肠道病毒核酸与抗体联合检测在手足口病诊断中的应用价值

高建民

（辽宁省朝阳市疾病预防控制中心微生物检测所，辽宁 朝阳 122000）

手足口病是一种常见于儿童的传染性疾病，患儿的主要症状为发热、口腔及四肢疱疹等，具有自限性且患儿的预后较少，但也有部分患儿并发脑炎、肺水肿等并发症，进展速度快且病死率高，对患儿的生命安全造成了较大的威胁[1]。该病一年四季均可发生，且在学校、托儿所等场所容易爆发。该病的病原体为肠道病毒，具有较高的传染性，其主要是通过粪口传播，传播速度快且控制难度大，容易在短时间内出现大范围流行的情况[2]。尽早治疗对于改善手足口病患儿的预后情况具有重要的现实意义，但是从目前现状来看，由于多数手足口病患儿的症状较轻且症状不典型，临床诊断中存在较大的困难，因此通过实验室检查鉴别诊断手足口病具有重要的现实意义[3]。目前对于该病临床实验室诊断主要是通过肠道病毒核酸检查以及抗体检查实现，文章主要通过比较单独肠道病毒核酸检查以及单独抗体检查与这两种方法的联合检查的结果，分析不同检查方法的诊断价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年1月至2020年6月我院收治的200例手足口病患儿，入选患儿均符合卫生部门发布的《手足口病诊疗指南》中的诊断标准。200例患儿中，男性109例，女性91例，平均年龄（5.62±1.10）岁，临床症状有发热、疱疹、食欲缺乏。

1.2 方法 所有患儿均行肠道病毒核酸检测以及抗体检测。肠道病毒核酸检测的具体方法：入院时采集患儿的粪便样本，采集后放置于4 ℃冰箱中，并在48 h内送检。本次研究使用北京中海生物科技有限公司生产的EV71-RNA检测试剂盒以及CA16-RNA检测试剂盒，严格按照试剂盒说明书进行操作。抗体检测的具体方法：清晨空腹采集3 mL肘静脉血，以2500 r/min速率离心10 min，采集血清样本并放置于-20 ℃冰箱中待检。使用上海生物制品研究所生产的EV71-IgM抗体试剂盒以及CA16-IgM抗体试剂盒进行检测，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.3 观察指标 比较单独肠道病毒核酸检测、抗体检测以及肠道病毒核酸联合抗体检测的结果。并对两种检测方法的检测结果进行一致性分析，观察肠道病毒核酸检测与抗体检测的吻合程度。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件对本文数据进行统计学分析，检测阳性率等计数资料采用率（%）表示，组间比较行χ2检验；肠道病毒核酸与抗体检测的一致性采用Kappa检验。以P＜0.05时为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三种检测方法的检测结果比较 200例患儿行肠道病毒核酸检测的阳性率为73.0%，行抗体检测的阳性率为72.0%，两种检测方法检测阳性率比较差异无统计学意义（P＞0.05）；肠道病毒核酸联合抗体检测的阳性率为93.0%，明显高于单独肠道病毒核酸检测以及单独抗体检测（P＜0.05）。见表1。

表1 三种方法的检测结果比较

2.2 肠道病毒核酸与抗体检测的一致性分析 通过肠道病毒核酸与抗体检测的一致性分析，Kappa=0.935，P＜0.05，提示肠道病毒核酸与抗体检测具有较高的吻合性。

3 讨 论

手足口病是儿科常见的传染病，临床最常见的病原体为EV71、CA16，常见于5岁以下儿童，主要症状为手、足、口等部位出现丘疹，多数患儿的症状较轻，1周内可痊愈，但也有部分患儿并发脑炎、肺水肿等并发症，导致患儿死亡，尤其是婴幼儿，因此需要尽早给予诊断和治疗，改善重症手足口病患儿的预后情况[4]。

临床研究指出重型手足口病常见于3岁以下儿童，本次研究中200例患儿中仅有22例重症患儿，年龄为6个月～4岁，平均年龄为（2.01±0.42）岁，所占比例为11.00%，由此可见重型手足口病患儿常见于婴幼儿，可能是由于婴幼儿免疫功能发育不成熟，是手足口病的高风险人群，因此需要加强婴幼儿的卫生管理，尤其是托儿所、幼儿园的卫生管理[5]。本次研究中200例患儿均出现不同程度的皮疹，由此可见皮疹是该病的常见症状。在临床诊断过程中，需要仔细查看患儿的临床症状，做好其他疾病引起皮疹的鉴别诊断。临床有研究指出，部分手足口病患儿无皮疹或皮疹在疾病中后期阶段发生，因此容易出现误诊漏诊的情况[6]。因此，在临床诊断中需要仔细分析患儿的病情状况，尽早进行病原体检测，从而诊断患儿的疾病，尽早治疗。

引起手足口病的肠道病毒有很多，其中以EV71与CA16型在临床中的检出率最高，两种病原体均为肠道病毒属成员，其中EV71型感染容易引起重症手足口病，也是造成患儿死亡的重要原因[7]。肠道病毒可通过多种途径传播，且具有较高的传染性。但是临床诊断中需要注意的是，虽然手足口病的临床症状相似，但是引发手足口病的病原体不同，治疗方法也存在着一定的差异，因此通过实验室检查确定病原体对于临床诊断与治疗具有重要的现实意义[8]。

传统病原学检查采用的是病毒培养分离鉴定的方法，也是临床诊断的金标准，但是该方法耗时长且对实验室环境以及检测技术要求较高，无法在基层推广使用。目前临床诊断手足口病常用的实验室方法为肠道病毒核酸检测、抗体检测、免疫组化检测等方法，其中以肠道病毒核酸检测、抗体检测在临床中的应用范围较广，具有操作简单、经济实惠的优势。

肠道病毒核酸检测是一种通过检测采集样本中是否存在外来病毒核酸从而确定是否存在病毒感染的检测方法。若检测结果为阳性，则可以证明患者存在病毒感染[9]。本次研究中病毒核酸检测使用的是逆转录聚合酶链式反应法，样本的采集、保存及转运、样本核酸的提取和检测、结果的判读均须严格按照试剂盒说明书要求进行，能够获得比较合理的检测结果。抗体检测主要是观察人体免疫应答状况，也是临床诊断的常用方法，如一些自体免疫性疾病，其发生与自身免疫相关，可以检测到自身抗体的升高；同时，在免疫缺陷病、免疫增生病以及病毒感染等疾病诊断中具有较好的应用效果。雷锦辉和况群芳[10]通过研究发现，肠道病毒核酸检测与抗体检测的诊断符合率比较差异无统计学意义（P＞0.05），但联合检测的诊断符合率明显高于肠道病毒核酸检测与抗体检测（P＜0.05），由此可见肠道病毒核酸检测与抗体检测联合检测在手足口病患者病原学快速诊断方法中的应用效果优于肠道病毒核酸检测与抗体检测，这与本次研究结果存在一致性。本次研究中200例患儿行肠道病毒核酸检测的阳性率为73.00%，行抗体检测的阳性率为72.00%，两种检测方法的阳性率比较差异无统计学意义（P＞0.05），这说明肠道病毒核酸与抗体检测在手足口病临床诊断中的检出率相当，均有相似的诊断价值；而本次研究中的肠道病毒核酸与抗体检测联合检测的阳性率为93.00%，明显高于单独肠道病毒核酸检测以及单独抗体检测（P＜0.05），由此可见肠道病毒核酸与抗体检测的联合检测相比于单独肠道病毒核酸与单独抗体检测来说，能够进一步提升手足口病的临床检出率，从而尽早发现和治疗。本次研究通过肠道病毒核酸与抗体检测的一致性分析，Kappa=0.935，P＜0.05，提示肠道病毒核酸与抗体检测具有较高的吻合性，由此可见肠道病毒核酸与抗体检测能够联合检测，不会影响检测结果的准确性。

综上所述，手足口病是一种常见的传染病，多发于儿童，传播途径复杂，传播性较强，属于丙类传染病，若出现大范围流行可导致患儿的身体健康受到影响，为了进一步降低该病的发生率和病死率，需要尽早诊断和治疗。病原学检查在该病临床诊断中具有重要的作用，本次研究通过观察发现，肠道病毒核酸与抗体检测在手足口病临床诊断中均有着较好的应用效果，通过联合检测的方式能够进一步提高手足口病的检出率，从而减少漏诊情况。