶液，为对照品溶液。按处方中药味比例，配置不含徐长卿的阴性对照，再同法制成阴性溶液。照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液10μl 和对照品溶液5μ1，将吸取的溶液分别点放在硅胶G 薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯（10:2:0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，使用浓度为10% 的硫酸乙醇进行喷洒，并在105℃的温度下进行加热处理，加热直至斑点出现清晰的显色。供试品色谱中，与对照组药材及对照品的色谱相应的位置上有相同的斑点颜色，阴性溶液无干扰。

2.2 香附的薄层鉴别[4-6]

取a-香附酮对照品，加乙酸乙酯制成每lml 含lmg 的溶液，作为对照品溶液。按处方中药味比例，配置不含香附的阴性对照，再同法制成阴性溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取徐长卿项下的供试品溶液10μ1 和对照品溶液2μ1，分别点于同一硅胶GF254 薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯（9:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性溶液无干扰。

2.3 延胡索的薄层鉴别[7]

取本品7 片，研细，置具塞锥形瓶中，加入50ml 的甲醇之后进行超声处理，时间为30min，滤过，将滤液蒸干处理，在残渣中加入10ml 的水进行溶解，并使用浓氨试液对pH 值进行调试，使其在9-10 之间，之后用乙醚进行提取，共提取2 次，每次的提取量为30ml，将乙醚液进行收集，并挥干，残渣中加入1ml 的甲醇进行溶解，得到的溶液作为供试品溶液。取1g延胡索的对照药材，采用相同的方法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品，加入甲醇进行溶解，使得制成的溶液中1ml 含有0.5mg 的溶液，并将其作为对照品溶液。按处方中药味比例配置出不含延胡索的阴性对照组，采用相同的方法制成阴性溶液。照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取供试品溶液3μl、对照药材溶液3μl 和对照品溶液2μ1，在同一硅胶G 薄层板上分别点放，薄层板使用1%的氢氧化钠溶液制备，展开剂为甲苯-丙酮（9:2)，展开，取出，晾干，将其放置在碘缸中一段时间（5min）再取出，将吸附的碘挥干，置紫外灯365nm 下检视。供试品色谱中，与对照品及对照药材色谱位置上有相同的显色斑点，同时阴性溶液也显示有相应的干扰。

3 讨论

复方元胡止痛片国家共计6 家生产企业生产，处方由延胡索，醋香附，川楝子，徐长卿等四味药材组成。本实验在原有化学鉴别的基础上增加了香附、徐长卿、延胡索的薄层色谱鉴别，通过对2 批样品及阴性对照的检验，证实方法专属性较强、操作简单可靠，可作为对原有质量标准的补偿与完善。笔者对不同厂家（青岛海洋，上海谱科，上海盛亚）的薄层板进行了考察，结果表明同等条件下不同厂家薄层板对分离条件无影响。

复方元胡止痛片处方中延胡索、徐长卿药材为原粉药味入料，分别对两种药材进行显微鉴别研究[8]。《中国药典》2015 年版一部[9]中延胡索显微特征有糊化淀粉粒、下皮厚壁细胞、螺纹导管；徐长卿显微特征有外皮层细胞、草酸钙簇晶、分泌细胞、内皮层细胞。经过显微镜鉴别筛选后确定，延胡索的“下皮厚壁细胞绿黄色，细胞多角形、类方形或长方形，壁稍弯曲，木化，有的成连珠状增厚，纹孔细密”的特征性显微鉴别点，镜检率极低；徐长卿的簇晶的显微特征性鉴别点，镜检率高。故草酸钙簇晶鉴别可以作为复方元胡止痛片的显微鉴别项。

笔者对延胡索进行的薄层色谱探索性研究，对照品和对照药材的色谱位置上虽然有相应斑点，但阴性样品有干扰，分析是由于其他药味对延胡索有影响。因此本药中延胡索不适用于薄层色谱鉴别。考虑到准确性问题，对延胡索进行高效液相色谱分析，可更准确地测定其具体含量。