ZEB2与E-cadherin在前列腺癌发生、发展中的表达意义

王迎宾 李丹丹 付玉环

[摘要] 目的 研究E盒结合锌指蛋白2（ZEB2）与E-钙黏蛋白（E-cadherin）在前列腺癌发生、发展中的表达意义。方法 选取河北省唐山市协和医院2016年1月—2019年3月88例前列腺标本，其中60例前列腺癌组织为观察组，28例良性前列腺增生组织为对照组，采用免疫组化SP法检测两组患者ZEB2、E-cadherin蛋白表达。分析ZEB2和E-cadherin蛋白表达与前列腺癌臨床病理参数的关系。 结果 两组ZEB2、E-cadherin蛋白阳性表达率比较，差异有高度统计学意义（P < 0.01）。ZEB2、E-cadherin蛋白的表达与前列腺癌患者TNM分期和骨转移密切相关（P < 0.05或P < 0.01），而与年龄和Gleason分级无关（P > 0.05）。Spearman等级相关分析显示，前列腺癌组织中ZEB2与E-cadherin蛋白的表达呈负相关（r = -0.377，P < 0.01）。 结论 ZEB2蛋白的高表达与E-cadherin蛋白的表达降低在前列腺癌的发生、发展中可能发挥重要作用。

[关键词] 前列腺癌;E盒结合锌指蛋白2;E-钙黏蛋白;良性前列腺增生

[中图分类号] R737          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2020）10（b）-0102-04

[Abstract] Objective To study the expression significance of zinc-finger E-box binding protein 2 （ZEB2） and E-cadherin in the occurrence and development of prostate cancer. Methods A total of 88 prostate specimens from Tangshan Union Medical College Hospital from January 2016 to March 2019 were selected. Among them， a total of 60 prostate cancer tissues were in the observation group and a total of 28 benign prostate hyperplasia tissues were in the control group. The immunohistochemical SP method was used to detect ZEB2 and E-cadherin protein in the two groups. The relationship between ZEB2 and E-cadherin protein expression and clinicopathological parameters of prostate cancer were analyzed. Results The positive expression rate of ZEB2 and E-cadherin between the two groups were compared， and the differences were highly statistically significant （P < 0.01）. The expression of ZEB2 and E-cadherin protein were closely related to the TNM staging and bone metastasis of prostate cancer patients （P < 0.05 or P < 0.01）， but had nothing to do with age and Gleason grade （P > 0.05）. Spearman rank correlation analysis showed that ZEB2 and E-cadherin protein expression in prostate cancer tissue were negatively correlated （r = -0.377， P < 0.01）. Conclusion The high expression of ZEB2 protein and the reduced expression of E-cadherin protein may play an important role in the occurrence and development of prostate cancer.

[Key words] Prostate cancer; Zinc-finger E-box binding protein 2; E-cadherin; Benign prostate hyperplasia

前列腺癌是一种常见且恶性程度高的男性泌尿生殖系肿瘤。虽然前列腺癌的各种治疗方法得到了很大的发展和应用，但预后问题仍然存在。前列腺癌患者预后仍然较差，5年生存率约为50%[1-3]。因此，寻找和鉴定有效的分子标志物以评估前列腺癌患者的预后是有必要的。越来越多的临床证据表明，恶性肿瘤的临床预后不良主要是由于浸润和转移率高所致。近年来，上皮间质转化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）被证实与前列腺癌的浸润和转移密切相关[4]。E-钙黏蛋白（E-cadherin）被认为是通过调节启动过程上皮间质转化期间细胞间黏附的关键因子，并且E-cadherin的丧失加速了某些癌症中的恶性转化和肿瘤进展。有研究显示[5-6]，E盒结合锌指蛋白2（ZEB2）可以调节E-cadherin的表达，然后在肿瘤侵袭中发挥重要作用，包括胶质瘤、肾细胞癌和前列腺癌。本研究拟探讨前列腺癌组织中ZEB2与E-cadherin的表达，并分析其与临床病理特征的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择河北省唐山市协和医院（以下简称“我院”）2016年1月—2019年3月前列腺癌手术标本60例，年龄58～85岁，平均（68.43±8.42）岁，其中临床分期（TNM分期[7]）：T1～T2期23例、T3～T4期37例;病理分级（Gleason评分标准[8]）≤7分（高、中分化）32例、>7分（低分化）28例;伴有骨轉移39例。选择我院同期良性前列腺增生（BPH）手术标本28例作为对照组，年龄63～82岁，平均（71.36±7.53）岁。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准。所有标本均经病理科确诊为前列腺癌或良性前列腺增生，并依据《前列腺癌诊断标准》（WS336-2011）[9]。排除标准：接受内分泌、放化疗等治疗;合并其他恶性肿瘤。

1.2 试剂与方法

兔抗人ZEB2多克隆抗体为中杉金桥公司产品（生产批号：183654223），兔抗人E-cadherin多克隆抗体为中杉金桥公司产品（生产批号：19122682）。DAB染色液批号：20011502，产品编号：PV-8000D。显微镜生产厂商：OLYPUS;型号：BX53。免疫组织化学染色操作参照SP法说明书进行，染色结果用DAB光镜下显色，苏木精复染，常规脱水，透明，中性树胶封片后观察并分析。

1.3 结果判断

ZEB2蛋白染色主要定位于细胞质，为淡黄色至棕褐色颗粒。E-cadherin蛋白染色主要在细胞膜和细胞质。免疫组化阳性结果通过阳性细胞的百分比和染色强度综合判断。每例均由2名病理医师随机观察5个高倍视野（400×），各计数100个细胞。阳性细胞百分比<5%记0分，5%～25%记1分，>25%～50%记2分，>50%记3分;染色强度：无色记0分，淡黄色记1分，棕黄色记2分，棕褐色记3分;最后两项积分相加，≥3分为阳性，<3分为阴性。

1.4 统计学方法

运用SPSS 19.0统计软件对所得数据进行分析。计量资料以均数±标准差（x±s）表示。计数资料以例数表示，采用χ2检验。Spearman等级相关分析法进行相关性分析。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者ZEB2和E-cadherin蛋白表达比较

两组患者ZEB2、E-cadherin蛋白阳性表达率比较，差异有高度统计学意义（P < 0.01）。见表1、图1。

3 讨论

EMT使具有极性的上皮细胞在特定情况下逐渐失去细胞原有形态结构、细胞极性，向间质细胞转化，在这个过程中获得了迁移能力[10-11]。在肿瘤转移的过程中，癌细胞通过EMT实现对周围组织的浸润。E-cadherin表达的降低是EMT过程中的关键事件[12-13]。ZEB2基因属于E盒结合锌指蛋白基因家族，通过抑制E-cadherin基因转录，导致E-cadherin的表达降低，促进细胞发生EMT，从而增强细胞的侵袭转移能力。

郑丽等[14]研究发现，乳腺癌组织中ZEB2蛋白表达显著高于乳腺良性病变组织，ZEB2蛋白表达与乳腺癌淋巴结转移、TNM分期呈正相关，且与乳腺癌预后相关。罗庆丰等[15]研究提示ZEB2蛋白阳性表达与鼻咽癌远处转移、TNM分期、病理分型密切相关。体外实验研究显示[16-17]，下调ZEB2基因表达可以抑制卵巢癌细胞及乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力。本研究结果显示，ZEB2在前列腺癌组织中的阳性表达率高于良性前列腺增生组织，且表达差异有统计学意义（P < 0.05），提示前列腺癌组织中ZEB2蛋白的表达异常升高;且前列腺癌中ZEB2蛋白表达与前列腺癌患者的TNM分期、骨转移密切相关，而与患者的年龄和Gleason分级无关。提示ZEB2蛋白表达升高可能与前列腺癌的发生、发展有关。

E-cadherin是一种重要的细胞间黏附分子，是EMT中的关键因子，对同种细胞间相互黏附、维持组织结构的完整性和极性及抑制细胞离散等方面起重要作用，其表达降低促进EMT的进展，增强肿瘤细胞的侵袭转移能力[18-20]。李家平等[21]研究发现E-cadherin在正常子宫内膜呈高表达，而在子宫内膜腺癌显示低表达。本研究结果显示，在前列腺癌组织中E-cadherin表达低于良性前列腺增生组织，与陶晓峰等[22]观点一致。同时，E-cadherin与前列腺癌患者的TNM分期及骨转移有关，而与患者年龄、Gleason分级无关。提示E-cadherin表达降低导致癌细胞间的黏附减弱，从而促进前列腺癌浸润和转移。

已有研究发现，ZEB2与E-cadherin在鼻咽癌[15]、膀胱癌[23]、食管癌[24]中表达呈负相关，认为两者存在拮抗作用。本研究中ZEB2与E-cadherin两者在前列腺癌组织表达呈负相关，认为可能原因为ZEB2通过抑制E-cadherin的表达，降低细胞与细胞、细胞与基质黏附力，促进细胞发生EMT，从而促进前列腺癌细胞的侵袭、转移。

综上所述，ZEB2与E-cadherin是前列腺恶性演进过程中的两项重要因子，两者可能起着既独立又协同的作用，联合检测ZEB2和E-Cadherin可作为判断前列腺癌侵袭和转移的重要生物学指标。另外，ZEB2可作为评判预后的指标及治疗干预前列腺癌的新靶点，为临床诊治前列腺癌提供新的思路。

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（收稿日期：2020-04-07）