新生儿坏死性小肠结肠炎患者血清IL-12及IL-17水平检测及临床意义

陈小冰，张雪梅，陈求凝，谢邦贵，卢玉朱（三亚中心医院新生儿科，海南三亚 572000）

坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis,NEC）是一种常见于新生儿的急性肠道炎症性疾病，其病情进展迅速，预后较差，治疗时间长，严重时可出现感染性休克、多系统器官功能衰竭，病死率高达20%～30%[1]。早期发现新生儿NEC，并进行及时、有效的临床治疗，对改善NEC 患儿的预后具有重要意义。目前，新生儿NEC 的病因及具体发病机制尚未完全明确，且新生儿NEC 的早期症状多不典型，容易漏诊或误诊。因此，探寻新生儿NEC 诊断及病情评估的生物学指标是研究热点。近期的研究表明，促炎因子白细胞介素-12（interleukin-12, IL-12）及白细胞介素-17（interleukin-17，IL-17）通过促进各种炎症因子的转录，启动炎症级联反应，参与NEC 发病过程[2-3]。本研究通过观察NEC 患儿血清IL-12 及IL-17 水平变化，分析其对新生儿NEC 诊断及病情评估的价值，为新生儿NEC 的诊疗提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2015年1月～2018年12月三亚中心医院收治的足月新生儿 NEC 80 例作为病例组，其中男性52 例，女性28 例，胎龄37 ～40周，平均胎龄37.80±1.40 周。纳入标准：①NEC的诊断符合《实用新生儿学》（4 版）标准[4]，且为足月新生儿；②存在肠道症状和体征，全身症状和体征，腹部 X 线平片显示肠充气或功能性梗阻，肠胀气肠壁囊样积气体。排除标准：①非足月新生儿，低或极低出生体重儿；②并发其他消化系统疾病及感染性疾病者。另选取同期非消化系统疾病、非感染性疾病的健康足月新生儿65例作为对照组，其中男性44 例，女性21 例，胎龄37 ～41 周，平均胎龄38.30±1.60 周。两组年龄、性别及胎龄等基本资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法 根据修正Bell 分期[4]，将80 例NEC患儿分为Ⅰ期31 例：主要表现为全身非特异性症状及胃肠道表现，腹部X 线检查表现为肠间隙增宽，肠壁增厚，无肠壁积气；Ⅱ期37 例：除Ⅰ期症状外还可表现为肠鸣音消失及腹痛加重，X 线可出现肠扩张，肠梗阻，肠壁积气征或伴门静脉积气；Ⅲ期12 例：全身进行性恶化（如心动过缓，严重呼吸暂停，酸中毒，弥散性血管内凝血等），多有腹膜炎体征，X线常提示肠穿孔。对照组于出生3天后，病例组于治疗前采集空腹静脉血3 ml 置于未加抗凝剂的离心管中,置37℃水浴箱30min 后，以离心半径13.5cm，3 500r/min 离心10min，分离血清保存于-80℃低温，待检。IL-12 及IL-17 采用酶联免疫吸附法检测，试剂盒由上海科新生物技术股份有限公司提供。

1.3 统计学分析 采用SPSS 20.0 统计软件分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，方差分析多组间均数，采用成组t 检验进行两组间比较；计数资料的比较采用χ2检验。血清IL-12 及IL-17水平对新生儿NEC 的诊断价值应用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线进行分析，曲线下面积（area under cure，AUC）比较采用Z 检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病例组和对照组血清IL-12，IL-17，白细胞计数及血小板比较 见表1。病例组血清IL-12 及IL-17 水平明显高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。两组白细胞及血小板计数比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

表1 病例组和对照组血清IL-12，IL-17，白细胞及血小板计数比较（±s）

表1 病例组和对照组血清IL-12，IL-17，白细胞及血小板计数比较（±s）

项目 对照组(n=65) 病例组(n=80) t P IL-12（ng/L） 20.62±5.83 63.80±10.27 12.640 ＜0.001 IL-17（ng/L） 6.35±2.28 22.73±6.50 9.752 ＜0.001白细胞（×109/L） 8.62±2.35 9.30±3.46 0.713 0.548血小板（×109/L） 263.40±58.20 258.60±56.30 0.492 0.637

2.2 各期NEC 患儿血清IL-12 及IL-17 水平比较见表2。Ⅲ期血清IL-12 及IL-17 水平均明显高于Ⅰ期和Ⅱ期，差异均有统计学意义（P＜0.05）；且Ⅱ期血清IL-12 及IL-17 水平均明显高于Ⅰ期，差异均有统计学意义（P＜0.05）。

表2 各期NEC 患儿血清IL-12 及IL-17 水平比较（±s）

表2 各期NEC 患儿血清IL-12 及IL-17 水平比较（±s）

项目 Ⅰ期(n=31) Ⅱ期(n=37) Ⅲ期(n=12) F P IL-12（ng/L） 51.72±7.40 62.40±9.52 79.30±14.80 10.205 ＜0.001 IL-17（ng/L） 14.20±4.38 20.85±6.17 34.60±9.72 7.228 ＜0.001

2.3 血清IL-12 及IL-17 水平对新生儿NEC 的诊断价值 见表3。血清IL-12 及IL-17 水平诊断新生儿NEC 的最佳截值分别为48.75ng/L，15.60 ng/L，两项联合诊断新生儿NEC 的曲线下面积（0.902，95%CI：0.845～0.963）明显高于单项IL-12（0.826，95%CI：0.768～0.887） 及IL-17（0.797，95%CI：0.742～0.854），差异均有统计学意义（Z=4.658，5.116，P＜0.05），其敏感度和特异度为90.3%和83.5%。

表3 血清IL-12 及IL-17 水平对新生儿NEC 的诊断价值

3 讨论

新生儿NEC 是临床上常见的一类重症消化系统疾病，其病情进展快，早期表现不典型，轻症与重症临床表现差别较大，部分与早产儿并发症难以鉴别，临床上仍以预防、早期治疗为主[5-6]。目前，临床上缺乏对NEC 早期诊断的可靠实验室指标，故其早期诊断率较低，往往延误了患儿救治的最佳时机。因此，寻找一种能早期诊断NEC 的敏感度及特异度高的实验室指标对本病的诊治具有重要意义。IL-12 是重要的促炎介质，能激发炎症的级联反应，介导机体的免疫功能，与小儿肠道炎症性疾病的发生发展相关[7]。IL-17 是一种前炎症细胞因子，通过诱导多种细胞释放促炎因子参与NEC 的发病[8]。

本研究显示，病例组血清IL-12 及IL-17 水平明显高于对照组，提示血清IL-12 及IL-17 水平在NEC 患儿中呈高表达，可能参与NEC 的发生发展。目前临床常以修正Bell 分期诊断标准对NEC 进行分期，其中Ⅰ期为轻症NEC，病情较少进展；Ⅱ期为NEC 确诊期；Ⅲ期为重症NEC，病情进展迅速、危重，死亡率极高。NEC 的预后与分期密切相关，若能在I期识别，及时给予禁食、抗生素治疗等处理，则有阻断病情进展的可能。反之，病情快速进展，肠道炎症加重，进入Ⅲ期出现穿孔、腹膜炎表现，此时保守治疗则无效，只能外科手术处理。本研究显示，Ⅲ期血清IL-12 及IL-17 水平均明显高于Ⅰ期和Ⅱ期，且Ⅱ期血清IL-12 及IL-17 水平均明显高于Ⅰ期，提示血清IL-12 及IL-17 水平与NEC 患儿的病情严重程度有关，其水平越高，NEC 患儿病情进展越快，发生死亡的风险越大。李晓霞等[9]研究发现，NEC 患儿血清IL-12 呈高表达，对NEC的病情进展可能有促进作用，在NEC 诊断中有一定价值。邱玉芬等[10]研究表明，血清IL-17 水平在NEC 患儿中显著升高，与重症NEC 患儿预后显著相关，可能是NEC诊断或预后判断的一个预测因素。本研究进一步应用ROC 曲线分析显示，血清IL-12及IL-17 水平诊断新生儿NEC 的最佳截值分别为48.75ng/L，15.60 ng/L，两项联合诊断新生儿NEC的曲线下面积（0.902，95%CI：0.845 ～0.963）最大，其敏感度和特异度较高。胡利霞等[11]研究表明，抗炎或促炎细胞因子水平与NEC 的临床分期及肠道菌群丰富度密切相关，可作为NEC 病情诊断的辅助指标。亦有研究认为，促炎细胞因子IL-12 在新生儿NEC 发病过程中起着重要作用，利用促炎细胞因子的拮抗剂，可为新生儿NEC 的防治提供新的方向[12]。

综上所述，血清IL-12 及IL-17 水平在NEC 患儿中明显升高，与患儿病情严重程度相关，有望作为新生儿NEC 早期诊断的实验室指标，两项联合检测对新生儿NEC 诊断具有一定的价值。