HR-HPV E6/E7 mRNA检查在宫颈癌筛查中的应用价值

蒋瑜，徐宝琳，周虹

江西省景德镇市第二人民医院 (江西景德镇 333000)

宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤，也是目前世界上第一个明确病因的恶性肿瘤。大量研究表明，其发病的主要原因是高危型人乳头瘤病毒(high risk human papillonmavirus，HR-HPV)的持续性感染，约95%以上的宫颈癌组织中检测到人乳头瘤病毒[1]。薄层细胞学检查(thinprep cytologic test ，TCT)联合HPV-DNA分型检查用于宫颈病变的筛查，可降低宫颈癌的发生率。但是，HPV-DNA分型检查宫颈癌前病变及宫颈癌的灵敏度高，特异度低[2]，TCT的特异度高，但阳性预测值低，易漏诊，对宫颈病变的进展不能进行有效的评估，而且一段时间内的反复检查，会给患者带来经济上的负担。近年来，HR-HPV E6/E7 mRNA检查在临床逐渐引起关注。本研究探讨HR-HPV E6/E7 mRNA检查在宫颈癌筛查中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年11月至2019年11月于我院门诊行宫颈HPV-DNA分型检查及TCT中疑似宫颈病变需转诊阴道镜的患者386例，年龄22～69岁，行阴道镜下组织病理活检的同时行HR-HPV E6/E7 mRNA检查，既往无宫颈上皮内病变史或免疫抑制剂使用史，均自愿进行筛查。本研究经医院医学伦理委员会审核批准。

1.2 方法

(1)TCT：使用ThinPrep全自动超薄液基细胞学检查系统，由专业妇科病理医师进行细胞学诊断，结果判定参照2001 Bethesda系统分类标准。(2)HPV-DNA分型检查：使用凯普公司提供的导流杂交HPV-DNA分型检查法(HybriMax)，检查14种HR-HPV(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，66和68)。(3)HR-HPV E6/E7 mRNA检查：使用河南科蒂亚生物技术公司生产的HPV E6/E7 mRNA检查试剂盒，针对14种HR-HPV(HPVl6，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，66和68)的E6/E7致癌基因片段mRNA。(4)病理学检查：TCT≥非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cells of undetermined significance，ASCUS)、HPV高危型阳性或HPV 16/18阳性的患者行阴道镜检查，由有经验的临床医师在阴道镜下对宫颈可疑病变部位进行组织学活检和宫颈管搔刮，病理学结果由2位专业的病理专家进行诊断，诊断标准参照世界卫生组织分类标准执行。

1.3 临床评价

分析3种筛查手段与病理活检结果[宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)]的关系；比较3种筛查手段检查宫颈病变≥CINⅡ级的诊断效能。1.4统计学处理

采用SPSS 20.0统计软件进行数据处理，计数资料以率表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3种筛查手段与病理活检的关系

386例患者中，病理活检确诊宫颈炎165例(42.7%)，CINⅠ级97例(25.1%)≥CINⅡ级，124 例(32.1%)；HR-HPV E6/E7 mRNA检查阳性175例(45.3%)，阴性211例(54.7%)；HPV-DNA分型检查阳性329 例(85.2%)，阴性57例(14.8%)；TCT阳性278例(72.0%)，阴性108例(28.0%)，见表1。

表1 3种不同筛查手段的检查结果[例(%)]

2.2 3种方法检查宫颈病变≥CINⅡ级的诊断效能比较

HR-HPV E6/E7 mRNA检查、HPV-DNA分型检查和TCT宫颈病变≥CINⅡ级的灵敏度分别为86.3%、92.7%、82.3%，特异度分别为74.0%、18.3%、32.8%，阳性预测值分别为61.1%、35.0%、36.7%，阴性预测值分别为91.9%、84.2%、79.6%；HR-HPV E6/E7 mRNA检查的灵敏度低于HPV-DNA分型检查，差异有统计学意义(P<0.05)；HR-HPV E6/E7 mRNA检查的特异度、阳性预测值、阴性预测值均高于HPV-DNA分型检查和TCT，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 3种筛查方法检查宫颈病变≥CINⅡ级的结果比较(例)

3 讨论

慢性持续HR-HPV感染是宫颈癌发生的主要诱因，但HPV感染多为一过性、无明显临床症状，感染率及自然清除率均较高，导致检查结果假阳性高，影响临床判断[3]。近年来，有研究证实，HR-HPV的致癌风险取决于癌基因E6/E7mRNA的表达[4-5]。当持续性HR-HPV感染时，DNA整合入宿主的基因组，E6/E7 mRNA被宿主细胞转录，导致大量的E6/E7癌蛋白表达，细胞周期调控异常，从而诱发细胞高级别病变乃至癌变[6-8]。与HPV-DNA检查相比，HR-HPV E6/E7 mRNA检查判断HPV感染与预测病变进展的特异度更高[9]，为宫颈病变筛查提供更加有效的方法[10]。TCT在高级别宫颈病变中与组织病理学吻合度较高，但受制于病理医师专业水平不同，导致不同病理医师诊断结果差异较大[11]。

本研究结果显示，HR-HPV E6/E7 mRNA检查的灵敏度低于HPV-DNA分型检查，差异有统计学意义(P<0.05)；HR-HPV E6/E7 mRNA检查的特异度、阳性预测值、阴性预测值均高于HPV-DNA分型检查和TCT，差异有统计学意义(P<0.05)；提示HR-HPV E6/E7 mRNA检查可减少HPV一过性感染造成的假阳性，诊断效能优于HPV-DNA分型检查和TCT。单独行TCT及HPV-DNA分型检查均不利于子宫颈病变的精准筛查[12]，HR-HPV E6/E7 mRNA检查有着更高的特异度和阳性预测值，更加适合于宫颈病变的筛查。

综上所述，HR-HPV E6/E7 mRNA检查宫颈病变的总体诊断效能优于HPV-DNA分型检查和TCT，可减少HPV一过性感染造成的假阳性结果，减轻患者的心理压力，降低过度治疗带来的风险，实现灵敏度和特异度的较好平衡，还可作为宫颈病变或癌变初筛的更佳选择。