一例应用腺苷核苷类似物GS-441524对猫传染性腹膜炎进行抗病毒治疗分析

王丽新吴丰刘海超胡格陈大鹏

(1.北京农学院动物科技学院，北京 102200；2.北京天空之城宠物医院，北京 100071)

猫传染性腹膜炎(FIP)是一种致命疾病，发生于世界各地的家庭饲养及野生动物。FIP是由猫冠状病毒(FCoV)特异性位点突变而来的，猫冠状病毒(FCoV)发生在2个不同的病理类型，可以区分其生物学行为，但不是其形态。一些作者[1,3,4]对这2种病理类型使用不同的名称，尽管二者都属于同一病毒物种。猫肠冠状病毒(FECV)在多猫环境中非常普遍，并且具有高度的传染性——几乎100%的猫从脱落的猫的粪便中接触到FECV就会受到感染。然而感染大多是无症状的，或只引起轻度和短暂的腹泻[2]。相反，猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)不是通过粪便—口腔途径传染的，而是由一小部分感染猫的无毒性FECV突变而产生的，然后导致致命疾病猫传染性腹膜炎(FIP)[5-7]。临床症状有厌食症、嗜睡、体重减轻、发热等，眼部和神经体征，如步态异常或精神异常，都是非特异性[2,8,9]。目前尚不清楚哪些确切的基因携带导致FIPV发展的突变。由于使用新药物治疗猫的FIP有希望的结果已经发表，GS-441524是能够直接阻断病毒的复制，来达到治疗目的。目前这一类药物在市场上未商品化，须向国外进口，国内对于这个药物的研究暂时空白，据调查，在临床上此药物价格昂贵，难以大量应用在临床中，主人在没有宠物保险下很难付得起费用。对此，只向此药物的临床结果做研究，为以后研究GS-441524药物在临床试验中奠定基础，也希望能够使费用降低，普遍应用于临床，挽救猫传染性腹膜炎的疾病。

1 案例情况

乔巴，美国短毛猫，2个月，雄性，未绝育，主人从猫舍购买到家中饲养28d，家中无其它宠物，临床检查食欲不振、嗜睡、眼睛游离，被毛色泽光亮，脊柱明显，体温39.5℃，体重1.3kg，腹部触诊波动感明显，腹围增大，疑似猫传染性腹膜炎，进行实验室检查。

2 实验室检测结果与诊断

2.1 血常规及血液生化

血常规结果见表1；血液生化指标结果见表2。由表1可见，乔巴淋巴细胞数参考值范围，血红蛋白、平均血红蛋白浓度、红细胞、红细胞压积明显低于参考值，该结果有贫血的现象，可能跟最近食欲不佳、伴有病毒感染导致。由表2可见，总蛋白(TP)偏高，白球比A/G=0.5<0.8，这一指标有效判定患有FIP风险较高，进行了实验室RT-PCR检测。

表1 血常规检查报告

表2 血液生化检查报告

2.2 腹部B超超声波检查与腹水穿刺

腹部超声显示(见图1)，腹部回声增强，腹水大量，未见腹腔肠系淋巴结明显增大；膀胱内未见明显异常影像；左肾与右肾表面不光滑，皮质回声不均，髓质环征，肾周有不均质回声结构。均未见肾盂积液；肝脏回声均匀，胆囊内未见明显异常回声；脾脏回质均匀。

图1 腹部超声影像

腹水穿刺出来的液体呈黄绿色粘稠状(见图2)，进行细胞学检查，呈大量单核巨噬细胞，无其它细胞，李凡他试验结果呈阳性(见图3)。

图2 腹水 图3 李凡他试验

2.3 RT-PCR检测

RT-PCR检测(见图4、图5)出含有猫冠状病毒，经过序列对比，未发现明显存在的特异性位点突变，患有猫传染性腹膜炎(FIP)风险一般。

图4 猫冠状病毒

图5 猫传染性腹膜

综合以上结果诊断，A/G比小于0.8，对诊断猫传染性腹膜炎有很大指导作用，B超检测含有腹水，淋巴结肿大，RT-PCR检测出猫冠状病毒。

3 治疗方案

3.1 用药疗程

由于乔巴生化检测总蛋白低且患有贫血症状，先进行输液疗法，主人每天带过来输液，在进行输液4d后，乔巴精神好转，食欲增强，4d后结束输液，并在此期间使用核苷类似物GS-441制剂，按4mg·kg-1给药，每天持续给药，连续12周，前4周每周检查1次，后续症状减缓改为每月检查1次，观察用药疗效。(无明显异常)在给药期间患猫(除了前4d静脉滴注)均在家中注射药物。

3.2 用药疗效对比

3.2.1 患猫体重变化

从连续给药之后，前4周每周称重1次，后续症状减缓改为每月称重，表3为采集的体重变化，由于为幼猫，时间长些才能够看出来体重的增加，从就诊的1.3kg增至2.8kg，并且腹部明显缩小，有紧实感。

表3 患猫用药后每周、月平均体重的变化

3.2.2 患猫每次复查血液的血常规及生化指标

连续给药之后，每次血液血常规复查的结果，由表4可见，白细胞总数在逐渐下降恢复至正常范围内，中性粒细胞数也有所下降，到第3周后明显趋于正常水平，平均血红蛋白浓度持续增高，红细胞在用药之后恢复到正常水平。血液中的细胞数在连续给药12周趋于正常范围。

表4 患猫用药后每周、月血常规检查报告

续表 患猫用药后每周、月血常规检查报告

连续给药后，每次复查血液生化的结果，由表5可见，主要可见白球比逐渐从0.5上升至正常水平，其它指标均在正常范围。

表5 患猫用药后每周、月血液生化检查报告

3.2.3 患猫每次复查B超检查结果

从表6结果可见，患猫腹水逐渐减少，腹膜回声逐渐恢复正常，淋巴结肿大恢复正常。

表6 患猫每月B超检查结果

4 讨论

猫患有传染性腹膜炎时，常有2种类型，干性和湿性，患有干性传染性腹膜炎的猫在诊断上较湿性困难，实验室检测只能采取患猫的粪便进行PCR检测，但这样的检测结果准确率只有5%可能性，确诊干性FIP的猫，临床特征表现为前期暴瘦，食欲并不减退，嗜睡，但体重仍然没有增加，腹腔没有积液，血液检查会出现高球蛋白症，淋巴数和粒细胞数减少，可能存在氮质血症(在没有积液的猫中更常见)或肝脏酶活性增加[10]。患有湿性FIP的猫，主要特征腹围增大，食欲不振，嗜睡，血液常伴有贫血，白球比<0.8，低白蛋白血症(在有积液的猫中更常见)、高胆红素血症(在有积液的猫中更常见)，以及根据器官受累情况，RT-PCR显示阳性，李凡他实验显示阳性[11]。在本次病例中，患猫没有表现出高胆红素症，肝脏指标正常，其它指标均表现出患有湿性腹膜炎的风险，确诊为猫传染性腹膜炎。

在之前很长一段时间对于这种疾病并无任何药物可以缓解并救治，文献中通常为如何确诊、如何检查，对于治疗无任何效果，近2a出现2种药物，3C类蛋白酶抑制剂GC376和核苷类似物GS-441524在治疗猫传染性腹膜炎中有显著疗效[12-14]。国外学者研究利用GS-441524药物治疗猫传染性腹膜炎的显示有神经症状的疗效[15]，对4例神经FIP的研究采用5mg·kg-1的剂量治疗，治疗时间和随后的剂量根据临床反应增加。剂量为5mg·kg-1，SC，1次/d，持续12～14周，足以治疗2例受影响较轻的神经FIP病例。但在临床受影响最严重的猫中，以5mg·kg-1剂量重复疗程只会改善临床症状，一旦停止治疗，临床症状就会迅速消退。这种治疗失败促使病例4的剂量从5mg·kg-1逐步上升到10mg·kg-1。体外50%有效浓度(EC50)的GS-441524，以防止病毒细胞病变的作用，在0.8μM，完全抑制病毒复制在10μM和部分抑制在1μM[15]。可见GS-441524这种药物临床上还是可以应用，这将在治疗FIP中迈出重大一步。

本病例在这12周里，只有在前4d进行营养液补充输液，除维持肝脏指标的口服药物之外未使用其它任何生物制剂，只注射了GS-441524，在第2周就明显控制住贫血，腹水减少，各项指标趋于正常，平日饮食也是高蛋白食物，此次效果明显可见，但用药时长以及停药之后如何护理避免复发还有待进一步研究。