自然早产与足月分娩中胎盘Survivin表达量及妊娠时间的相关性研究

金亚玲　王祥珍

【摘要】 目的 探討自然早产与足月分娩中胎盘Survivin表达量与妊娠时间的相关性。方法 60例分娩产妇， 按照是否足月分娩分为早产组与足月产组， 每组30例。在产妇分娩后提取胎盘组织， 使用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）定量检测胎盘Survivin mRNA相对表达量， 比较两组胎盘组织中Survivin mRNA相对表达量， 分析Survivin mRNA相对表达量与妊娠时间的相关性。结果 早产组产妇胎盘组织中Survivin mRNA相对表达量（0.78±0.27）明显低于足月产组的（1.41±0.23）， 差异具有统计学意义（P<0.05）。经过相关性分析结果提示， 早产组产妇平均 Survivin mRNA相对表达量与妊娠时间呈线性正相关（r2=0.680， F=6.025， P<0.05）， 足月产组平均Survivin mRNA相对表达量与妊娠时间无线性相关性（r2=0.337， F=0.385， P>0.05）。结论 胎盘滋养细胞凋亡与早产有关， 而Survivin因子表达不足会使胎盘滋养细胞凋亡， Survivin表达量降低与早产的时间密切相关， 足月后Survivin表达量与妊娠时间无相关性。

【关键词】 早产;足月分娩;Survivin表达;相关性;胎盘组织

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.28.016

Study on the correlation between placental Survivin expression and gestational time between Spontaneous preterm delivery and full-term delivery   JIN Ya-ling， WANG Xiang-zhen. Obstetrics and Gynecology Department， Shenzhen Nanshan District Maternity and Child Health Hospital， Shenzhen 518067， China

【Abstract】 Objective   To discuss the correlation between placental Survivin expression and gestational time between spontaneous preterm delivery and full-term delivery. Methods  A total of 60 cases of delivery women were divided into preterm delivery group and full-term delivery group according to whether they delivered at full term， with 30 cases in each group. The placental tissue was extracted after the parturients gave birth， and the relative expression of Survivin mRNA in the placenta was quantitatively detected by reverse transcription-polymerase chain reaction （RT-PCR）， and the relative expression of Survivin mRNA in the placental tissues of the two groups was compared. The correlation between Survivin mRNA relative expression and gestational time was analyzed. Results   The expression of Survivin mRNA in the placenta （0.78±0.27） of preterm delivery group was obviously lower than （1.41±0.23） of full-term delivery group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The results of correlation analysis showed that the mean relative expression of Survivin mRNA

was positively correlated with gestational time in preterm delivery group （r2=0.680， F=6.025， P<0.05）， but there was no linear correlation between gestational time and mean survivin mRNA expression in term delivery group （r2=0.337， F=0.385， P>0.05）. Conclusion  The apoptosis of placental trophoblast is related to premature delivery， and insufficient expression of Survivin factor can cause placental trophoblast cell apoptosis. The decrease of Survivin expression is closely related to the time of preterm delivery， and there is no correlation between Survivin expression after full-term and pregnancy time.

【Key words】 Preterm labor; Full-term labor; Survivin expression; Correlation; Placental tissue

早产是产科面临的棘手问题， 且全球发病率逐年增加， 给提高孕产妇安全带来了极大的挑战。导致早产的因素众多， 主要包括胎盘因素和胎盘外因素。胎盘因素包括胎膜早破、双胎及多胎、前置胎盘、胎盘早剥等， 胎盘外因素包括妊娠期高血压综合征、妊娠合并症、妊娠期糖尿病或糖耐量异常[1]， 甚至孕妇微生态菌落均可影响分娩结局。目前， 主要研究更多关注在胎盘病变， 其中胎盘滋养细胞的异常发育是导致早产的重要原因。研究表明， 胎盘滋养细胞凋亡与早产有关， 其中胎盘滋养细胞Survivin因子表达不足所致的细胞过度凋亡可能是其引起胎盘功能低下的原因， 最终导致早产发生的重要机制[2]。尽管抗凋亡因子Survivin与早产关系密切， 但是否与早产分娩的时间有相关性尚未见相关报道。为此， 本研究选择本院的孕产妇为研究对象， 进一步分析Survivin表达量与妊娠时间的相关性， 现在报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2018年5月～2019年5月收治的60例分娩产妇， 年龄22～35岁， 妊娠时间28～42周， 本研究经本院医学伦理委员会审批。按照是否足月分娩分为早产组与足月产组， 每组30例。早产组产妇平均年龄（28.4±3.8）岁， 平均妊娠时间（32.7±3.2）周;足月产组产妇平均年龄（29.2±4.5）岁， 平均妊娠时间（39.2±2.2）周。两组年龄比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

纳入标准：①产婦均经过严格产检， 不具有妊娠高血压综合征;②无糖尿病、肝炎、甲状腺功能亢进（甲亢）、心脏病、肺结核、阴道炎等合并症;③无子宫占位性病变及子宫肌层、宫颈等异常发育;④精神无异常;⑤全部患者均自愿参与研究并签署知情同意书。

排除标准：①产妇产检过程有异常指标， 如胎儿窘迫、凝血异常等高风险并发症;②拒绝捐献胎盘进行医学研究;③有遗传学异常或家族性疾病史。

1. 2 方法 收集产妇妊娠时间。在产妇自然分娩出（或剖宫产娩出）胎盘后， 迅速在无菌条件下转移胎盘至冰块上， 提取胎盘母体面中央垂直位置至胎儿面， 约1 cm3 大小的组织， 放入-80℃液氮罐中速冻。取出标本冰上超声匀浆机研磨， 参照TRizol法提取总RNA， 用ddH2O稀释1 μl样品200倍后测定RNA浓度与纯度。引物由Primer软件设计、Takara公司合成， 参照反转录试剂盒自带实验流程建议说明， 选择42℃反转录50 min， 95℃ 5 min灭活反转录酶。使用ABI 7300 Real-Time PCR System进行Syber Green 荧光定量RT-PCR检测， 其反应体系为 SYBR Premix Ex Taq II（2X）12.5 μl、上下游引物各1 μl、cDNA 2 μl和dH2O 8.5 μl， 扩增条件为95℃预变性30 s;95℃变性5 s， 60℃退火30 s， 共40个循环。分析Survivin mRNA/ GADPH mRNA， 采用2-ΔΔCt法进行计算。本研究中的Survivin mRNA引物序列F-5′-GCAGGGGACAGGTGGGAAGT3′， R-5′GACTCCTGCCACTGGTTCATAC3′。GADPH mRNA引物序列F-5′CGGAGTCAACGGATTTGGTCGTAT 3′， R-5′AGCCTTCTCCATGGTGGTGAAGAC 3′。

1. 3 观察指标 比较两组胎盘组织中Survivin mRNA 相对表达量[Survivin mRNA（/GADPH）]， 分析Survivin mRNA相对表达量与妊娠时间的相关性。

1. 4 统计学方法 采用SPSS23.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验;相关性检验采用应用Spearman等级相关分析法。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组胎盘组织中Survivin mRNA相对表达量比较

早产组产妇胎盘组织中Survivin mRNA相对表达量（0.78±0.27）明显低于足月产组的（1.41±0.23）， 差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 2 Survivin mRNA相对表达量与妊娠时间的相关性分析 经过相关性分析结果提示， 早产组产妇平均 Survivin mRNA相对表达量与妊娠时间呈线性正相关（r2=0.680， F=6.025， P<0.05）， 足月产组平均Survivin mRNA相对表达量与妊娠时间无线性相关性（r2=0.337， F=0.385， P>0.05）。见表2。

3 讨论

早产主要是指母体妊娠时间8～37周就分娩， 是常见的妊娠并发症。主要临床表现为子宫收缩、阴道少量出血、羊水流出、持续性腰痛等症状， 给产妇的生命安全造成威胁。此外， 早产对新生儿的影响也较大， 容易使新生儿出现低体温、呼吸窘迫综合征、动脉导管闭合、脑出血、慢性肾病、肺功能障碍等并发症， 对新生儿的生命健康和发育影响较大， 导致新生儿的生存率下降， 致残率升高。有研究显示， 约15%早产的新生儿最终死亡[3]。目前， 早产的病因仍不是十分清楚， 但是可以由多因素导致。随着科技不断进步， 人们的生活条件有所改善， 许多不合理的饮食习惯和不良的生活习惯都会增加早产的风险， 如吸烟、饮酒等。在人们研究胎盘病变过程中， 发现胎盘滋养细胞的异常发育是导致早产的重要原因， 其中胎盘滋养细胞Survivin因子表达不足能够使细胞过度凋亡， 进而可以引起胎盘功能低下， 最终导致早产。Survivin是胚胎组织及肿瘤组织中发现的凋亡抑制新基因。可直接作用于Caspase-3和Caspase-7活性减轻细胞凋亡[4]， 也可参与调控周期蛋白激酶CDK4和CDK2相互作用阻断凋亡信号通路[5]。Survivin的表达对于妊娠的结局有着极为重要的调控效果。研究发现， 胎盘Survivin表达降低是导致妊娠期高血压尤其是重度子痫的关键原因， 也与反复性、复发性自然流产密切相关[6]。同时， 胎盘Survivin表达量与胎盘重量、新生儿体重也呈正相关[7]。然而， 胎盘的重量和成熟度关系密切。在自然早产患者中凋亡抑制因子Survivin的表达水平下降会促使细胞过度凋亡现象的发生， 致使胎盘功能下降， 不利于胎盘成熟[8]。王莉等[9]观察早产患者的胎盘滋养细胞发现， 其中Survivin表达量显著性下降， 从而导致滋养细胞侵袭不足、胎盘着床过浅， 进而发生早产[9， 10]。

本研究观察了不同孕周期（28～42周）产妇胎盘中Survivin mRNA相对表达量， 结果显示早产组产妇胎盘组织中Survivin mRNA相对表达量（0.78±0.27）明显低于足月产组的（1.41±0.23）， 差异具有统计学意义（P<0.05）。这与徐小华等[8]研究结果一致。同时， 本研究还发现， 在早产组产妇胎盘滋养细胞中Survivin mRNA相对表达量与妊娠时间成线性正相关， 这也进一步证实了Survivin在促进胎盘成熟中的作用。

综上所述， 早产是一项威胁产妇和新生儿生命健康的重要问题， 虽然病因尚未明确， 但可以发现许多诱发因素可以导致早产。通过不断研究发现， 胎盘滋养细胞凋亡与早产有关， 而Survivin因子表达不足会使胎盘滋养细胞凋亡， 进而使胎盘功能低下， 最终导致早产的发生。通过本次研究， 为以后临床研究相关内容提供依据。

参考文献

[1] 黄玉晶， 王灵巧， 兰兰， 等. 2005-2011年我国早产相关因素的Meta分析. 现代预防医学， 2014， 41（12）：2129-2133.

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[7] 李宗英， 赵得熊， 张海燕， 等. 高原地区妊娠期高血压产妇胎盘Stat3、Survivin及MMP-2的表达水平及意义. 中国现代医学杂志， 2019（14）：40-44.

[8] 徐小华， 郑双芸， 金亚玲， 等. 自然早产胎盘中细胞凋亡抑制因子survivin表达水平. 中国优生与遗传杂志， 2016（4）：28-30.

[9] 王莉， 李清雪， 宋春红， 等. Survivin、S100A12的表达与早产关系的研究. 中国计划生育和妇产科， 2016， 8（7）：9-11.

[10] 周杰， 孟静雯， 肖建平. 孕妇血清学标志物预测胎盘缺血性疾病的研究进展. 中国妇幼保健， 2018， 33（22）：5294-5297.

[收稿日期：2020-06-08]