XpertMTB/RIF 联合T-SPOT-TB检测对菌阴肺结核的诊断价值

李娜 阎少波

[摘要] 目的 探讨XpertMTB/RIF联合T-SPOT-TB检测技术对菌阴肺结核的诊断价值。方法 方便选取2017年5月—2019年2月间该院收治的怀疑为肺结核、痰涂片阴性的对象276例作为研究对象，均进行Xpert MTB/RIF联合T细胞斑点试验。结果 最终确诊菌阴肺结核204例、非结核72例。血清T‐SPOT-TB灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率分别为70.59%、83.33%、92.31%、50.00%、73.91%，Xpert MTB/RIF则为40.68%、100.00%、100.00%、37.30%、56.16%，联合则为80.39%、83.33%、93.18%、60.00%、81.16%。联合诊断灵敏度与阴性预测值、符合率显著高于Xpert MTB/RIF（P<0.05），Xpert MTB/RIF特异度显著高于血清T‐SPOT-TB（P<0.05），血清T‐SPOT-TB阴性预测值低于联合，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 XpertMTB/RIF联合T-SPOT-TB检测技术是一种简便、快速、准确的方法，且能够提高菌阴（即痰涂陰培阴）肺结核患者发现率及早期诊断率。

[关键词] 涂阴;肺结核;XpertMTB/RIF;T-SPOT-TB;诊断;灵敏度

[中图分类号] R4          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-0742（2020）06（c）-0062-03

The Diagnostic Value of XpertMTB / RIF Combined with T-SPOT-TB Detection for Bacterial Negative Tuberculosis

LI Na， YAN Shao-bo

First Pulmonary Ward， Yantai Pulmonary Hospital， Yantai， Shandong Province， 264001 China

[Abstract] Objective To explore the diagnostic value of XpertMTB / RIF combined with T-SPOT-TB detection technology for bacterial negative tuberculosis. Methods From May 2017 to February 2019， 276 patients with suspected pulmonary tuberculosis and negative sputum smears who were admitted to the hospital were conveniently selected as the research subjects. All were performed with Xpert MTB / RIF combined T cell spot test. Results 204 cases of bacillary tuberculosis and 72 cases of non-tuberculosis were finally diagnosed. Serum T-SPOT-TB sensitivity， specificity， positive predictive value， negative predictive value， coincidence rate were 70.59%， 83.33%， 92.31%， 50.00%， 73.91%， Xpert MTB / RIF was 40.68%， 100.00%， 100.00%， 37.30%， 56.16%， the joint is 80.39%， 83.33%， 93.18%， 60.00%， 81.16%. The combined diagnostic sensitivity， negative predictive value， and coincidence rate were significantly higher than Xpert MTB/RIF（P<0.05）， and the specificity of Xpert MTB / RIF was significantly higher than serum T-SPOT-TB （P<0.05）， The negative predictive value of serum T-SPOT-TB was lower than the combination （P<0.05）， the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion XpertMTB / RIF combined with T-SPOT-TB detection technology is a simple， fast， and accurate method， and can improve the detection rate and early diagnosis rate of patients with tuberculosis of yin （ie， phlegm smearing yin and peiyin）， which is worthy of clinical promotion.

[Key words] Smear negative; Tuberculosis; XpertMTB / RIF; T-SPOT-TB; Diagnosis; Sensitivity

目前我国仍是结核病高负担国家，2010年全国结核病第5次流调显示菌阳肺结核患者在逐渐下降，无症状菌阴结核比例在升高，菌阴肺结核约占所有肺结核的60%左右[1]。早期发现痰涂片阴性肺结核及耐多药结核病，并尽快开展肺结核规范化疗，对结核患者尤其菌阴肺结核患者的早诊断、早治疗对有效地控制结核病传播有重要的公共卫生和社会意义。尽管新的诊断方法不断涌现，但能提供快速、准确的诊断技术却是很少。XpertMTB/RIF技术是由美国的Cepheid公司研发的一项基于MTB核酸扩增为基础的全自动分子诊断方法[2]。目前痰Xpert MTB/RIF及血T-SPOT-TB的联合应用尚不广泛，Xpert MTB/RIF联合T-SPOT-TB快速诊菌阴肺结核（涂阴培阴）目前更是少有报道。该课题方便选取2017年5月—2019年2月该院收治的怀疑为肺结核、痰涂片阴性的276例患者作为研究对象，将Xpert MTB/RIF及T-SPOT-TB联合检查，与传统的结核菌培养相比，评价其对菌阴肺结核的诊断价值，现报道如下

1  资料与方法

1.1  一般资料

方便选取医院收治的怀疑为肺结核、痰涂片阴性的276例患者作为研究对象，根据临床诊断结果，将患者分为菌阴肺结核组和非结核组，包括菌阴组204例患者和非结核组72例患者，菌阴组204例患者中男134例、女70例，年龄（53.7±13.9）歲。合并矽肺1例，合并糖尿病9例;合并慢性乙型肝炎2例;合并慢性阻塞性肺病3例。非结核组72例患者中男45例、女27例，年龄（55.0±13.6）岁。合并糖尿病3例;合并慢性乙型肝炎1例;合并慢性阻塞性肺病1例。纳入标准：①怀疑为肺结核，采用PPD皮试、X线检查等怀疑为肺结核;②拟诊依据临床特点（例如咳嗽、咯血、发热、乏力、消瘦、夜间盗汗）、影像学特点（例如结节、肺炎、空洞、胸膜炎）等（肺结核诊断标准WS288-2008），最终经诊断性抗结核治疗有效明确诊断;③临床资料完整。排除标准：痰涂片及痰培养阳性患者。最终276例患者进入该研究，两组性别（χ2=0.237，P=0.626）、年龄（t=0.680，P=0.274）差异无统计学意义（P>0.05）。该研究经该院医学伦理委员会批准，并经入选患者或家属知情同意。

1.2  方法

1.2.1  T细胞斑点试验  所有患者均予以结核感染 T 细胞斑点试验，使用诊断试剂盒，严格按操作流程进行，判断标准：检测孔数与阴性孔之差为 6 及以上，即为阳性（阴性孔为 0～5 个），检测孔斑点数为阴性孔两倍及以上，即为阳性（阴性孔为6及以上）。此次采取分层法，分层 1 ：阴性孔为 0～5 个，检测孔数与阴性孔之差为 6 及以上，阴性孔为 6 个及以上，检测孔斑点数为阴性孔两倍及以上。分层 2 ：阴性孔与抗原 B 或 A 计数之差﹥ 20。分层 3 ：阴性孔数分别与抗原 B 及 A 计数之差均超过 20。

1.2.2  GeneXpert/RIF检测  取1 mL痰液标检测放入前处理管，加入相当于痰液标本体积两倍的SR痰标本处理液，将处理管放置在漩涡振荡器震荡20 s，直至无可见的块状标本，静置15 min，以无菌吸管吸取2 mL液化后眼部，缓缓转入到Cartridge反应试剂盒中，将其转移到检测模块中，仪器进行自动化检测。检测的原理：碱处理-中和离心沉淀法处理提取于DNA，加入抗原试剂A、B处理后，进行PCR扩增、杂交，判断阳性以及耐药情况。

1.3  观察指标

观察患者Xpert MTB/RIF、血清T‐SPOT-TB及Xpert MTB/RIF联合血清T‐SPOT-TB的肺结核检出结果，比较三者对肺结核的检出率。

1.4  统计方法

以SPPSS 17.0统计学软件进行数据统计分析，计数资料采用率%表示，比较采用χ2检验， P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  不同检测方法诊断肺结核的结果对比

276例，其中为菌阴肺结核204例、非结核72例。血清T‐SPOT-TB、Xpert MTB/RIF、联合检测的结果见表1。

2.2  不同检测方法诊断菌阴肺结核的效用对比

菌阴肺结核204例、非结核72例。血清T‐SPOT-TB灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率分别为70.59%、83.33%、92.31%、50.00%、73.91%，Xpert MTB/RIF则为40.68%、100.00%、100.00%、37.30%、56.16%，联合则为80.39%、83.33%、93.18%、60.00%、81.16%。联合诊断灵敏度、阴性预测值与符合率均显著高于Xpert MTB/RIF;血清T‐SPOT-TB特异度低于Xpert MTB/RIF;血清T‐SPOT-TB阴性预测值低于联合，诊断效能差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3  讨论

肺结核是常见的呼吸道传染病，我国是结核病的高发国家，2015年估算新发肺结核病例91.8万[3]。近年来，因人口老龄化、地区发展差异、环境变化及HIV感染等，肺结核发生率呈波动上升趋势，肺结核的预后与诊断时间关系密切，及早诊断治疗非常关键[4]。痰涂片检查是诊断肺结核的常用方法，但是涂阳性率较低，约30%～40%，从而导致延迟诊断、预后不佳[5]。Xpert MTB/RIF及T-SPOT.TB是两种新型的诊断技术，对菌阴肺结核诊断的诊断效能显著提高。该次研究显示，相较于单独应用，血清T‐SPOT-TB、Xpert MTB/RIF联合应用的均衡性有所提升，其中特异度无明显的改善，但是灵敏度、符合率和阴性预测值明显上升，可以在很大程度上减少漏诊，同时又不增加误诊，利于菌阴肺结核早期诊断。目前有关于血清T‐SPOT-TB、Xpert MTB/RIF诊断涂阴肺结核的效用研究较多[6]。该文结果示，T‐SPOT-TB在诊断菌阴肺结核的敏感性和特异性分别为70.59%、83.33%，与有关报道[7-8]的T‐SPOT-TB对结核病的诊断敏感性、特异性均在85%以上的结论大致相仿。有报道显示，以临床诊断为标准时，Xpert MTB/RIF在涂阴肺结核的检出率在42.74%～58.1%[9]，灵敏度可达73%[10-11]，然而该研究Xpert MTB/RIF检出率为30.07%（83/276），灵敏度仅40.68%，显著低于上述研究结果，分析其原因，可能与该文纳入标准非常严格有关（在以临床诊断为标准的涂阴肺结核基础上，又排除了培阳病例，即仅纳入涂阴培阴的临床诊断病例）。单就该研究结果分析，T‐SPOT-TB与Xpert MTB/RIF联合诊断灵敏度、阴性预测值与符合率均显著高于单用Xpert MTB/RIF;Xpert MTB/RIF特异度显著高于血清T‐SPOT-TB（P<0.05）;血清T‐SPOT-TB阴性预测值低于联合（P<0.05），提示XpertMTB/RIF联合T-SPOT-TB检测技术可显著提高菌阴肺结核的诊断符合率（P<0.05） ，差异有统计学意义（P<0.05）。

综上所述，XpertMTB/RIF联合T-SPOT-TB检测技术是一种简便、快速、准确的方法，两种技术检测的原理不同，理论上可以联合，不仅能明显提高诊断的效用，还可以弥补两种技术单独使用的缺陷，将菌阴（即痰涂阴培阴）肺结核患者发现率及确诊率提高40%左右，并显著缩短其诊断时间，提前菌阴肺结核的开始治疗时间，更加积极有效地治愈现症肺结核患者，减少结核病的传播。

[参考文献]

[1]  全国第五次结核病流行病学抽样调查技术指导组，全国第五次结核病流行病学抽样调查办公室.2010年全国第五次结核病流行病学抽样调查报告[J].中国防痨杂志，2012， 34（8）：485-508.

[2]  唐神结，丁卫明，王卫华，等.结核病临床诊治进展年度报告（2013）[M].北京：人民卫生出版社，2013：51-52.

[3]  Word Health Organization. Global tuberculosis report 2016[R]. Geneva： Word Health Organization，2016.

[4]  赵承杰，何雪姣.136例初治肺结核患者就诊延迟的影响因素分析[J].预防医学，2017，29（12）：1235-1237.

[5]  黄丽美，林健雄，彭东东，等.T‐SPOT.TB 在菌阴肺结核中的快速诊断价值[J].国际检验医学杂志，2016，36（14）：1975-1976.

[6]  王少华，郑丹薇，朱岩坤，等，两种恒温扩增分子检测法与实时荧光定量核酸扩增法对肺结核诊断价值的比较[J].中华结核和呼吸杂志，2018，41（2）：105-110.

[7]  黄毅，黄斌，胡昕，等.T-SPOT.TB在诊断中国菌阴肺结核患者中应用价值的Meta分析[J].中国循证医学杂志，2016， 16（12）：1381-13987.

[8]  熊宗年，张雪芹，陈艳. T‐SPOT.TB 和Gene Xpert MTB/RIF检测在结核诊断中的应用[J].临床血液学杂志，2017（5）：777-780.

[9]  王蔚，吕青山，郁勤龙.Xpert MTB/RIF在疑似肺结核患者诊断中的应用价值[J].中国防痨杂志，2018，40（5）：543-547.

[10]  张玉华，张国钦，钟达，等.应用Xpert TB/RIF法对我国肺结核诊断及利福平耐药检测的Meta分析[J].現代预防医学，2017，44（12）：2116-2119.

[11]  刘巧，丁晓艳，竺丽梅，等.Xpert MTB/RIF技术在初治菌阴肺结核中的诊断价值[J].现代预防医学，2019，46（3）：568-572.

（收稿日期：2020-03-23）

[作者简介] 李娜（1983-），女，河南扶沟人，硕士，主治医师，研究方向：结核病的诊断与治疗。