背根神经节巨噬细胞参与神经病理性疼痛的起始和维持

目的：探讨背根神经节(DRG)巨噬细胞在神经病理性疼痛的作用。方法：（1）神经病理性疼痛模型：坐骨神经分支选择性损伤模型(SNI)。（2）Fas诱导巨噬细胞凋亡(MAFIA)小鼠模型：MAFIA小鼠连续3天腹腔给予AP20187（AP，该药不通过血脑屏障），停药后第1天DRG巨噬细胞减少至20%，停药后第4天DRG巨噬细胞数量恢复至正常水平。说明MAFIA小鼠腹腔注射AP，可以选择性杀死DRG巨噬细胞。（3）荧光激活细胞分选术(FACS)：可以分选出DRG中CX3CR1染色阳性的巨噬细胞。结果：（1）SNI术后4天(POD4)，术侧DRG巨噬细胞增加至约2.9倍，并且持续到术后28天(POD28)。进一步分析发现，Ki67+CX3CR1+细胞在POD4明显增加，提示外周神经损伤后DRG巨噬细胞增殖加快。（2）MAFIA小鼠先连续3天腹腔给予AP或溶剂(VEH)，然后建立SNI模型，以研究DRG巨噬细胞是否参与早期神经病理性疼痛。与VEH组术侧DRG相比，术后4天(POD4) AP组巨噬细胞明显降低，术后9天(POD9) AP组巨噬细胞恢复至VEH组水平。与VEH组相比，AP组术后7天(POD7)才出现痛行为。此结果提示，DRG巨噬细胞参与早期的神经病理性疼痛。（3）研究者进一步观察，DRG巨噬细胞在慢性痛维持中的作用。MAFIA小鼠建立SNI模型28天后，再连续3天腹腔给予AP。AP组DRG巨噬细胞数量明显降低，同时神经病理性疼痛明显减轻。此结果提示，DRG巨噬细胞也参与神经病理性疼痛的维持。（4）DRG局部的神经元和巨噬细胞是否存在交互作用，是研究者下一步要解决的问题。采用Adv-Cre; Csf1fl/fl小鼠，可以特异性敲除DRG神经元的集落刺激因子-1 (Csf1)基因，同时阻止外周神经损伤引起的DRG巨噬细胞增加。MAFIA小鼠腹腔给予AP，不仅可以降低巨噬细胞IL-1β含量，还阻止神经损伤引起的DRG神经元BDNF的增加。结论：DRG巨噬细胞参与神经病理性疼痛的起始和维持。神经损伤后，DRG巨噬细胞和神经元存在交互作用，提示DRG可作为神经病理性疼痛的治疗靶点。