猪冷冻精液标准
2020-12-01倪和民王相国北京农学院
文│倪和民 王相国（北京农学院）
邓晓彬 朱宽峰 蒋凡（北京田园奥瑞生物科技有限公司）
赵俊金（全国畜牧总站）
金通 吴承武 王文强（南京农业大学淮安研究院）
刘燊 刘建（江西正邦养殖有限公司）
一、范围
本标准规定了猪冷冻精液的术语与定义、质量要求、制作程序、检验规则及检查方法、包装、贮存与运输。
本标准适用于猪冷冻精液产品。
二、规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 4143-2008牛冷冻精液；GB/T 5458液氮生物容器；GB 23238-2009种猪常温精液。
三、术语和定义
GB 23238-2009界定的以及下列术语和定义适用于本文件。
1.精子。具有活动性含有遗传物质的雄性细胞，它可以将遗传信息携带给卵母细胞。
2.精液。由精子和精清两部分组成。
3.精子活力。在37℃环境下前向运动精子占总精子数的百分率。
4.畸形精子。头、体、尾的形态变异的精子。头部畸形有巨大头、无定形、双头等；体部畸形有体部粗大、折裂、不完整等；尾部畸形有卷尾、双尾、缺尾等。
5.冷冻精液。经特殊工艺处理，经超低温冷冻后可在液氮中（-196℃）长期保存种猪精液。
6.精子密度。每毫升精液的精子数。
四、要求
1.原精液要求。
（1）种猪。来源于具有种用价值，体型外貌和生产性能等符合种用要求，三代系谱资料齐全，体质健康，不患有国家或农业农村部已发布的《动物防疫法》中所明确的二类疾病的种猪。
（2）商品用或其他用种猪。应符合国家相关规定。
（3）原精液。色泽为灰白色或乳白色，精子活力≥85%，精子密度≥1亿个/毫升，精畸形率≤5%。
2.猪冷冻精液要求。
（1）外观。细管无裂痕，两端封口严密。
（2）剂型、剂量。0.5毫升细管/支。
（3）每剂量冻精解冻后要求。精子活力≥60%。前向运动精子数≥3亿个。精子畸形率≤20%。
五、抽样
按照GB 23238-2009中第5章进行。
六、试验方法
1.冷冻精液试样制备。
（1）样品贮存。存放冷冻精液的低温容器质量应符合GB/T 5458规定，使用前经过清洗后加入新鲜液氮，样品浸泡在液氮中。取放样品时在空中暴露时间不得超过5秒。由专人保管样品，样品不允许脱离液氮，抽样登记单与样品随行。样品包装、标记应保持原样。
（2）样品解冻检测。三支细管分别直接置于50℃恒温水浴中解冻16秒，解冻三支混合精液后，取精液约50微升置于载玻片上加盖玻片，立即放在载物台上，温度保持37℃，用精子质量分析系统（TYCASA）检测分析，也可用200X～400X显微镜观察活力，每样片观察3个视野，进行全面评定。检验有效时限为解冻后5～60分钟。
2.测定。外观测定。采用目测法进行。剂量、精子活力、前向运动精子数、精子畸形率的测定按GB 23238-2009附录A中规定的方法进行。
七、检验规则
1.检验分类。按GB 23238-2009中6.2进行，其中常规检验项目中为本标准4.2.1和4.2.2；型式检验项目中为本标准4.2.1～4.2.3。
2.判定。按GB 23238-2009中第7章进行。
八、标志、包装
1.标志。
（1）品种。公猪的品种以代号表示，具体品种代号见附录A。
（2）内容。细管冻精应在管壁（或包装袋）上印制以下内容，并且印制标识要清楚：生产厂家；公猪品种；公猪号；生产日期或批次；质检员。
2.包装。采用塑料管或灭菌纱布袋包装。
九、贮存、运输
1.贮存。
（1）猪冷冻精液应存放在液氮生物容器中，液氮生物容器应在使用前后彻底检查和清洗。清理时，先用中性洗涤剂刷洗，再用40～45℃温水冲洗干净，在室温下放置48小时以上再充入液氮。
（2）应经常检查液氮生物容器的状况，如发现液氮消耗显著增加或容器外挂霜等异常情况，应立即更换。长期贮存冻精的容器，应定期清理和洗涮。
（3）取放冷冻精液之后，应保证冻精置于液氮面以下，再盖好容器塞，防止液氮蒸发或异物浸入。
（4）取放冻精过程中，只能将提放冻精的提桶或包装物提到容器颈的基部，不得提到颈口外，动作要迅速；若离开液氮面10秒尚未取放完，应放回液氮中浸泡一下再继续取放。贮存的冻精需要向另一个容器转移时，在容器外停留时间不得超过5秒。
（5）大型液氮生物容器，应有冻精分类存放位置的详细图表，分别注册，登记清楚，防止不同品种的冻精混淆。
2.运输。
（1）在移动液氮罐时应把握其手柄，轻拿轻放，防止碰撞倾斜，保护好真空抽气阀。
（2）装车运输时，贮存冻精的生物容器不可横放、叠放或倒置，要铺垫厚软垫子，适当固定，并根据运输条件用厚纸箱或木箱装好，牢固地系在车上，以免颠簸冲撞。
（3）运输冻精时，应有专人负责，办好交接手续（应附带精液运输、交接卡片）。途中应及时检查和添加液氮。
附录A
公猪品种代号见表A。
表A 公猪品种代号
