常用免疫学检验技术的基本原理

检验医学是一门临床学科，其主要运用不断发展的自然科学及医学科学技术对患者尿液、血液以及各种体液标本进行检验，从而了解患者疾病类型、病情发展情况，为疾病的临床诊断及后续治疗方案提供了参考依据，免疫检验技术的用途十分广泛，能够用于不同种类疾病发病机制的研究和临床疗效的判定。本文主要针对临床常用的几种免疫检验技术及其基本原理进行分析与阐述。

1 免疫荧光技术

免疫荧光技术也称作荧光抗体技术，其为标记免疫技术中最早开始发展的技术之一，该项技术建立在生物化学、免疫学以及显微镜技术的基础之上，此项技术最早在1941 年试验成功，历经几十余载的发展，这项技术已经非常成熟。此项技术的基本原理即为抗原-抗体反应。抗原抗体反应具备相当高的特异性，如果抗原抗体发生反应，则只需知晓其中一个因素，便能检查出另外一个因素，免疫荧光技术利用荧光技术对抗原或抗体进行标记，待其与相应的抗体或抗原进行结合以后，即可在荧光显微镜下观察到一种特异性的荧光反应。此种方法常被应用于病毒、细菌等微生物的快速检查中，此外，皮肤活检、肾炎活检的免疫病理检查也通常采取该技术。该技术具有操作方法简单、特异性高以及非特异性荧光染色少等优势，但也存在一定缺点，主要体现在敏感性偏低上，每检查一种抗原，都需重新制备一种荧光抗体。

2 放射免疫检测

放射免疫检测法是建立于放射性核素同免疫反应相结合的原理之上的一种检测方式，又称作竞争性饱和分析法。其基本原理是利用放射性同位素标记的抗原及没有标记的抗原（即待测标本）同不足量的特异性抗体发生竞争性结合，待其反应后将其分离并对放射性进行测量，从而获得没有标记的抗原的量。该项技术一般被应用于分泌学，可测定生长激素、胰岛素、血管紧张素、催乳素、促卵泡成熟技术等，可用于研究、鉴别及诊断激素的药理及生理作用。该项技术的主要优点是操作简单、灵敏性和特异性均高、样本用量少等，缺点主要有假阳性反应及较差反应等。

3 免疫胶体金技术

胶体金技术于1971 年被正式引进免疫化学，经过多年发展，免疫胶体金技术已经被广泛应用于生物医学的各个领域。胶体金在弱碱环境下带有负电荷，能够同蛋白质分子的正电荷进行结合，且不影响蛋白质的生物特性，这种方法主要原理是将抗原或抗体上标记胶体金颗粒，再利用抗体和抗原之间的特异反应，使得被标记的抗体或抗原吸附于渗滤膜之上。其利用了金颗粒的高电子密度特性，当胶体金和蛋白质分子结合时，能够在显微镜下呈现出黑褐色颗粒。该法具有操作简单、快速、准确率高、成本低、无污染的优点。

4 酶联免疫吸附试验

酶联免疫吸附试验是目前酶免疫测定技术中应用最为广泛的技术，其基本原理是使已知的抗原或抗原被吸附在固相的载体表面，让被酶标记的抗原抗体在固相表面产生特异性结合，加入底物溶液，其在酶的生活活性作用下可发生颜色反应。该方法对抗体免疫学特性不会产生任何改变，同样也不对酶的生物学活性产生影响。该技术主要应用于细菌及病毒等相关疾病的诊断中，具有快速、准确性高的优点，大幅缩短了临床诊断时间，提升工作效率。