微波-LDP 免疫组化技术在肿瘤病理快速诊断中的应用

朱姝美

（常州市溧阳市中医医院病理科 江苏 常州 213300）

近年来全球恶性肿瘤发病率以每年4%的速度快速增长，常见肿瘤类型包括肺癌、乳腺癌、前列腺癌等[1]。随着国民生活方式的转变和生活节奏的加快，国内肿瘤病死率较高，严重威胁国民的身体健康[2]。临床中早期检出、及时治疗是改善肿瘤患者预后的关键[3]。常规X 线、CT 等影像学检查手段尽管能够为医师判断肿瘤病例提供参考依据，但容易出现漏诊、误诊情况。为了探讨更加高效、准确的检查方法，本文现就微波-标记葡聚糖聚合法（LDP）免疫组化技术在肿瘤病理快速诊断中的应用价值进行了探索。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取医院2017 年7 月—2019 年7 月收治的肿瘤患者84 例。患者男45 例，女39 例；年龄37 ～75 岁，平均（46.49±1.37）岁。患者均获知情权。使用材料包括德国Zeiss Libra 120透射电镜；广州万孚生物有限公司提供的单（多）克隆抗体；DAKO 公司提供的第二抗体EnVision；上海佑科XSP-1CA 显微镜；浙江临安电子器材厂提供的YWY78IA 型医用微波炉。

1.2 方法

全部患者均行微波-LDP 免疫组化技术检验：①冰冻切片，经PBS 洗30s×2 次；②视一抗状态对于消化处理切片，应置入湿盒内使用胰蛋白酶，经微波炉低档作用60s；对于需进行抗原修复的切片使用微波高档煮沸后，再调整为低档，作用10min，均使用蒸馏水洗、PBS 洗30s×2 次；③在3%双氧水湿盒中微波低档作用60s，消除其中的内源性过氧化物酶，再PBS 洗30s×2次；④滴入一抗，置入湿盒中，微波低档60s，PBS 洗30s×2 次；⑤滴入二抗，置入湿盒中微波低档60s，PBS 洗30s×2 次；⑥常规显色、水洗，使用HE 染色，脱水、封片。免疫组化阳性标准：根据染色强度（光镜分析结果）和阳性细胞数目（切片中显色肿瘤细胞在全部肿瘤细胞中的占比评分）结果判定阳性：①阳性细胞数目：＞75%记3 分，30 ～75%记2 分，30%以下记1 分；②染色强度：细胞无色记0 分，浅黄色记1 分，棕黄色记2 分，棕褐色记3 分，积分=①×②，按照积分高低评价：阴性（-）（积分0 分）；弱阳性（+）（积分1 ～2 分）；中度阳性（++）（积分3 ～4 分），强阳性（+++）（积分＞4 分），阴性包括(-)、（+），阳性包括(++)、（+++）[5]。

1.3 观察指标

以病理电镜观察、组织学观察结果为金标准，分析微波-LDP 免疫组化技术诊断肿瘤患者的结果，评价该种检验技术诊断恶性肿瘤患者的效能。

1.4 统计学方法

采用统计学软件SPSS23.0 处理数据，以χ2检验计数资料（%，n），P＜0.05，表示有统计学意义。

2.结果

2.1 微波-LDP 免疫组化技术诊断肿瘤的结果与金标准对比

由金标准可知，84 例肿瘤患者中良性31 例，恶性53 例，以此为参照，采用微波-LDP 免疫组化技术诊断恶性肿瘤的结果详见表1。

表1 微波-LDP 免疫组化技术诊断肿瘤的结果与金标准对比（n）

2.2 微波-LDP 免疫组化技术诊断恶性肿瘤的效能评价

由2.1 的结果可知，微波-LDP 免疫组化技术诊断恶性肿瘤的灵敏度、特异度、准确度、漏诊率和误诊率，详见表2，其中诊断准确度与金标准比较（χ2=2.304，P=0.128）无显著差异。

表2 微波-LDP 免疫组化技术诊断恶性肿瘤的效能评价

3.讨论

病理技术作为诊断肿瘤的有效手段，在基层医院得到了广泛应用。但一般免疫组化技术存在耗时长、步骤多、灵敏度低等缺陷，影响了诊断结果的可靠性[4]。随着医学技术的不断发展，微波-LDP 免疫组化技术成为了临床常用的病理检查手段[5]。本次研究结果显示，微波-LDP 免疫组化技术诊断恶性肿瘤漏诊率（5.66%）、误诊率（3.23%）较低，特异度（96.77%）、灵敏度（94.34%）和准确度（95.24%）较高，说明该种检验方法在肿瘤病理诊断中具有较高的诊断效能，可为医师鉴别恶性肿瘤患者提供重要的参考依据。分析后可知，一般免免疫组化技术操作环节繁琐，无法及时获取检测结果。而微波-LDP 免疫组化技术中的二抗可将特异性抗体与辣根过氧化物酶在葡聚糖聚合物上相结合，且葡聚糖分子较大，各骨架能够与100 个酶分子、20 个抗体分子进行结合，提高显色效果，改善漏诊情况，有效提高了肿瘤病理检验的灵敏度。且在实际操作中无需阻断其中的内源性生物素，省略了血清封闭环节，从而缩短了切片染色时间，提升了检验效率。同时将微波技术应用于LDP 免疫组化检验中，能够在高频电磁场中提高抗原抗体的作用面积，加快反应速度，促进快速孵育，将反应时间由原本的75min 压缩至20min 以内，并能够减少非特异性染色反应，改善了误诊情况，实现了快速、准确诊断的检验效果。

综上所述，采用微波-LDP 免疫组化技术诊断肿瘤能够为医师判断良恶性病例提供有力参照，准确检出恶性肿瘤患者，诊断效能较高，具有重要的应用价值。