核苷(酸)类似物治疗下产生的HBV病毒颗粒不具有感染性

【据《Hepatology》2020年2月报道】题：核苷(酸)类似物治疗下产生的HBV病毒颗粒不具有感染性(作者Liu Y等)

核苷(酸)类似物(NAs)被广泛用于慢性乙型肝炎(CHB)的临床治疗。NAs通过与dNTP竞争结合，一旦掺入将抑制HBV P蛋白的逆转录酶和DNA聚合酶活性，不可逆地终止子代病毒HBV DNA新链的延伸、合成，产生基因组截短的HBV子代病毒。NAs治疗下产生的子代病毒是否可以在肝细胞中建立感染，目前尚未见报道。

本研究采用实时荧光定量PCR、Northern Blot、Southern Blot、蔗糖梯度离心、体外细胞感染和体外内源性DNA聚合酶链延伸等实验方法，探讨了NAs治疗下产生的子代HBV DNA的性质以及子代病毒的感染性。结果表明，在NAs处理下HepAD38细胞上清中的病毒颗粒或裸核衣壳中的HBV DNA主要为不可逆终止的3’末端截短的单负链DNA，且体外聚合酶链延伸实验也证实了新链合成被不可逆终止。与之一致，子代HBV病毒颗粒几乎不感染HepG2-NTCP细胞或人原代肝细胞(PHH)。同样，从接受NAs治疗的CHB患者血清制备的HBV颗粒对PHH也无感染性。同时，接受NAs治疗的患者血清中HBV DNA水平按逆转录的起点开始从X、S、PreC/C到rcDNA逐渐降低。而血清中的HBV RNA水平则呈现出相反的趋势，从X、S到PreC/C区域逐渐增加。这种趋势也在接受替比夫定治疗随访队列中得到了验证。

上述结果表明，由于DNA新链合成的不可逆终止造成了病毒基因组截短，NAs治疗下产生的子代HBV颗粒主要是失去了感染性的复制缺陷型。此外，本研究还提示，由于不同厂家HBV DNA定量试剂所检测的HBV基因组区域不同，临床上，在NAs治疗下的CHB患者的病毒载量检测可能存在差异。而此时所谓的“病毒载量”是否真能够反映感染性HBV病毒颗粒的真实水平，将是一个非常值得探讨的问题。

摘译自：LIU Y, LIU H, HU Z, et al. Hepatitis B virus virions produced under nucleos(t)ide analogue treatment are mainly not infectious because of irreversible DNA chain termination[J]. Hepatology, 2020, 71(2): 463-476.