CIP2A、VCAM-1及TRF1在脑胶质瘤中的表达及临床意义

董留建 王树凯 冯书彬 冯强 吕强 李涛 裴航 齐林★

脑胶质瘤是由神经外胚叶衍化而来的胶质细胞发生的肿瘤，是颅内肿瘤中最为常见的一种疾病，占颅脑肿瘤的40%～50%［1］。据临床相关资料显示，近30年来，原发性恶性脑肿瘤发生率逐年递增，年增长率约为1.2%，中老年人尤为明显［2］。有相关文献报道，我国脑胶质瘤年死亡人数达3 万人，预后较差，5年生存率不足5%［3］。目前，随着肿瘤免疫治疗的进展，多靶点的分子免疫治疗已逐渐成为临床研究的焦点。蛋白磷酸酶2A 的癌性抑制因子（cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A，CIP2A）是一种癌蛋白，具有转化人永生化细胞能力。血管细胞黏附分子-1（vascularcell adhesion molecule-1，VCAM-1）属于免疫球蛋白超家族的成员之一，是一种重要的细胞黏附分子［4］。端粒结合蛋白-1（telomere repeat binding factor-1，TRF1）在端粒结合因子家族中具有极其重要的作用。目前已有研究认为CIP2A、VCAM-1 及TRF1 与脑胶质瘤的发生、发展关系密切［5］。故本组研究就CIP2A、VCAM-1 及TRF1 在脑胶质瘤中的表达及临床意义进行了分析，以此为多靶点的分子免疫治疗提供可靠的理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集本院2016年3月至2018年4月本院收治的77 例脑胶质瘤患者脑组织标本（脑胶质瘤组），其中，男性34 例，女性43 例，年龄，平均年龄（36.14±7.08）岁。按世界卫生组织（World Health Organization，WHO）（2016年）中枢神经系统肿瘤分类标准进行分级［6］：Ⅰ～Ⅱ级为低级别胶质瘤，共37 例（Ⅰ级21 例，Ⅱ级患者16 例），Ⅲ～Ⅵ级为高级别胶质瘤，共40 例（Ⅲ级28 例，Ⅵ级12 例）；肿瘤位置矢状窦镰旁23 例，凸面24 例，蝶骨嵴18 例，鞍旁12例；肿瘤直径：≤5 cm 者27 例，＞5 cm 者50 例。同期选取50 例非肿瘤患者颅脑外伤行减压而切除的脑组织标本作为对照组，其中，男性23 例，女性27 例，年龄，平均年龄（36.25±7.04）岁。两组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

纳入标准：①两组均未合并其他严重疾病者；②两组影像学资料和病理资料无丢失或缺损；③脑胶质瘤组术前未接受放疗、化疗者；④两组年龄均＞18 岁，且无意识障碍；排除标准：①两组合并血液系统、免疫功能障碍者；②两组哺乳期或妊娠期孕妇；③两组合并心、肝、肾等功能异常者；④二次手术者。本研究通过本院医学伦理委员会批准，受试者及家属签署知情同意书。

1.2 方法

收集两组患者的脑组织标本及临床资料，并采用S-P 免疫组织化学染色法检测CIP2A、VCAM-1及TRF1。CIP2A 抗体为兔抗人CIP2A 抗体，试剂盒购于北京博奥森生物技术公司；VCAM-1 抗体为兔抗人VCAM-1 多克隆抗体，试剂盒购自美国Abcam 公司；TRF1 抗体为羊抗人TRF1 多克隆抗体，试剂盒购自圣克鲁斯生物技术（上海）有限公司，具体操作严格按照说明书执行。染色结果判断［7］：根据阳性细胞百分比、染色强度判定（0、1、2、3 分。染色强度判定：0 分无色，1 分淡黄色，棕黄色2 分，棕褐色3 分。总积分：上述2 项评分的乘积。阳性：总积分≥3 分）。

1.3 观察指标

①比较对照组与脑胶质瘤组CIP2A、VCAM-1及TRF1 表达情况。②分析CIP2A、VCAM-1 及TRF1 表达与脑胶质瘤临床病理特征的关系。③对患者进行2年随访，分析其预后生存与死亡情况，并影响脑胶质瘤患者预后死亡的独立危险因素。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计软件包处理。计量资料以（±s）表示，行t检验；计数资料以n（%）表示，组间比较采用χ2检验；影响因素采用多元Logistic 回归分析，P＜0.05 为差异间具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者CIP2A、VCAM-1及TRF1表达情况比较

脑胶质瘤组CIP2A、VCAM-1 阳性表达率显著低于脑胶质瘤组，TRF1 阳性表达率显著高于脑胶质瘤组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组CIP2A、VCAM-1 及TRF1 表达情况比较［n（%）］Table 1 Comparison of CIP2A，VCAM-1 and TRF1 expressions between 2 groups［n（%）］

2.2 脑胶质瘤患者CIP2A、VCAM-1 及TRF1 表达与其临床病理特征的关系

低分级脑胶质瘤患者CIP2A、VCAM-1 阳性表达率明显低于高级别脑胶质瘤者，TRF1 阳性表达率明显高于高级别脑胶质瘤者，差异均具有统计学意义（P＜0.05）；脑胶质瘤患者CIP2A、VCAM-1及TRF1 阳性表达与其性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤位置无关（P＞0.05）。见表2。

2.3 影响脑胶质瘤预后死亡的单因素分析

术后对患者进行2年随访，预后死亡15 例（19.48%），生存62 例（80.52%）。患者年龄、肿瘤病理分级、CIP2A、VCAM-1 阳性表达及TRF1 阴性表达与脑胶质瘤患者预后死亡呈相关性，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

2.4 影响脑胶质瘤预后死亡的多因素分析

logistic 回归模型分析，年龄＞45 岁、病理分级高级别、CIP2A 和VCAM-1 阳性表达及TRF1 阴性表达是影响脑胶质瘤患者预后死亡的独立危险因素（P＜0.05）。见表4。

表2 脑胶质瘤患者CIP2A、VCAM-1 及TRF1 表达与其临床病理特征的关系［n（%）］Table 2 Correlation between CIP2A，VCAM-1 and TRF1 expression and their clinicopathological characteristics in glioma patients［n（%）］

表3 影响脑胶质瘤预后死亡的单因素分析［n（%）］Table 3 Single factor analysis of prognosis and death of glioma［n（%）］

表4 影响脑胶质瘤预后死亡的多因素分析Table 4 Analysis of multiple factors affecting prognosis and death of glioma

3 讨论

脑胶质瘤是中枢神经系统常见的肿瘤，发病缓慢，一般为数周至数月，少数可达数年。脑胶质瘤的发病机制目前尚未明确，认为可能与放射线、病毒感染、细菌感染、遗传等因素有关［8］。国内外有研究显示，CIP2A、VCAM-1 及TRF1 在肝癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌及子宫内膜癌等多种肿瘤中呈高表达，进一步推测其参与了肿瘤的发生、发展［9］。但迄今为主，国内鲜有学者报道CIP2A、VCAM-1及TRF1 在脑胶质瘤中的表达情况及三种蛋白的相互功能在脑胶质瘤发生、发展中的具体作用［10］。

CIP2A 属癌蛋白，在多种不同实体肿瘤中均呈高表达，可充当各种肿瘤的预后标志物［11］。高飞等［12］研究发现，CIP2A 可有效抑制蛋白磷酸酶2A（PP2A）的活性，而PP2A 属于一种蛋白激酶和信号蛋白，可调控多个细胞转化，其活性受到抑制是细胞异常增殖的重要条件之一。Pradip 等［13］研究表明，CIP2A 在人体大部分正常组织中不表达或呈极低表达，而在头部肿瘤、胃癌等永生化细胞中呈高表达。本组研究结果与上述文献基本相符。刘莉等［14］研究表明，CIP2A 表达与脑胶质瘤严重程度关系密切。高飞等［12］研究分析了CIP2A 蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义，发现CIP2A 阳性表达与患者性别、年龄、肿瘤位置及病理类型无关。本研究结果提示CIP2A 表达在评估脑胶质瘤病情方面具有一定作用。

VCAM-1 是重要的血管细胞调节因子。Nadia等［15］研究表明，VCAM-1 主要分布在血管内皮细胞、巨噬细胞和树突状细胞表面，对其作用的研究主要集中在免疫炎性反应。目前有关VCAM-1 在脑胶质瘤中表达水平研究结果各有千秋。Cheng等［16］研究认为，肿瘤细胞通过多种不同的途径刺激血管生成，同时抑制VCAM-1 表达，可有效减少免疫细胞浸润，降低免疫应答。但严立冬等［17］研究认为，脑胶质瘤细胞本身和细胞内VCAM-1 呈高表达，VCAM-1 可促进肿瘤细胞沿血管迁移和侵袭，增强肿瘤细胞免疫逃逸。本组研究结果推测，VCAM-1 可通过参与调解细胞免疫功能等机制在胶质瘤恶性发展过程中发挥重要作用。

TRF1 是端粒结合蛋白复合体家族成员之一，可促使端粒三级结构T 环（T-100p）的形成，被认为可以负性调节端粒酶活性。Bejarano 等［18］研究发现，肿瘤的癌变程度与TRF1 水平呈负相关。随着对端粒结合蛋白复合体家族的不断深入研究发现，在子宫内膜癌、结直肠癌中端粒相关因子的表达对其长度具有负反馈调节作用。本研究结果表明脑胶质瘤恶性程度越高，TRF1 表达出现明显下调。

综上所述，CIP2A、VCAM-1 及TRF1 在脑胶质瘤中的表达与其病理分级有关，可作为判断脑胶质瘤恶性程度及评估其预后的参考指标。