观察分析不同微生物检验方法于妇科炎症感染的检验效果

蔡奕鸿，温少玉，霍燕珊，沈捷玉

（佛山市第一人民医院脑科康复医院，广东 佛山 528000）

妇科炎症感染是困扰女性患者身心健康的疾病，严重的甚至会影响生育能力[1]。这种疾病主要是由于生殖道微生物菌群生长失衡所致，临床研究发现超过60%的女性出现过生殖道感染症状[2]。妇科检查是诊断妇科炎症感染的重要手段，目前镜检法、凝集法、培养法是妇科炎症感染微生物的常用检验方法，本研究比较了105例妇科炎症感染患者采用此三种方法检验微生物效果，现将研究结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年7月-2019年6月我院诊治的105例妇科炎症感染患者为研究对象，随机分为镜检法组、凝集法组、培养法组，每组为35例。镜检法组年龄介于21-44岁，平均（30.77±7.19）岁；其中盆腔炎9例，阴道炎11例，宫颈炎6例，附件炎9例；未婚10例，已婚25例。凝集法组年龄介于20-42岁，平均（31.00±5.93）岁；盆腔炎7例，阴道炎13例，宫颈炎7例，附件炎8例；未婚13例，已婚22例。培养法组年龄介于21-49岁，平均（33.35±7.68）岁；盆腔炎8例，阴道炎12例，宫颈炎5例，附件炎10例；未婚9例，已婚26例。三组患者年龄、妇科炎症类型、婚姻状况等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准 （1）患者经临床诊断符合妇科炎症感染，并有阴道瘙痒、白带异常、异味等症状；（2）年龄20-50岁；（3）患者在2周内未使用抗生素，在最近48 h内未有性生活、盆浴或阴道灌洗；（4）患者知情并书面签署知情同意书。

1.2.2 排除标准 （1）伴有阴道器质性疾病、恶性肿瘤、精神疾病者；（2）患有全身感染性疾病者；（3）月经期；（4）患者不同意或未签署知情同意书。

1.3 检验方法

1.3.1 标本采集（凝聚法除外） 由妇科医师负责采集，在阴道深部、后穹窿部位、宫颈口等处，采用生理盐水浸湿的棉试子采集分泌物。采样后于2 h内送至检验科，保存于4 ℃冰箱内，并在24 h内检验[3]。

1.3.2 镜检法组 将棉试子涂在滴有生理盐水和1滴10%氢氧化钾溶液的载玻片上，涂匀后盖上盖玻片，轻压盖玻片赶走气泡，用棉签吸去上下玻片边缘溢出的液体。为免强光影响观察，适当遮挡。先用低倍镜（例如100倍以下）观察有没有菌丝或孢子，再用高倍镜（例如200倍以上）观察菌丝及孢子的形态、特征，如见到卵圆形孢子、芽生孢子、与出芽细胞连成链状或分枝状的假菌丝，提示阴道分泌物念珠菌（真菌）检测阳性。

1.3.3 凝集法组 采用念珠菌乳胶凝集法检测试剂盒中的试子采集阴道分泌物，取材后将试子放回试剂盒配套的软试管中，按试剂盒说明书要求滴加缓冲液，并将标本与缓冲液混匀。在试剂盒配套的凝集试验卡片特征位置上滴加标本液，再滴加念珠菌特异性抗体，两者混匀。静置5 min，观察标本液中有无凝集反应，有则提示阴道分泌物念珠菌（真菌）检测阳性。

1.3.4 培养法组 在生物安全柜中，采用灭菌接种针挑取少量标本，接种于装有沙氏葡萄糖琼脂培养基试管斜面的中下部，并将标本浅埋在培养基中，然后用胶塞封口。试管放置在（37±1）℃生化培养箱中，分别在24 h、48 h、72 h、5 d时间点观察培养基上有无白色菌落出现，有则说明有真菌存在，采用细菌鉴定仪鉴别念珠菌（真菌）。

1.4 统计学方法 采用SPSS 24.0软件处理数据。计数资料以例数（%）形式表示，不同方法比较采用皮尔逊卡方进行检验，P＜0.05表示差异显著或有统计学意义。

2 结果

镜检法组阳性例数为27例（阳性率为77.14%），凝集法组阳性例数为29例（阳性率为82.86%），培养法组阳性例数为31例（阳性率为88.57%），三种方法比较差异不显著（P＞0.05），见表1。

3 讨论

妇科炎症是女性生殖器官（阴道、宫颈、附件、盆腔等）炎症反应，临床表现包括瘙痒、尿痛、红肿、分泌物增多等，致病原因有多种，例如不注意个人卫生、不洁性交、宫内节育器影响、内裤不透气、运动不足等[4]。临床上主要采用化学药物、放射性治疗，其中抗生素应用非常广泛，也正因为抗生素滥用导致耐药菌株日益增多，对妇科炎症感染治疗造成一定困难，许多患者久治不愈，不仅影响正常工作和生活，而且可引起内分泌失调和生育能力消退[5]。

念珠菌是一种分布广泛的致病真菌，常寄生在口腔、皮肤、黏膜等处，宿主自身免疫力下降或菌群失衡就会导致念珠菌病发，引起粘膜感染，严重时可致全身感染[6]。念珠菌属包含白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌等菌种，其中白念珠菌最常见。真菌检验方法主要有镜检法、凝集法、培养法等，其中培养法被认为是临床检验的金标准[7]，该方法不仅对病原体检出率较高，而且可同时进行药敏试验和菌种检验，缺点是检测时间较长、费用较高，故不利于早期诊断。凝集法是利用念珠菌酵母细胞抗原特点，与念珠菌特异性抗体相结合，形成肉眼可见的凝集现象，一般来说，标本中的念珠菌数量达到1.0×109个/mL，就能够通过肉眼观察到凝集反应，所以凝集法具有操作简便、反应快、特异性高的优点[8]，但不能同时进行菌种检验和药敏试验，单独运用此法有一定局限性。镜检法是真菌检验的传统方法，可采用生理盐水涂片，但因标本液中含有患者上皮细胞、杂质，可能干扰念珠菌的观察，造成假阴性。为了提高阳性率，可滴加氢氧化钾溶液，以溶解标本液中的细胞组织。同时镜检法对操作人员技术能力和责任心有一定要求，经验不足或观察马虎容易出现假阳性或假阴性。

本次研究显示，镜检法组、凝集法组、培养法组阳性检出率分别为77.14%、82.86%、88.57%，三组阳性检出率比较差异不显著（P＞0.05），这种情况与叶志敏[2]、张赫男[4]的结果一致，但不同方法阳性检出率高低顺序有别，叶志敏[2]研究结果中镜检法、凝集法、培养法的阳性检出率分别为90.28%、84.72%、83.33%，张赫男[4]结果中镜检法、凝集法、培养法的阳性检出率分别为85%、83.3%、86.7%，这反映了不同操作者在不同实验室条件下针对不同患者的差异。

综上所述，镜检法、凝集法、培养法对妇科炎症感染检验并无明显差别，可在临床应用时针对患者病情、诊疗条件等实际情况选择最适宜的方法。