老年2型糖尿病患者下肢血管病变和血清维生素E水平的关系

高佳 罗镧

[摘要] 目的 探討老年2型糖尿病患者的血清维生素E水平与其下肢血管病变的关系。方法 选择2017年2月—2018年6月该院收治的170例2型糖尿病患者，其中130例T2DM患者以及对照组40例。根据彩色多普勒超声结果，将T2DM患者分为单纯T2DM不合并下肢血管病变组40例，以及T2DM合并下肢血管病变组90例（再分为轻度、中度、重度3个亚组）。采用高效液相色谱法（HPLC）测定血清中维生素E水平。结果 ①T2DM伴下肢血管病变组的血清维生素E水平显著低于单纯T2DM无下肢血管病变组及非T2DM对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。单纯T2DM无下肢血管病变组的血清维生素E水平也低于非T2DM对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。②T2DM伴下肢血管病变组中3个亚组相比，重度病变组血清维生素E水平低于中度组和轻度组， 中度组维生素E水平低于轻度组，差异有统计学意义（P<0.05）。③T2DM组血清维生素E水平与hs-CRP呈负相关。 结论 老年T2DM患者的血清维生素E水平下降，hs-CRP升高，其幅度与T2DM合并下肢血管病变的程度相关。血清维生素E水平降低可能是T2DM下肢血管病变发生和发展的因素。

[关键词] 老年;2型糖尿病;下肢血管病变;血清维生素E

[中图分类号] R587.1          [文献标识码] A          [文章编号] 1672-4062（2020）10（a）-0034-04

[Abstract] Objective To investigate the relationship between serum vitamin E level in elderly patients with type 2 diabetes and the vascular disease of the lower extremities. Methods Selected 170 cases patients with type 2 diabetes admitted to the hospital from February 2017 to June 2018， including 130 cases patients with T2DM and 40 cases patients in the control group. According to the results of color Doppler ultrasound， patients with T2DM were divided into T2DM alone without lower extremity vascular disease group of 40 cases， and T2DM combined with lower extremity vascular disease group of 90 cases （subdivided into three subgroups of mild， moderate， and severe）. High performance liquid chromatography （HPLC） was used to determine the level of vitamin E in serum. Results 1.The serum vitamin E level of the T2DM group with lower extremity vascular disease was significantly lower than that of the T2DM group without lower extremity vascular disease and the non-T2DM control group， the difference was statistically significant（P<0.05）. The serum vitamin E level of the T2DM group without lower limb vascular disease was also lower than that of the non-T2DM control group， the difference was statistically significant（P<0.05）. 2.Compared with the three subgroups in the T2DM with lower extremity vascular disease group， the serum vitamin E level of the severe disease group was lower than the moderate group and the mild group， and the vitamin E level of the moderate group was lower than the mild group. 3.Serum vitamin E level in T2DM group was negatively correlated with hs-CRP， the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The serum vitamin E level of elderly patients with T2DM decreased， and the hs-CRP increased， the magnitude of which was related to the degree of T2DM combined with lower extremity vascular disease. Decreased serum vitamin E level may be a factor in the occurrence and development of T2DM lower limb vascular disease.

[Key words] Elderly; Type 2 diabetes; Lower limb vascular disease; Serum vitamin E

2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）并发症很多，危害很大，下肢血管病变的危害尤其严重，糖尿病足大多不可逆，该类患者很可能因为大血管病变而致残，是截肢的主要原因，严重威胁着2型糖尿病患者的生活质量。研究表明，血糖的控制并没有显著减少2型糖尿病慢性并发症的发生率，除了血液中的葡萄糖，還有其他因素，对此起到了一定的影响作用[1]。2型糖尿病下肢血管病变的病理基础是动脉粥样硬化。动脉粥样硬化产生的可能的机制是损伤反应学说。该学说认为，动脉粥样硬化是一种由多种细胞因子释放而引起的慢性炎症性疾病[2]。近来研究发现，2型糖尿病及其大血管的AS均属慢性炎症性病变[3]。近来的研究显示，高敏C反应蛋白（hypersensitivity C reactive protein，hs-CRP）与动脉粥样硬化及其进展存在紧密关联[4-5]，且对大血管病变的发生起到了一定的促进作用[6]。该研究对2017年2月—2018年6月在该院收治170例的2型糖尿病患者进行下肢动脉血管的B超检查，并对血清中维生素E及hs-CRP的水平进行检测，从而探讨老年2型糖尿病患者下肢血管病变和血清维生素E及hs-CRP水平的关系，为2型糖尿病及其大血管病变的预防和治疗提供新的思路，现报道如下。

1  对象与方法

1.1  研究对象

该研究的患者为该院收治的2型糖尿病患者，共选取了200例患者作为研究对象，由于缺乏理解或依从性差而导致30例被试者中途退出，剩余170例研究对象，其中130例2型糖尿病患者，40例对照组（NC组）。

纳入标准：为排除血压对血清维生素E的影响，选择的各组研究对象血压水平正常。排除标准：伴随有其他下肢血管疾病、风湿类疾病、感染、肝肾功能异常、恶性肿瘤、6个月内有手术、外伤史、脑卒中。

2型糖尿病组：该研究选择了130例2型糖尿病患者作为研究对象，诊断依据按照1999年WHO的诊断和分型标准：①2型糖尿病症状加任意时间血浆葡萄糖水平≥11.1 mmol/L（200 mg/dL）;②空腹血浆葡萄糖≥7.0 mmol/L（126 mg/dL）;③口服葡萄糖耐量试验中，2 h葡萄糖水平≥11.1 mmol/L（200 mg/dL）。

患者中男女分别为70例和60例，患者的年龄为70～90岁，病程5～15年。

将全部2型糖尿病患者依据有无下肢血管病变而划分为单纯2型糖尿病组（A组）和合并下肢血管病变组（B组），两组分别为40例和90例。

对照组（NC组）：为该院收治的2型糖尿病患者，此组中男女分别为22例和18例，年龄为75～94岁，病程5～14年。

告知研究对象相关实验情况，得到患者及家属同意，且签署知情同意书，该研究经伦理委员会同意。

1.2  方法

一般检查。入选患者均被了解基本信息、相关病情信息和生活习惯等，对患者的身高、体重进行检测，且计算出吸烟率、体重指数。吸烟率=吸烟人数/总人数。体质指数（body mass index，BMI）=体重/身高2（kg/m2）。

对所有患者的下肢动脉形态和血流状况进行彩超检查。按照下肢血管超声检查的结果分4种，根据严重程度标准评分如下：①内膜中层厚度：不厚（<1 mm）0分;轻度增厚（1～1.2 mm）1分;中重度增厚（>1.2 mm）2分。②硬化程度：没有硬化0分;轻度硬化1分;中重度硬化症（检测到很强的回声）2分。③斑块：没有斑块0分;有一个斑块1分;有很多斑块2分;弥漫性分布3分。④狭窄：正常0分;轻度狭窄1分;中重度狭窄（狭窄50%～75%）2分;闭塞（无血流量）3分。疾病的严重程度的评分：0分为正常;低于10分的为轻度;10～19分为中度;高于19分的为重度。

根据超声检查结果对患者如下分组：①A组（单纯2型糖尿病组）：超声检查下肢血管未发现以上异常，则评0分;②B组（2型糖尿病并发下肢血管病变组）：超声检查发现以上4种病变之一。进一步依据超声检查结果而分为3个亚组：<10分为轻度组、10～19分为中度组、高于19分为重度组。

实验室检查：标本的采集：所有受试者采血的前一天接受正常饮食，晚上22：00开始禁食，次日清晨8：00空腹抽静脉血。

血清维生素E测定、药品、试剂与仪器、维生素E、甲醇，蒸馏水，无水乙醇，对全部试剂经过微孔滤膜过滤处理。

高效液相色谱仪（Aglient1200SL）包括：脱气机（G13692A）、自动进样器（ALS SL，G1329B）、泵（Bin Pump SL，G1312B）、柱温箱（TCC SL，G1486B）、紫外检测器（VWD SL，G1339C）;真空干燥机（DZF-250）;旋涡振荡器（新康医疗器械 XK96-A）;离心机（菲恰尔 TDL-513）;HP8453型分光光度计（欣康医药公司）。

色谱条件：依利特RP18色谱柱（3.9 mm×250 mm，5 μm），柱温：30℃; 流速：1.2 mL/min;流动相：甲醇：水（95：5）;检测波长：在7.01～12 min采用280 nm波长、在0～7 min在325 nm波长条件下测定;进样量：10 μL。

血浆样品的处理方法：量取200 μL血浆加入3.5 mg/L内部标准溶液20 μL和200 μL水溶液涡旋搅拌0.5 min，5 000 r/min离心10 min，加入400 μL无水乙醇和800 μL正己烷于溶液后将混合物涡旋搅拌3 min，残渣用100 μL甲醇溶解，10 000 r/min离心5 min，吸取正己烷层400 μL加入1 mL EP管中，45℃真空蒸干，吸取上清液20 μL进样。在整个操作过程中避免光照。

1.3  统计方法

采用SPSS 22.0统计学软件处理数据，组间差异进行t检验，计量数据以（x±s）表示;计数数据行χ2检验以频数和百分比（%）表示。对正态分布的维生素E水平及hs-CRP水平之间的关系进行Pearson相关性分析，其余非正态分布的临床指标之间进行Spearman相关性分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  对照组与2型糖尿病各组间临床指标比较

与对照组相比，两个病变组患者的维生素E表达量显著下降，差异有统计学意义（P<0.05），FBG、HbA1C、TC等指标则显著升高，差异有统计学意义（P<0.05）;和对照组相比，合并组患者的相关年龄、吸烟量、FIB、血清hs-CRP等指标都明显更高，差异有统计学意义（P<0.05）;合并组的年龄、吸烟量、血清hs-CRP均明显高于单纯2型糖尿病组，差异有统计学意义（P<0.05），维生素E水平则低于后者，差异有统计学意义（P<0.05）。

将年龄、病程、吸烟、作为协变量进行协方差分析，取出上述因素后，3组间的血清维生素E及hs-CRP也同样，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2  合并下肢血管病变患者3个亚组及对照组各临床指标比较

合并有下肢血管病变组中3个亚组患者的年龄、TC和血清hs-CRP均明显高于对照组（P<0.01），血清维生素E均明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。轻度组和中度组的FIB以及轻度组的BMI、TG等相关指标都显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。相比轻度组，中重组吸烟量和血清hs-CRP均显著升高，差异有统计学意义（P<0.05），血清维生素E均显著下降，差异有统计学意义（P<0.05）;重度组年龄、吸烟量和血清hs-CRP均明显高于中度组，差异有统计学意义（P<0.01），血清维生素E明显低于中度组，差异有统计学意义（P<0.01）;重度组的年龄和病程指标都明显高于轻度组，差异有统计学意义（P<0.05），而中度组和轻度组间，差异无统计学意义（P>0.05）。

将年龄、病程、吸烟量、BMI、FBG、HbA1c、TC、TG、FIB、ALB/Cr作为协变量进行协方差分析，消除以上因素影响后，血清维生素E及hs-CRP在各组间差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.3  下肢血管病变的危险因素之间的相关性比较

对维生素E水平及hs-CRP水平之间的关系进行Pearson相关性分析，其他临床指标进行Spearman相关性分析，差异有统计学意义（P<0.05），见表3。

分析下肢血管病变的危险因素之间的相关性，所得结果表明：下肢血管病变水平和患者年龄（r=0.433，P<0.01）、病程（r=0.295，P<0.01）、吸烟量（r=0.622，P<0.01、FIB（r=0.264，P<0.05）、CRP（r=0.417，P<0.01）呈正相关;与维生素E（r=-0.555，P<0.01）呈负相关，和其他因素无影响关系。

全部患者维生素E、hs-CRP和其他指标的相关性检测结果表明：血清维生素E水平和患者年龄（r=-0.338，P<0.01）、FIB（r=-0.332，P<0.01）、CRP（r=-0.380，P<0.01）等存在负相关关系，与其它因素无影响关系;血清hs-CRP水平与年龄（r=0.379，P<0.01）、FIB（r=0.275，P<0.01）、ALB/Cr（r=0.187，P<0.05）呈正相关，而和其他的因素则无相关性。

将不相关的因素予以排除，接着进行偏相关分析，所得结果表明，下肢血管病变的主要影响因素为年龄（r=0.344，P<0.01）、吸烟量（r=0.675，P<0.01）、hs-CRP（r=0.399，P<0.01）、维生素E（r=-0.534，P<0.01）。维生素E与hs-CRP的偏相关系数为-0.402（P<0.05）。

3  讨论

该研究的结果显示，无论是否合并下肢血管疾病，2型糖尿病组的维生素E水平均显著低于对照组（P<0.05）。血管病变程度和血清维生素E水平之间也存在一定相关性，前者越严重，后者下降越显著。从而得出血清维生素E的降低可能与2型糖尿病患者下肢血管疾病的发生发展有关系。2型糖尿病患者血清维生素E水平是低于健康人的。高血糖导致氧化应激反应的加强是其可能的原因，从而降低维生素E。低水平的维生素E可能加重中老年2型糖尿病患者的氧化应激水平。

该研究结果表明，和对照组以及单纯病变组相比，2型糖尿病下肢血管病变患者的血清维生素E水平更低，血清维生素E水平与下肢血管病变的严重程度是呈负相关的。2型糖尿病患者很可能由于血流异常，糖代谢失常等因素的影响而出现内皮损伤，进一步诱导细胞活化，从而导致维生素E分泌减少，IV型胶原多肽链结构最丰富的血管壁细胞外基质破坏，从而导致血管壁损伤。AS是2型糖尿病大血管病变的主要病理基础。维生素E通过抗氧化作用改善2型糖尿病患者的氧化应激水平。维生素E在改善脂质过氧化、抑制晚期糖基化终产物生成、保护DNA免受氧化损伤等方面起重要作用。因此，维生素E可能是减缓动脉粥样硬化进展和稳定不稳定斑块的一个因素。合并AS的2型糖尿病患者维生素E含量较低，发生严重心腦血管并发症的危险性较高。

该研究中的相关分析表明，下肢血管病变的程度与年龄、2型糖尿病病程、吸烟量、FIB与hs-CRP呈正相关，与维生素E呈负相关，这表明延缓2型糖尿病大血管病变的方法可以是戒烟、用药物抑制血管炎症、降低FIB等。研究维生素E和hs-CRP与2型糖尿病大血管病变的关系，可以为寻找更有效的早期诊断提供新的途径。补充维生素E也可能是主要的2型糖尿病血管病变的预防和治疗的一个有利的措施。然而，由于这项研究是一项横断面研究，因此，补充维生素E是否能预防或延缓2型糖尿病的进展，仍有待进一步研究明确。

該研究的创新性在于，以前有关于维生素E水平与2型糖尿病血管病变的研究，大部分都是动物研究[7-10]，人体研究较少，该研究不仅仅选取人为研究对象，而且随着社会老龄化加剧，老年人越来越多，该实验人群选用老年人，此为该研究之创新点。

2型糖尿病下肢动脉粥样硬化是多种因素相互影响、相互促进的结果。目前，该研究已有的理论知识还不能完全解释2型糖尿病患者下肢动脉硬化的确切机制。因此，影响下肢动脉硬化的因素及治疗仍需进一步研究。

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（收稿日期：2020-07-01）