310 例孕妇IgG 型抗体效价调查及与新生儿溶血病的相关性

林金美，肖文海，叶祖兴，毛建玉，廖丽娟

福建医科大学附属三明第一医院 （福建三明 365000）

新生儿溶血病（hemolytic disease of newborn，HDN）属于临床上较为常见的一种免疫性溶血性疾病，主要发生于胎儿及新生儿，母婴血型不合是该病的重要病因，且多见于ABO 血型系统[1]。有研究结果显示，当母婴血型存在差异时，母亲体内免疫系统的被动激活可导致胎儿红细胞抗原的特异性抗体的产生，而该特异性抗体主要由IgG 型抗体组成[2]。IgG 型抗体是目前已知唯一可通过胎盘的免疫球蛋白，继而可能进入胎儿的血液循环中，和红细胞发生免疫性溶血反应，引起胎儿早产、新生儿贫血、肝脾肿大等，甚至引发婴儿死亡[3]。产前检查是目前临床上用以预防及早期诊断HDN 的有效途径，有利于临床制定针对性干预措施，继而达到改善婴儿预后的目的。临床上往往通过微柱凝胶法检测孕妇体内的IgG 型抗体效价，从而预测ABO 系HDN[4]。该检测方式具有操作简便、快速、标本用量较少、灵敏度较高及特异性较强等优势，且结果可进行较长时间的保存，目前已被广泛应用于临床孕妇早期抗体的检测中[5]。本研究调查2016年2月至2018年12月我院收治的310例夫妻血型不合的O 型血孕妇的IgG 型抗体效价，分析其与HDN 的相关性，旨在为临床HDN 的防治提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年2月至2018年12月我院收治的夫妻血型不合的O型血孕妇310例作为研究对象，年龄21～45岁，平均（28.45±5.23）岁；受教育程度，初中及以下112例，高中及以上198例；孕周26～40周，平均（35.62±4.22）周；家庭月收入，低于5 000元/月166例，5 000～10 000元/月93例，>10 000元/月51例。本研究经医院医学伦理委员会批准，孕妇及其家属均自愿签署知情同意书。

纳入标准：（1）均为单胎妊娠；（2）年龄21～45岁；（3）既往无输血史；（4）临床病历资料完整。排除标准：（1）合并肝、肾、肺等重要脏器及血液系统疾病的孕妇；（2）伴有严重感染性疾病、免疫系统疾病及恶性肿瘤的孕妇；（3）存在交流沟通障碍或伴有精神疾病的孕妇；（4）正参与其他研究的孕妇。

1.2 试剂与方法

1.2.1 试剂

微柱凝胶抗人球蛋白试剂卡购自吉林省长春博迅生物技术有限公司，产品批号为20161205、20171204等。ABO 标准红细胞由我院自制获取，主要由5人份以上正常人混合红细胞制作而成，浓度为0.8%。2-Me 试剂购自长春博迅生物技术有限公司，产品批号为20170401、20170901等。

1.2.2 检测方法

通过微柱凝胶法检测孕妇的IgG 型抗体效价：将样本血清采用2-Me 进行处理，测定IgG 抗体的特异性，并将存在特异性的IgG 抗体标本血清进行倍比稀释处理，分别取50 μl 上述标本置入编码的微柱凝胶抗人球蛋白试剂的柱管内，同时加入相对应的我院自制标准红细胞50 μl，于37 ℃条件下孵育15 min、离心处理，最后判定结果。

采用HDN 血型血清学3项试验诊断HDN：母婴血型存在差异，新生儿红细胞直抗试验、红细胞抗体释放试验及血清抗体游离试验结果均显示为阳性，即可诊断为HDN；红细胞直抗试验及红细胞抗体释放试验中至少有1项结果显示为阳性，并与临床胆红素水平结合，也可诊断HDN[6]。

1.3 临床评价

分析夫妻血型与孕妇IgG 型抗体效价的关系，以及孕妇的IgG 型抗体效价与HDN 的相关性。

1.4 统计学处理

采用SPSS 20.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，等级资料采用秩和检验，多组间比较采用单因素方差分析， P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 夫妻血型与孕妇IgG 型抗体效价的关系

夫妻血型为A-O、B-O、AB-O 的孕妇的IgG 型抗体效价<64、64～127、128～255、256～511、≥512例数占比比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

表1 夫妻血型与孕妇IgG 型抗体效价的关系分析（例）

2.2 IgG 型抗体效价与HDN 的相关性

孕妇IgG 型抗体效价<64的新生儿均未发生HDN；A-O、B-O、AB-O 组HDN 发生率随着孕妇IgG 型抗体效价水平的增高呈逐渐升高趋势，各组间比较差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

表2 IgG 型抗体效价与HDN 的相关性（%）

3 讨论

HDN 主要是指发生于胎儿和新生儿早期，因母婴血型差异导致的同族免疫性溶血[7-8]，临床上主要包括ABO 血型系统及Rh 血型系统的溶血，以ABO 血型系统的溶血最为常见[9-11]。近年来，随着相关研究的不断深入，越来越多的学者提出HDN的发病机制为胎儿遗传获取A、B血型抗原，妊娠或分娩过程中上述抗原进入母亲血液循环，从而刺激其产生对胎儿红细胞抗原的特异性抗体，待抗体进入胎儿的血液循环后，可通过和胎儿红细胞表面的A 或B 抗原特异性结合，导致胎儿的免疫系统被激活，从而引起胎儿或新生儿红细胞的破坏溶解，可能引起不同程度的黄疸、水肿及贫血，病情严重时甚至可导致胎儿或新生儿死亡[12-14]。

本研究结果显示，夫妻血型为A-O、B-O、AB-O 的孕妇的IgG 型抗体效价<64、64～127、128～255、256～511、≥512例数占比比较，差异无统计学意义（P>0.05）。李锦荣等[15]通过研究孕妇IgG 型抗体效价与HDN 的相关性发现，318例ABO 血型不合夫妇中，A-O、B-O、AB-O 分别占比49.7%、42.7%、7.5%；孕妇IgG 型抗体效价≥128的占比为48.1%，其中A-O、B-O、AB-O 组分别占比48.7%、48.5%、41.6%，差异无统计学意义（P>0.05）。本研究结果与其相似，表明不同血型组合中均可能发生HDN。分析原因为，血型不合的母婴中，胎儿红细胞通过胎盘进入母体血液循环中，多种组织细胞和体液中均存在A、B 血型物质，非特异性刺激与多次妊娠等均可能引起IgG 型抗体的形成。有研究结果显示，孕妇IgG 型抗体效价的高低和胎儿受害程度密切相关，通过检测孕妇血清中的IgG 型抗体水平，诊断及预防HDN，具有灵敏度、准确度较高的优势[16-18]。本研究结果显示，孕妇IgG 型抗体效价<64的新生儿均未发生HDN；A-O、B-O、AB-O 组HDN 发生率随着孕妇IgG型抗体效价水平的增高呈逐渐升高趋势，各组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。这提示，孕妇IgG 型抗体效价与HDN 发生率成正相关，即随着孕妇IgG 型抗体效价水平的不断增高，HDN 发生率升高。其原因可能为，IgG 型抗体效价越高，通过胎盘的概率越大，继而增加了HDN 的发生风险。有研究证实，孕妇IgG 型抗体效价的高低和胎儿受害程度密切相关，特别是当IgG 型抗体效价≥64时，胎儿红细胞受到源自母体抗体破坏的风险更大，从而使得新生儿出现ABO-HDN 的概率更高[19-20]。另外，当孕妇IgG 型抗体效价≥64时，有新生儿未发生HDN，其原因可能与胎儿A、B 抗原强弱、血型物质的含量不同及胎盘屏障作用有关。因此，在临床实际工作中，无法单独依据孕妇IgG 型抗体效价≥64即确定胎儿必然会发生HDN，针对该类孕妇需定期监测其体内的IgG 型抗体效价，予以相应的治疗措施，进一步降低HDN 的发生率。

综上所述，孕妇IgG 型抗体效价与HDN 发生率成正相关，即随着孕妇IgG 型抗体效价水平的逐渐增高，HDN 发生率升高。因此，夫妻ABO 血型不合的O 型血孕妇产前检测IgG 型抗体效价，对预测HDN 的发生具有重要的意义。