CML、Asprosin与2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化的关系

刘书苑 陈小敏

2 型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus，T2DM）为仅次于恶性肿瘤、心血管疾病的严重威胁人类健康的一类内分泌疾病，其在中老年人群中发病率较高，近年来研究表明我国T2DM 发病有逐渐年轻化的趋势［1］。T2DM 多数早期无明显症状，随着病情发展机体内分泌代谢异常逐渐加重，可引发微血管病变、甚至大血管病变的发生。颈动脉粥样硬化（carotid atherosclerotic sclerosis，CAS）是导致T2DM并发血管病变的的重要危险因素之一，动脉粥样硬化的发生与内皮功能紊乱、氧化应激有关［2］。Nε-羧甲基赖氨酸（Nε-carboxymethyl lysine，CML）为糖基化终末产物，其与机体氧化应激和促炎因子释放存在密切关系［3］；还有研究显示CML 参与了血管粥样硬化的发展［4］。白脂素（Asprosin）主要源自白色脂肪组织，其与T2DM 患者代谢紊乱存在密切关系［5］。本研究对T2DM 患者CML、Asprosin 水平进行检测，以了解CML、Asprosin 与T2DM患者CAS的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年1月至2019年1月于本院住院治疗的135 例T2DM 患者，根据颈动脉超声检查颈动脉内膜中层厚度（IMT）结果是否存在颈动脉粥样硬化CAS（IMT≥1.0 mm 或（和）有1 个以上斑块）［6］分为CAS 组（n=79）和无CAS 组（n=56），另选取同时期年龄性别匹配的糖耐量正常的60 例健康体检者作为对照组。

纳入标准：均符合WHO 定义的T2DM 诊断标准［7］；均对本研究知情同意并签署责任书；年龄≥18 岁，临床资料完整，能够配合完成此研究。本研究获得本院医学伦理委员会批准通过。排除标准：1 型糖尿病、其他内分泌疾病所致糖尿病、糖尿病酮症酸中毒、糖尿病高渗性昏迷状；肝肾等脏器严重功能障碍、脓毒血症、自身免疫性疾病恶性肿瘤患者；合并精神疾病、文盲等存在交流障碍者；无法配合完成此研究者。3 组间性别、年龄、饮酒史、吸烟史、BMI 等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 颈动脉超声检测

所有研究对象均通过美国惠普SONOS 5500 彩色多普勒超声诊断仪行超声检查，取平卧头仰位，探头频率7～11 MHz，对左右两侧颈动脉分叉处远端1 cm 处前后壁的4 个点进行测量颈总动脉远侧壁内膜至中层厚度，以左右两侧较大值进行分析。

1.2.2 血生化指标检测

所有研究对象收集5 mL 空腹静脉血，3 000 r/min 离心15 min 分离血清，-80℃保存待测。采用日立7600 全自动生化分析仪及仪器配套试剂检测总胆固醇（Total cholesterol，TC）、甘油三酯（Triglyceride，TG）、高密度脂蛋白胆固醇（High density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（Low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、糖化血红蛋白（Glycated hemoglobin，HbA1C），空腹血糖（Fasting plasma glucose，FPG），酶联免疫吸附法（ELISA）测定CML 及Asprosin 水平，试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。严格依照试剂盒及仪器说明书执行各项操作。

1.3 统计学分析

采用SPSS 19.0 统计学软件进行数据分析，计数资料用n（%）表示，采用χ2检验；计量资料用（±s）表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间比较用LSD-t 检验；相关性分析采用Pearson 检验；多元线性回归分析CML、Asprosin 的独立影响因素，非条件一般logistic 回归分析动脉粥样硬化分类变量的独立危险因素。P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组临床一般资料及血生化指标比较

3 组研究对象性别、年龄、饮酒史、吸烟史、BMI 比较差异无统计学意义（P＞0.05）；T2DM 合并CAS 组DBP、SBP、FPG、TC、TG、LDL-C、HbA1c、HOMA-IR、CML 及Asprosin 显著高于NCAS 组和NC 组，HDL-C 显著低于NCAS 组和NC 组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。T2DM 合并CAS 组患者糖尿病病程显著高于NCAS 组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 3 组临床一般资料及血生化指标比较［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general clinical data and blood biochemical indexes of 3 groups［n（%），（±s）］

表1 3 组临床一般资料及血生化指标比较［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general clinical data and blood biochemical indexes of 3 groups［n（%），（±s）］

注：与对照组比较，aP＜0.05；与无CAS 组比较，bP＜0.05。

因素性别（男/女）年龄（岁）病程（年）饮酒史（%）吸烟史（%）BMI（kg/m2）DBP（mmHg）SBP（mmHg）FPG（mmol/L）HbA1c（%）HOMA-IR TC（mmol/L）TG（mmol/L）LDL-C（mmol/L）HDL-C（mmol/L）CML（μg/L）Asprosin（pg/mL）NC 组（n=60）32/28 56.0±3.9-12（20.0）16（26.7）24.5±2.9 74.3±4.9 121.2±7.3 4.8±0.8 5.2±0.7 1.9±0.5 4.4±0.3 1.5±0.3 2.4±0.2 1.4±0.3 16.3±1.7 176.4±23.6 NCAS 组（n=56）30/26 57.2±3.9 3.7±1.9 11（19.6）15（26.7）25.5±2.6 80.2±7.9a 130.2±11.4a 8.2±1.7a 8.4±1.4a 4.7±0.9a 4.7±0.3a 1.9±0.4a 2.6±0.3a 1.2±0.3a 32.2±3.7a 253.5±24.8a CAS 组（n=79）43/36 59.3±3.7 7.4±0.9 16（20.4）22（27.8）26.2±2.2 88.9±7.7ab 138.3±11.8ab 9.6±1.4ab 10.6±2.4ab 6.8±1.8ab 5.1±0.2ab 2.2±0.4ab 3.1±0.6ab 0.9±0.2ab 54.1±5.5ab 355.1±40.6ab F/χ2值1.059 1.083 7.937 0.026 2.011 4.444 6.390 7.325 17.869 13.829 18.123 14.437 9.996 7.671 10.312 45.447 26.832 P 值0.589 0.190 0.015 0.871 0.181 0.132 0.038 0.032 0.009 0.001 0.000 0.026 0.018 0.023 0.009 0.000 0.008

2.2 T2DM 患者CML、及Asprosin 与临床各指标的相关性分析

相关性分析结果，CML、Asprosin 之间并与糖尿病病程、FPG、HOMI-IR、TC、TG、LDL-C、HbA1C 存在正相关性，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 CML Asprosin 与临床各指标的相关性分析Table 2 Correlation analysis of CML，Asprosin and clinical indicators in Patients

2.3 T2DM 患者CML 及Asprosin 与相关性指标的多元线性回归分析

分别以CML、Asprosin 为因变量，以糖尿病病程、FPG、HOMI-IR、TC、TG、LDL-C、HbA1C 为自变量，行多元线性逐步回归分析进一步分析结果显示：糖尿病病程、FPG、HOMI-IR、TC、TG、均为影响CML 及Asprosin 水平的独立危险因素。见表3。

2.4 T2DM 患者颈动脉粥样硬化危险因素的logistic 回归分析

以是否合并颈动脉粥样硬化为因变量，以CML、Asprosin、糖尿病病程、FPG、HOMI-IR、TC、TG、LDL-C 为自变量，进行logistic 回归分析，结果显示CML、Asprosin、糖尿病病程、FPG、HOMI-IR为颈动脉粥样硬化发生的危险因素。见表4。

3 讨论

T2DM 合并大血管病变病情一旦迅速发展，可累及中、大动脉内膜，加速内膜损伤和斑块形成，最终导致急性卒中、心肌梗死等心脑血管事件的发生。然而，目前对于T2DM 患者颈动脉粥样硬化等血管病变的进展缺乏有效的分子预测标志物。有研究证实［8］，晚期糖基化终末产物（advanced glycosylation end products，AGEs）在动脉粥样硬化中存在关键作用。AGEs 通过与受体结合激活NF-kB 转录因子信号传导通路，促进炎性细胞黏附，增加内皮细胞通透性，从而加重内皮功能失调和血管内皮炎性损伤，最终导致动脉粥样硬化形成。CML 为机体重要的AGEs 之一，研究证实其与高血压患者IMT 以及糖尿病足截肢患者、糖尿病合并冠心病患者CAS 存在密切关系，在CAS 的演进中有一定的早期预测价值［9-11］。因此，CML 可成为预测动脉粥样硬化有效的分子标志物。本研究结果提示CML 与T2DM 颈动脉粥样硬化的发生发展存在密切关系。氧化型LDL 通过损伤内皮细胞渗透至内膜下，参与动脉粥样硬化的发生发展。

表3 T2DM 患者CML、Asprosin 与相关性指标的多元线性回归分析Table 3 Multiple linear regression analysis of CML and Asprosin correlation indicators in Patients with T2DM

表4 T2DM 患者颈动脉粥样硬化危险因素的logistic 回归分析Table 4 logistic Regression Analysis on Risk Factors of CAS in Patients with T2DM

近年来人们逐渐认识到脂肪组织作为人体最大的内分泌器官，在机体能量代谢中具有重要作用。T2DM 患者存在明显的胰岛素分泌异常和胰岛素抵抗，往往伴有不同程度的血脂异常，加重胰岛素抵抗，促进T2DM 的发生发展。脂肪组织可分泌脂联素、瘦素、抵抗素、内脂素等多种脂肪细胞因子来维持机体代谢调节的稳态。研究证实［14］，脂肪因子中瘦素抵抗，抵抗素分泌增加或脂联素减少可导致胰岛素抵抗，因而脂肪因子在T2DM 的发病机制起到重要作用。本研究结果提示Asprosin 不仅参与了T2DM 发病过程，还增加了T2DM 患者发生CAS 的风险。Asprosin 为近几年新发现的一种以肝脏为主要靶器官的新型脂肪因子，由原纤维蛋白1（fbn1）基因的两个外显子（外显子65 和外显子66）编码，主要由白色脂肪组织在禁食期间合成和释放［5］。多项研究显示在肥胖成人，多囊卵巢综合征患者、2 型糖尿病、糖耐量异常等患者中血清Asprosin 水平均较健康人群明显升高［5，12-13］，本研究结果与之相一致。在胰岛素抵抗状态下，机体Asprosin 呈病理性增加Asprosin 在介导血管内皮细胞功能、血管炎症反应及动脉粥样硬化形成的过程中具有重要作用。本研究结果提示，CML、Asprosin 与T2DM 并发CAS 患者病情发展、糖脂代谢及胰岛素抵抗存在相互作用［15-16］。

综上所述，T2DM 患者CML、Asprosin 升高与患者糖脂代谢紊乱密切相关，并导致T2DM 患者并发颈动脉粥样硬化的发生发展。对于T2DM 患者CML、Asprosin 检测可作为T2DM 患者评价糖脂毒性、氧化应激水平及颈动脉粥样硬化发生进展的有效指标。