卵白蛋白-菊糖-茶多酚微胶囊对石榴籽油稳定性的影响

雷雨晴，王康平，余雄伟，付琴利，刘 伟，李述刚,*

（1.湖北工业大学生物工程与食品学院，发酵工程教育部重点实验室，湖北 武汉 430068；2.武汉旭东食品有限公司，湖北 武汉 430000；3.湖北良品铺子食品工业有限公司，湖北 武汉 430000）

石榴（Punica granatumL.）为石榴科（Punicaceae）石榴属（PunicaL.）植物，是一种极具食用和药用价值的特色经济作物[1]。石榴平均每千克含籽37～143 g，石榴籽的含油率较高，为20%左右[2]。石榴籽油具有良好的营养和医疗价值，其具有极高的多不饱和脂肪酸含量，因而在某些特殊环境条件下（如光照、温度、氧气、湿度等）易发生脂肪酸氧化而劣变[3]。

近年来，众多学者对改善石榴籽油稳定性进行了大量研究，主要包括加入抗氧化剂[4]、精炼[5]、微胶囊技术[6]等。其中微胶囊技术不但可以有效防止石榴籽油氧化变质，还可改善其贮存性，因此在食品工业中有广泛的应用。功能性油脂微胶囊化方法较多，而喷雾干燥法因工艺简单、成本低廉、适用范围广，较为常用[7]。影响喷雾干燥的主要因素之一是壁材的选择，蛋白质和多糖是目前制备微胶囊壁材最常用的两类天然大分子聚合物[8]，但单一蛋白质或多糖壁材形成的微胶囊在贮藏和递送方面会受到限制，而蛋白质-多糖复合壁材能够弥补单一壁材的缺点，且能增强包封效率和保护效果[9]。卵白蛋白（ovalbumin，OVA）是蛋清蛋白的主要组成部分，具有乳化能力，是目前应用最广泛的模型蛋白[10]；菊糖（inluin，IN）是一种贮藏多糖，在菊苣、大蒜、韭菜、朝鲜蓟、香蕉等植物中均存在，它是由果糖经糖苷键连接而成的线性直链多糖，末端是葡萄糖残基[11]，可显著改善食品的质地、加工性能和营养价值[12]。为提高石榴籽油稳定性，其包封壁材应具有一定的抗氧化能力，茶多酚（tea polyphenols，TP）是茶叶中多酚类物质的总称，是一种新型的抗氧化剂，具有清除自由基、抗肿瘤、抑菌等多种生理活性[13]。

基于以上分析，本实验以石榴籽油的氧化稳定性为研究内容，以OVA、IN和TP为壁材，通过测定溶解度、包封率、密度、吸湿性、微观结构、抗氧化能力等指标，分析喷雾干燥微胶囊化处理后石榴籽油的理化特性和贮藏稳定性。本实验旨在为石榴籽油的开发利用提供理论与技术支撑，以期促进功能性植物油脂的广泛应用。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

石榴籽油（纯度98%） 西安通泽生物科技有限公司；IN（聚合度小于10） 青海Faninon公司；OVA（A-5253） 美国Sigma公司；TP 上海麦克林生化科技有限公司；尼罗红和异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FITC） 武汉叶源生物科技有限公司；其他试剂（均为分析纯） 国药集团化学试剂有限公司。

1.2 仪器与设备

KQ5200 DE型数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司；PT-MR 2100型高速剪切乳化机 瑞士Kinematica公司；Mastersizer 2000型激光粒度仪英国Malvern公司；Haake Rheostress 6000型旋转流变仪美国Thermo Fisher公司；SU-8010扫描电子显微镜、F-4600荧光分光光度计 日本日立公司；D-Eclipse C1 80i荧光显微镜 日本Nikon公司；YC-015喷雾干燥机上海乔枫实业有限公司；ColorFlex EZ色差仪 美国HunterLab公司；Multifuge高速冷冻离心机 赛默飞世尔科技（中国）有限公司；TU-1900型双光束紫外-可见分光光度计 北京普析通用仪器有限责任公司。

1.3 方法

1.3.1 石榴籽油乳液的制备

取4 支烧杯分别加入0.6 g OVA，编号依次为1、2、3、4。烧杯1加入39.4 g超纯水，烧杯2加入0.6 g TP和38.8 g超纯水，烧杯3加入0.6 g IN和38.8 g超纯水，烧杯4加入0.6 g TP、0.6 g IN和38.2 g超纯水。将4 支烧杯分别用磁力搅拌器搅拌12 h，然后超声20 min（功率为100 W），之后在4 支烧杯中各加入10 g石榴籽油，使用超高速均质机在19 000 r/min持续2 min，制得质量分数20%水包油乳化液。

1.3.2 乳液液滴尺寸及分布测定

用激光粒度仪在室温（20 ℃）条件下测定乳液的粒径分布以及体积加权平均粒径（d4,3/μm）和表面积加权平均粒径（d3,2/μm）。分散单元泵转速为2 000 r/min，遮光率为10%～30%，分散相和连续相的折射率分别为1.47和1.33。比表面积按公式（1）计算。

式中：Φ为两相体积比（油相与水相的体积比）。

1.3.3 乳液黏度测定

使用流变仪测定乳液黏度，不同壁材的石榴籽油乳液黏度通过稳态剪切实验测定，通过循环水浴设定实验温度为（25.0±0.2）℃，剪切速率0.01～200 s-1，设定对数模式采集数点。

1.3.4 乳液稳定性观察

将新鲜乳液室温放置3 d，采用激光粒度仪测量4 种乳液的d4,3/μm，并用荧光显微镜对样品的微观结构进行表征。样品用尼罗蓝（质量分数0.1%）染色，以显示乳液液滴表面吸附蛋白的区域，放大倍数为10 倍和40 倍。

1.3.5 石榴籽油微胶囊的制备

以4 种不同壁材的新鲜乳液为原料，采用喷雾干燥制备微胶囊。入口温度为210 ℃、出口温度为80 ℃、进料速率为0.6 L/h，雾化气流量保持在35 L/min。喷雾干燥后的粉末放置于4 ℃环境中，避光备用。

1.3.6 微胶囊粒径测定

根据Zhang Bin等[14]的方法，使用激光粒度仪测定所有样品的粒度分布。将微胶囊样品加到2 000 r/min搅拌的循环水中，直至满足激光信号条件。通过通用模型对衍射数据进行拟合，得到微胶囊样品粒径。

1.3.7 微胶囊包封效果的测定

1.3.7.1 水分质量分数和固体回收率测定

水分质量分数：采用质量法进行测定，在真空炉中以温度70 ℃、真空度20 mm Hg柱干燥48 h至恒质量，干燥后立即测定样品水分质量分数。

固体回收率：每次干燥实验后收集的粉体质量/g（mf，干基）与制备的乳液（水除外）中各组分的初始质量/g（mi，干基）之比，固体回收率按公式（2）计算。

1.3.7.2 总油质量分数的测定

称取微胶囊（m3/g）置于干燥锥形瓶中，加入40 mL蒸馏水，超声处理2 min，待微胶囊完全溶解后，用无水乙醇、乙醚、石油醚（体积比2∶1∶1）萃取3 次，合并萃取液，置于已知质量的干燥圆底烧瓶（m1/g）中，旋转除去溶剂后称其质量（m2/g）。总油质量分数按公式（3）计算。

1.3.7.3 游离油质量分数的测定

称取微胶囊2.5 g，置于干燥锥形瓶中，加入20 mL石油醚，在30 ℃下充分萃取2 min，过滤，再分别加入10 mL石油醚萃取、过滤3 次，滤液用已知质量的干燥圆底烧瓶（m1/g）收集，蒸干溶剂后称其质量（m2/g）。游离油质量分数按公式（4）计算。

1.3.7.4 包封率的测定

包封率是指微胶囊中非游离油质量分数与微胶囊总油质量分数的比值，按公式（5）计算。

1.3.8 微胶囊物理性质的测定

1.3.8.1 休止角的测定

将漏斗放置在铁架台上，将微胶囊粉末加入到漏斗中，使粉体流向一个有限直径圆盘的圆心，直至堆积层斜边的边缘到达圆盘边缘，此时堆积粉末形成的斜边与水平面的夹角即为休止角。

1.3.8.2 堆密度的测定

将称质量（m/g）后的微胶囊产品装填于量筒中，读出体积（V/mL）后按公式（6）计算微胶囊产品的堆密度。

1.3.8.3 溶解性的测定

称取微胶囊2.5 g置于干燥的离心瓶中，加入20 mL蒸馏水，磁力搅拌30 min后，1 000×g离心20 min。溶解性按公式（7）计算。

式中：m1为离心瓶的质量/g；m2为离心后除去上清液的质量/g。

1.3.9 微胶囊微观结构的观察

1.3.9.1 荧光显微镜观察

将10 μL的尼罗红和10 μL的FITC溶于质量浓度1 mg/mL的乙醇溶液，分别取适量的微胶囊迅速浸没染色液，风干。尼罗红和FITC的激发光谱分别在543 nm和490 nm波长处测定，每个样品至少观察3 次。

1.3.9.2 扫描电子显微镜观察

使用扫描电子显微镜观察样品的表面形貌。用双面导电胶将微胶囊粉末粘在样品台上并用10 nm的金覆盖，在15.0 kV的二次电子模式下进行扫描电子显微镜观察。

1.3.10 微胶囊抗氧化能力的测定

1.3.1 0.1 DPPH自由基清除率的测定

1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-d i p h e n y l-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除率的测定参照Brand-Williams等[15]的方法稍作修改。将2 mL新鲜DPPH溶液与2 mL样品充分混合，黑暗中反应30 min，然后在517 nm波长处测定吸光度。以溶于甲醇的Trolox溶液标样作标准曲线，空白为2 mL甲醇，得到清除率（y）与Trolox含量（x）的回归方程：y＝0.051 4x+0.002 1，R2＝0.999 4。DPPH自由基清除率按公式（8）计算。

式中：A为样品的吸光度；A0为空白的吸光度。

1.3.10.2 ABTS阳离子自由基清除率的测定

2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)，ABTS）阳离子自由基清除率的测定参照Miller等[16]的方法。10 mg ABTS工作液与2.6 mL过硫酸钾溶液（2.45 mmol/L）反应制备储备液。使用前将储备液在4 ℃黑暗环境中保存，用超纯水稀释储备液并在734 nm波长处测其吸光度，吸光度达到0.70±0.02时即得到ABTS测定液。将1 mL样品和3 mL ABTS测定液混合，并在黑暗中反应30 min，然后测量734 nm波长处的吸光度。以溶于甲醇的Trolox溶液标样作标准曲线，空白为1 mL甲醇，得到清除率（y）与Trolox含量（x）的回归方程：y＝0.035 6x+0.003 8，R2＝0.996 7。ABTS阳离子自由基清除率按公式（9）计算。

式中：A为样品的吸光度；A0为空白的吸光度。

1.3.10.3 ORAC的测定

氧自由基吸收能力（oxygen radical absorbance capacity，ORAC）的测定：整个反应在37 ℃的75 mmol/L磷酸盐缓冲液（pH 7.4）中进行，混合物的最终体积为200 μL。将100 μL样品和50 μL荧光素钠盐（0.4 μmol/L）在黑色96 孔微孔板的孔中混合，在37 ℃下反应15 min，然后迅速加入50 μL偶氮二异丁脒盐酸盐（2,2’-azobis-2-amidinopropane-dihydrochloride,AAPH）溶液（60 mmol/L），并用荧光分光光度计记录每分钟荧光强度（荧光激发波长：374 nm；荧光发射波长：485 nm）。测定结束后计算荧光强度-时间曲线即荧光衰减曲线面积（AUC样品），另两组分别为一组只加荧光素钠和磷酸盐缓冲液，计算其荧光衰减曲线面积（AUCFL），另一组加入磷酸盐缓冲液和荧光素钠及AAPH，计算其荧光衰减曲线面积（AUCAAPH）。以溶于甲醇的Trolox溶液标样作标准曲线，空白为100 μL甲醇，得到ORAC（y）与Trolox含量（x）的回归方程：y＝0.023 2x+0.012 2，R2＝0.988 5。ORAC按公式（10）计算。

基于上述方法从Trolox校准曲线中确定石榴籽油微胶囊的DPPH自由基清除率、ABTS阳离子自由基清除率、ORAC，并以每克油含Trolox的物质的量（μmol/g）表示。

1.3.11 微胶囊贮藏稳定性的测定

1.3.1 1.1 光照对微胶囊贮藏稳定性的影响

避光贮藏：分别取一定量不同壁材的石榴籽油微胶囊置于样品瓶中并用铝箔包裹，室温下避光保存，每隔2 d测定脂质过氧化氢的含量，实验时间为30 d。

光照贮藏：分别取一定量不同壁材的石榴籽油微胶囊置于样品瓶中并用铝箔包裹，室温和日光灯下保存，每隔2 d测定脂质过氧化氢的含量，实验时间30 d。

1.3.1 1.2 温度对微胶囊贮藏稳定性的影响

取一定量不同壁材的石榴籽油微胶囊分别置于4、25、40 ℃下避光保存，每隔2 d测定脂质过氧化氢的含量，实验时间为30 d。

1.3.1 1.3 湿度对微胶囊贮藏稳定性的影响

在室温避光条件下分别通过不同的饱和盐溶液实现相对湿度条件，在25 ℃下不同相对湿度对应的饱和溶液分别为：氯化镁饱和溶液（相对湿度33%）；溴化钠饱和溶液（相对湿度58%）；溴化钾饱和溶液（相对湿度80%）。每隔2 d测定脂质过氧化氢的含量，实验时间为30 d。

1.3.1 1.4 脂质过氧化氢的测定

根据Su Yuru等[17]的方法处理石榴籽油微胶囊样品，暗反应20 min后，在510 nm波长处测定吸光度。以氢过氧化枯烯（cumene hydroperoxide，CHP）溶液标样作标准曲线，得到脂质过氧化氢相对含量（y）与CHP含量（x）的回归方程：y＝0.132x+0.001 5，R2＝0.999 6。基于CHP标准曲线确定石榴籽油微胶囊脂质过氧化氢的含量，并以每千克油含CHP的物质的量表示，单位mmol/kg。脂质过氧化氢相对含量按公式（11）计算。

式中：A为样品的吸光度；A0为空白的吸光度。

1.4 数据处理与分析

每组数据3 次重复，利用Origin 2017软件处理数据与作图。使用SPSS 23.0软件对数据进行差异显著性分析与t检验，P＜0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 石榴籽油乳化特性分析

乳化颗粒大小、流变性和稳定性是评价乳液优劣的重要指标[18]。如图1所示，IN和TP的添加对乳液有很大的影响，当同时添加IN和TP时，乳液粒径最小，且分布均一（图1 A），表观黏度最大（图1 B）；25 ℃贮藏3 d后，4 种石榴籽油微胶囊粒径无明显变化（图1C），且无乳析现象产生（图1D）；即随着小分子多糖和TP的添加，OVA、IN和TP相互作用，促进体系稳定平衡，对乳液的形成存在促进作用，这一现象与Koocheki等[19]报道的蛋白、多糖和多酚复合乳液观察结果基本一致。

荧光成像技术在乳液微观形貌观察上运用非常广泛[20]，添加IN和TP的石榴籽油乳液常温贮藏3 d后的荧光显微镜图见图2，常温贮藏3 d后，石榴籽油乳液液滴没有发生聚集，分散均匀；OVA-IN-TP乳液粒径最小，且分散均一，这与图1C所示的粒径变化保持一致。

图1 IN和TP对石榴籽油乳液粒径分布（A）、表观黏度（B）、常温贮藏3 d d4,3变化（C）和宏观状态（D）的影响Fig. 1 Influence of IN and TP on particle size distribution (A), apparent viscosity (B), d4,3 during storage at normal temperature for three days (C)and macroscopic appearance (D) of pomegranate seed oil emulsions

图2 添加IN和TP的石榴籽油乳液常温贮藏3 d的荧光显微镜图Fig. 2 Fluorescence microscopic images of pomegranate seed oil emulsions with different wall materials after three days of storage at normal temperature

表1对石榴籽油乳液的表面积平均粒径d3,2、体积平均粒径d4,3和比表面积等做了分析。相比OVA乳液，OVA-TP、OVA-IN和OVA-IN-TP乳液粒径均显著减小，比表面积和黏度显著增加（P＜0.05），由此可见，IN和TP的添加对石榴籽油乳液乳化性的提升有促进作用。OVA-IN-TP乳液的d4,3与d3,2差值最小，表明液滴大小更均匀，乳化性最佳。

表1 IN和TP对石榴籽水包油型乳液的初始参数的影响Table 1 Initial parameters of pomegranate seed oil-in-water emulsions prepared with different wall materials

2.2 石榴籽油微胶囊理化特性分析结果

2.2.1 物理性质

由表2可知，4 种壁材的微胶囊平均粒径存在差异，同时添加IN和TP的微胶囊粒径最小，此规律与表1中石榴籽油乳液的粒径大小一致；休止角是衡量粉末产品流动性的重要指标，休止角小于30°说明产品流动性最好，30°～45°表明产品流动性较好[21]，随着IN和TP的添加，微胶囊产品流动性减小；所有微胶囊的堆密度较小，均分布在0.14～0.42 g/mL；OVA-IN-TP微胶囊的溶解性（45.61%）约为OVA（16.21%）的3 倍，这可能是由于IN和TP在喷雾干燥过程中与OVA的结合更紧密，导致壁材坚固且体积减小，同时IN和TP有较强的吸湿能力[22-23]，从而增加其溶解性，降低了流动性。

表2 石榴籽油微胶囊的物理参数指标Table 2 Physical parameters of pomegranate seed oil microcapsules

2.2.2 化学成分质量分数及包封率

水分质量分数、固体回收率及包封率是衡量微胶囊性质的重要指标，过高的水分质量分数会让产品在贮藏过程中结块、霉变。由表3可知，4 种微胶囊产品水分质量分数都较低，大约为3%～5%，符合粉末制品水分质量分数在2%～5%的要求[24]；以OVA-IN-TP为壁材的微胶囊表现出最高的固体回收率（61.77%）和包封率（94.52%），这是由于乳液黏度的增加减少了干燥过程中水滴内部的循环运动，从而导致较高的油保留率[25]，因此，微胶囊能够达到较好的包封效果。

表3 石榴籽油微胶囊的化学成分和包封率Table 3 Chemical composition and microencapsulation efficiency of pomegranate seed oil microcapsules with different wall materials

2.2.3 微观结构

图3 IN和TP对石榴籽油微胶囊微观结构的影响Fig. 3 Microstructure of pomegranate seed oil microcapsules with different wall materials

图3 是经过喷雾干燥后不同壁材微胶囊的微观结构图。使用特异性荧光探针对微胶囊中各组分的位置进行标记（图3A），红色区域代表石榴籽油，绿色区域代表OVA，黄色部分为OVA与石榴籽油滴共定位，将油和壁材整合在一起，表明所得的微胶囊应为基质型[26]。结果与Wang Chenchen等[27]描述的由鱼油和乳清蛋白组成类似基质型微胶囊一致。此外，对石榴籽油微胶囊进行扫描电子显微镜观察（图3B），可以看出经过喷雾干燥得到的OVA微胶囊产品颗粒呈球形，由于干燥导致了囊壁部分塌陷，在囊壁上形成了褶皱，并存在裂缝和孔洞，这可能是由于喷雾干燥过程中微胶囊颗粒发生膨胀，造成微胶囊表面积增大[28]，同时导致流动性差、堆密度小的特性。而OVA-IN-TP微胶囊抵抗这种因素能力较强，形成的囊壁结构完整、致密，并且颗粒饱满，微胶囊形态最好。

2.3 石榴籽油微胶囊抗氧化活性分析结果

由表4可知，不同壁材微胶囊的DPPH自由基清除能力存在显著差异（P＜0.05），OVA、OVA-TP、OVA-IN和OVA-IN-TP的DPPH自由基清除率分别为13.65、47.35、21.22 μmol/g和76.93 μmol/g。这可能是因为引入了大量酚羟基，通过TP与OVA的相互作用，OVA的DPPH自由基清除率得到了明显改善。相反，在不存在TP的情况下，通过加入IN，OVA的抗氧化活性略有提高。在ABTS阳离子自由基清除率和ORAC分析中也观察到了相似的结果，表明添加TP可显著提高OVA的抗氧化活性（P＜0.05），且以OVA-IN-TP为壁材的微胶囊表现出最高的抗氧化活性。

表4 IN和TP对石榴籽油微胶囊抗氧化活性的影响Table 4 Antioxidant activity of pomegranate seed oil microcapsules with different wall materials

2.4 石榴籽油微胶囊贮藏稳定性

2.4.1 光照的影响

由图4可知，以OVA为壁材的石榴籽油微胶囊在光照和黑暗条件下分别贮藏30 d后的脂质过氧化氢含量分别为（37.54±1.26）、（31.24±1.26）mmol/kg，表明光照可加快石榴籽油的氧化劣变。相比之下，以OVA-IN-TP为壁材微胶囊在光照条件下30 d的脂质过氧化氢含量最低（12.86±1.30）mmol/kg，氧化速率最慢，此规律与抗氧化能力变化一致，表明抑制脂质氧化与抗氧化能力之间存在良好的相关性。

图4 不同壁材的石榴籽油微胶囊在光照（A）、黑暗（B）条件贮藏30 d脂质过氧化氢含量的变化Fig. 4 Formation of lipid hydrogen peroxide in pomegranate seed oil microcapsules with different wall materials stored in light (A) or dark (B)conditions for 30 days

2.4.2 温度的影响

图5 不同壁材的石榴籽油微胶囊在4（A）、25（B）、40（C）℃条件贮藏30 d脂质过氧化氢含量的变化Fig. 5 Formation of lipid hydrogen peroxide in pomegranate seed oil microcapsules with different wall materials stored at 4 (A), 25 (B) or 40 (C) ℃ for 30 days

如图5所示，随着贮藏温度上升，石榴籽油微胶囊的贮藏稳定性下降，但是在相同温度条件下，以OVA-IN-TP为壁材的微胶囊稳定性最强，即在4 ℃和25 ℃贮藏30 d后，以OVA-IN-TP为壁材的微胶囊脂质过氧化氢含量分别为（8.60±0.97）、（11.31±2.13）mmol/kg，而在40 ℃贮藏30 d后，脂质过氧化氢含量大幅增加，达到（14.21±2.13）mmol/kg。这是因为石榴籽油是易被氧化的物质，随着温度的升高，氧气的蒸气压增大，导致囊壁内外形成较大压力差，促进了氧气的扩散，因此石榴籽油微胶囊脂质过氧化氢含量增加[29]。

2.4.3 相对湿度的影响

图6 不同壁材石榴籽油微胶囊在33%（A）、58%（B）、80%（C）相对湿度条件下贮藏30 d脂质过氧化氢含量的变化Fig. 6 Formation of lipid hydrogen peroxide in pom egranate seed oil microcapsules with different wall materials stored under 33% (A), 58% (B)or 80% (C) humidity for 30 days

如图6所示，在相对湿度较低环境（33%、58%）下，30 d后以OVA-IN-TP为壁材微胶囊的脂质过氧化氢含量分别为（11.32±1.30）、（14.21±2.13）mmol/kg，而当相对湿度为8 0%时，脂质过氧化氢含量为（19.71±2.13）mmol/kg。在高湿度环境下微胶囊稳定性下降，这可能是由于微胶囊囊壁的渗透性、溶胀度和机械强度等发生了变化，微胶囊颗粒的水分含量增加导致的微生物生长，氧气的扩散导致的芯材的氧化，都加剧了微胶囊的破坏程度[30]。

3 结 论

本实验分析探讨了以OVA-IN-TP为壁材的微胶囊对石榴籽油稳定性的影响，结果表明，添加IN和TP的石榴籽油乳液粒径小且均一，表观黏度增加；25 ℃贮藏3 d，无乳析现象，粒径和微观结构无变化；喷雾干燥得到微胶囊，表面光滑平整，无凹陷、孔洞等，水分质量分数为5.18%、堆密度为0.42 g/mL、溶解性为45.61%、休止角为36.5°，对石榴籽油的包封率高达94.52%；贮藏稳定性实验结果表明，同时添加IN和TP，石榴籽油微胶囊抗氧化能力提升，对光照、温度、湿度等极端环境抗性增强。由此可知，以OVA-IN-TP为壁材的微胶囊可显著延缓石榴籽油氧化。本研究为富含不饱和脂肪酸的石榴籽油的开发利用提供了一种有效方法。