吉西他滨联合顺铂对kaiso蛋白浆表达的NSCLC患者疗效变化及血清CEA、CY211水平的影响

张蕊 邹勤光 赵晖 贾春祎 孙少林 曲明江 张立新 张晓凯 赵鑫 王启文 王宝

(吉林省肿瘤医院 1内一科，吉林 长春 130062；2胸外二科)

kaiso是一种转录抑制因子〔1〕。研究表明kaiso存在核浆穿梭现象，并可以通过抑制Wnt信号通路的靶基因抑制肺癌细胞的增殖、侵袭及转移〔2,3〕。kaiso蛋白发现在多种实体恶性肿瘤中表达，但目前化疗药物对kaiso蛋白异位表达的非小细胞肺癌(NSCLC)患者的治疗效果研究很少，本文旨在研究采用吉西他滨联合顺铂对kaiso蛋白浆表达的NSCLC患者进行治疗，考察患者的生存质量及治疗前后对血清癌胚抗原(CEA)、骨胶素(CY211)的影响。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016年6月至2019年6月吉林省肿瘤医院胸外科手术切除，病理结果证明肺癌的存档蜡块标本160例，免疫组化法判定出kaiso蛋白浆表达阳性组为实验组，呈阴性的为对照组。患者术前均没有接受放化疗或其他肿瘤针对性的治疗，其中男89例，女71例；年龄60～84岁，中位年龄69岁。术后根据国际抗癌联盟(UICC)制定的第7版TNM分期标准进行手术分期〔4〕。对照组50例，鳞癌32例；其中Ⅲ期26例，Ⅳ期6例；腺癌18例，Ⅲ期15例，Ⅳ期3例。观察组110例，鳞癌59例，其中Ⅲ期49例，Ⅳ期10例；腺癌51例，其中Ⅲ期40例，Ⅳ期11例。所有标本被切除离体后冷冻保存，使用和采集均获得患者本人同意并由吉林省肿瘤医院伦理委员会批准。

1.2免疫组化法及结果的判定 将标本制作成4 μm厚的切片，常规免疫组化S-P 法染色，检测kaiso蛋白表达，稀释浓度1∶40，同时用0.01 mol/L、pH7.4 的磷酸盐缓冲液代替一抗作阴性对照。kaiso 蛋白鼠抗人单克隆抗体购于美国BD 公司，S-P免疫组化试剂盒购于福州迈新公司。

结果判定:选肿瘤细胞阳性染色集中区域，每张切片计数高倍视野(×400)下400个肿瘤细胞，按kaiso表达百分率分为4个等级:<25%为0分，26%～50%为1 分，51%～75%为2分，>75%为3分。根据免疫组化染色强度分为3 个等级:浅黄色计1分，棕黄色计2分，黄褐色计3分。以阳性细胞率和染色强度的分值乘积作为每例标本的积分。积分为0分与1分计为阴性表达，≥2 分为阳性表达。

1.3治疗方法 所有患者采用吉西他滨联合顺铂，吉西他滨1 250 mg/m2(江苏豪森药业)第1天和第8天用药;顺铂25 mg/m2(齐鲁制药有限公司)第1～3天静脉滴注，3 w为1个周期，治疗2个周期及以上。用药期间密切检测患者的不良反应，如发生严重不良反应及时停药。

1.4观察指标及评定方法 ①治疗结束后观察两组临床疗效，完全缓解(CR)：肿瘤病灶消失无新病灶出现，至少维持30 d；部分缓解(PR)：肿瘤体积增大或缩小≥30%，至少维持30 d；疾病稳定(SD):肿瘤体积直径缩小或增大25%，至少维持30 d;疾病进展(PD):肿瘤体积增大20%或出现新病灶。总有效率=(CR+PR)/总例数〔5〕，稳定率=(CR+PR+SD)/总例数。②所有患者治疗前及治疗2个周期后，空腹抽取静脉血3 ml，离心取上清液，酶联免疫吸附试验测定血清肿瘤标志物CEA、CY211水平。

1.5统计学分析 采用SPSS17.0软件进行χ2检验、t检验。

2 结 果

2.1kaiso蛋白在NSCLC患者中表达阳性率的判定 kaiso蛋白被染色后在细胞质中呈现粗细不均匀的浅黄至棕褐色颗粒，根据判定标准，160例NSCLC患者标本中kaiso阳性表达率为68.75%(110/160)，见图1。

2.2两组临床疗效比较 治疗后对照组有效率高于观察组，差异有统计学意义(χ2=4.51，P<0.05)。对照组稳定率高于观察组，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.3不同病理组化疗前后血清CEA、CY211水平比较 化疗前，两组腺癌、鳞癌血清中CEA、CY211水平无明显差异(P>0.05)，化疗后，均显著降低(P<0.05)。治疗前后腺癌和鳞癌血清CEA、CY211水平差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表1 两组临床疗效对比(n)

表2 不同病理组化疗前后血清CEA、CY211水平变化

2.4不同分期化疗前后血清CEA、CY211水平比较 化疗前，Ⅲ期对照组和观察组血清CEA、CY211水平差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅳ期观察组与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。化疗后，Ⅲ期、Ⅳ期观察组与对照组比较血清CEA、CY211水平差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 不同分期化疗前后血清CEA、CY211水平比较

3 讨 论

目前对kaiso蛋白在NSCLC方面研究甚少，化疗药物对其治疗进程的影响研究也少有报道。但已经证实kaiso蛋白拥有双重DNA绑定识别转录抑制因子，且与众多肿瘤相关基因启动因子有关，参与Wnt/β-catenin通路调节，与恶性肿瘤的发生发展有关〔4～7〕。Dai等〔6〕研究发现，kaiso蛋白在肺癌细胞质中呈现63.61%较高表达，在TNM高分期及淋巴转移的癌细胞中阳性率更高，增强了肺癌细胞增殖和侵袭能力，还发现kaiso蛋白细胞核表达癌细胞在生物学功能上与细胞质表达发挥相反的作用。梁键等〔7〕研究发现,p120可能与kaiso蛋白共同异位表达在细胞质中，且通过kaiso蛋白解除靶基因的抑制作用，从而促进matrilysin的表达参与肺癌的发生进程。

本研究结果说明kaiso蛋白阳性表达组的患者对治疗后效果较差，且kaiso蛋白的细胞质是否阳性表达在不同肺癌病理条件下，对血清CEA、CY211没有明显影响。与王宝等〔8〕研究结果相一致。本研究结果还说明kaiso蛋白细胞浆的阳性表达影响了患者对化疗药物的作用，可能降低了患者对化疗药物的敏感性，降低了化疗药物的有效性。

综上，吉西他滨联合顺铂对kaiso蛋白浆表达的NSCLC患者，治疗后kaiso蛋白细胞浆阳性表达的患者治疗效果降低，病理类型对治疗前后血清中CEA、CY211水平基本没有影响，但在病理分期中，对Ⅳ期患者影响较大，降低了患者对药物的敏感性及治愈率，但其他治疗方案对其影响是否一致，仍需要继续研究。