儿童急性下呼吸道感染的病毒抗原检测及结果分析

尹文艳，靳蓉，苏守硕，王菲，李悦，刘燕

（贵阳市妇幼保健院/贵阳市儿童医院 呼吸科，贵州 贵阳 550002）

0 引言

急性下呼吸道感染 （acute lower respiratory tract infection，ALRTI）是儿童常见的感染性疾病，严重威胁儿童健康，并给患儿家庭及社会带来巨大的经济负担。且据WHO统计，发展中国家儿童肺炎的发病率比发达国家高l0倍。病毒是引起儿童肺炎的主要病原，2岁以下病毒性肺炎占86%，5岁以上占37%。其中，呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）、流感病毒（influenzavirus，IFV）、副流感病毒（parainfluenza virus，PIV）、鼻病毒（rhinovirus，RV）及腺病毒（adenovirus，AdV）等是引起儿童ALRTI的常见病毒病原[1]。本次研究选择于我院呼吸科住院的200例急性下呼吸道感染患儿作为研究对象，并对其鼻咽分泌物进行收集，通过直接免疫荧光法对儿童急性下呼吸道感染的病毒抗原进行检测，并对检测结果进行分析，现将报道示下。

1 资料与方法

1.1 一般资料。选择2017年12月至2019年10月前来本院接受诊疗的200例急性下呼吸道感染患儿作为研究对象，其中男112例，女88例；年龄28天至14岁，平均（7.03±1.24）岁。入选患者中，急性肺炎42例，急性支气管炎78例，急性毛细支气管炎80例。本次研究患儿家属已知情，并签署知情同意书，研究已获得院内伦理委员会同意。

1.2 方法。主要通过直接免疫荧光法对病毒抗原进行检测，检测的下呼吸道感染病毒抗原主要包括RSV、IFV、PIV1、PIV2、PIV3、RV、Adv共7种病毒抗原。检测方法如下：将一次性塑料导管经患者鼻腔插入，插入深度达7 cm左右直达咽部，然后将鼻咽分泌物吸取出，并使用2 mL浓度为0.9%的无菌氯化钠注射液进行冲洗导管，将标本取出之后马上送检。检测步骤为：将标本置入到离心管之中，并保持均匀状态，以1000 r/min完成离心操作，时间为10 min，将上部清液去除，向沉淀物之中挤入PBS，剂量为2 mL，然欧再以1000 r/min完成离心操作，时间仍设定为10 min，然后再将上清液去除，将0.5 mL PBS加入到沉淀物之中，对其充分混匀，然后取出25 mL置于多孔载玻片进行风干，完成风干之后使用冷丙酮将其固定5 min，之后使用试剂盒7中荧光标记单克隆抗体分别向标本上滴加，在37℃环境下孵育30 min，进行3次PBS洗片，风干之后进行封片镜检。通过荧光显微镜进行读片，若一孔涂片含有的细胞个数≥100个，则可以认为该涂片能够应用到检测结果评价之中，若出现的完整细胞≥2个，且细胞之中存在苹果绿荧光，则可判定为阳性[2]。

1.3 统计学分析。以SPSS 20.0进行统计学分析，将（）代表计量资料，经t检验，将%代表计数资料，经χ2检验，差异明显时，P<0.05，有统计学意义。

2 结果

2.1 本组标本病毒抗原检测结果。200份标本中，病毒抗原阳性检出率 48.5%（97/200），在7种病毒抗原中，以RSV阳性率检出率最高，其次为RV，两者差异明显，有统计学意义，P<0.05，见表1。

2.2 三种下呼吸道感染病毒抗原检测结果。毛细支气管炎病毒抗原阳性检出率高于其他两种疾病，P<0.05，差异有统计学意义，见表2。

3 讨论

表1 本组标本病毒抗原检测阳性结果（n，%）

表2 三种疾病病毒抗原检测结果（n，%）

直接免疫荧光法是当前呼吸道感染病毒抗原检测的一种廉价、快速、高效的方法，目前，此方法已在临床检测中推广应用。通过此方法能够对病毒抗原进行准确检测，可于儿童急性下呼吸道感染发病初期阶段便能够进行明确的指导。而从当前该疾病用药方面，滥用抗生素现象比较普遍，若未能够找出病毒抗原从而对患儿实施针对性治疗，则患儿在用药过程中很容易出现病毒耐药性，从而降低治疗效果，甚至不能够发挥药物效用[3]。因此，需要对儿童急性下呼吸道感染的病毒抗原进行准确检测，从而为临床治疗提供指导。目前，虽然直接免疫荧光法得以在呼吸道疾病检测之中得到普遍应用，但该方法还存在一定的缺陷，即在使用这种方法进行筛查的过程中，通常会存在4%-8%的染色具有非特异性，从而容易出现误诊的情况，对于该缺陷，阅片医务人员的工作经验显得非常重要，阅片医务人员可通过自身丰富的经验来对特异性和非特异性之间做出区分。

呼吸道病毒主要指的是侵犯呼吸道而引发呼吸系统以及呼吸系统外组织器官病变的一类病毒。在呼吸道病毒抗原中，以RSV、IFV、PIV1、PIV2、PIV3、RV、Adv这7种抗原最为常见。在这7种病毒抗原之中，RSV属于最为常见的一种抗原，其能够造成间质性肺炎，也能够造成毛细支气管炎，其病毒感染的潜伏期一般在2-8 d，大多数情况下，其潜伏期通常在4-6 d，其产生的症状一般比较轻，单纯感染病例一般会在6-10 d便可自行恢复[4]，通过X线检查，其产生的阴影一般会在2-3周时间范围内消失，若未能够采取有效的隔离措施，将会容易造成继发感染，并再度出现发热症状，因为患儿的呼吸道局部与成人相比缺乏IgA抗体，因此此类人群对RSV比较易感[5]。通过本次研究显示，病毒抗原阳性检出率为48.5%，其中单一阳性检出率最高的是RSV（40.21%），其次为RV（24.74%），RSV能够引发病毒性肺炎以及毛细支气管炎，病毒感染的潜伏期一般为2-8 d，如果未能够采取有效的隔离措施，容易继发感染，并再次出现发热，而因儿童呼吸道局部缺乏IgA抗体，故比较容易感染RSV[6]。此外，本次研究提示，在三种急性下呼吸感染病例中，以急性毛细支气管炎的病毒阳性检出率最高（77.5%），这与国内相关报道研究结果一致，可见，RSV是毛细支气管炎最常见的病毒病原，针对这一检测结果，需要临床医师指导患儿家属积极配合做好预防工作，尤其是对一般治疗进行重视，注意对患儿隔离，并做好其他病毒感染的预防工作。

综上所述，经检测分析，本地区儿童急性下呼吸道感染病毒抗原主要为RSV，其次为RV，临床用药治疗过程中，应该根据各病原体进行合理用药，并且相关单位还应该加强防控工作，对一般治疗特别重视，一旦出现感染病例，应该重视采取隔离措施，着重预防激发细菌感染以及其他类型病毒感染。