玻璃酸钠滴眼液联合重组人表皮生长因子滴眼液改善老年白内障患者术后角膜损伤和修复角膜内皮细胞的研究

金潇，秦应祥，胥陶，李凯

1.重庆市第五人民医院眼科，重庆400062；2.重庆市第五人民医院药剂科，重庆400062；3.上海市第一人民医院宝山分院药剂科，上海200942

白内障在临床上比较常见，多发生于老年人群。白内障患者会出现泪液动力学异常，感觉到眼部有异物、眼部疲劳以及视物模糊，严重影响患者的日常生活，甚至可能导致失明，通常需要采取手术治疗[1]。手术会对患者造成一定的损伤，可损伤角膜内皮细胞，导致炎症反应，进而导致角膜知觉减退，泪膜稳定性下降，影响患者的手术效果。因此，通过观察炎症反应可以对患者的治疗效果进行评价[2]。在手术后，需要采用滴眼液对患者进行治疗，帮助改善患者眼部的炎症反应，修复损伤的角膜内皮细胞，减少并发症的发生，保证患者获得最佳的治疗效果[3]。玻璃酸钠是1 种优质的人工泪液，对眼球表面进行润滑，减少炎性介质，降低泪液渗透压，促进泪膜上皮的稳定结合[4]。但是，使用单一药物的治疗效果不理想，因此寻求联合使用药物进行治疗显得尤其重要。玻璃酸钠滴眼液和重组人表皮生长因子（rh-Epidermal growth factor，rhEGF）滴眼液广泛应用于治疗白内障术后干眼症，但是对角膜内皮细胞密度、六角形细胞比例和角膜内皮细胞变异系数的影响的研究不多。因此，本研究探讨玻璃酸钠联合重组人表皮生长因子（rh-Epidermal growth factor，rhEGF）滴眼液改善老年白内障患者的术后症状及对角膜内皮细胞修复的影响，为治疗老年白内障提供方法，具有一定的临床意义。

1 资料和方法

1.1 一般资料 选取2018年7月—2020年2月于重庆市第五人民医院收治的老年白内障术后患者100 例，随机分为观察组（=50）和对照组（=50）。观察组采取玻璃酸钠滴眼液联合rhEGF 滴眼液治疗，对照组采用玻璃酸钠滴眼液治疗。观察组患者男性27 例，女性23 例；年龄为62～78 岁，平均年龄为（67.4±4.6）岁。对照组患者男性26 例，女性24 例；年龄62～76岁，平均年龄（67.3±4.6）岁。2 组患者的年龄和性别差异无统计学意义，具有可比性（＞0.05）。

1.2 纳入和排除标准 纳入标准：（1）确诊为白内障，且进行过手术治疗；（2）了解本研究并签署知情同意书；（3）年龄＞60 岁；（4）术后角膜损伤。符合上述全部标准的病例纳入本研究。排除标准：（1）合并免疫系统疾病；（2）合并全身感染性疾病；（3）合并其他眼部疾病；（4）对本研究使用药物过敏。具备上述任意1 标准的病例不纳入本研究。重庆市第五人民医院伦理委员会批准进行本研究。

1.3 方法 对照组给予玻璃酸钠滴眼液（生产厂家为珠海联邦制药股份有限公司；批准文号为国药准字H20040352；规格为7 mL：7 mg），1 滴/次，4 次/d，观察组在与对照组相同治疗的基础上加用rhEGF滴眼液（生产厂家为桂林华诺威基因药业有限公司；批准文号为S20020016；规格为4 mL：4 万IU），1 滴/次，3 次/d。2 组均连续治疗3 个月。患者将药物带回家冰箱保存或者放在社区医院备用。

1.4 观察指标与方法 （1）疗效[5]：在治疗后对患者的治疗效果进行评价：裂隙灯检查显示角膜正常，角膜荧光着色明显减轻或者消失，且异物感、畏光和干涩等症状基本消失为显效；裂隙灯检查显示角膜有轻微的裂隙，角膜荧光着色明显减轻程度≥40%，且异物感、畏光和干涩等症状明显好转为有效；裂隙灯检查角膜没有好转，角膜荧光着色明显减轻程度＜40%，且异物感、畏光和干涩等症状没有改善为无效。计算总有效率，总有效率=（显效例数+有效例数）/总例数×100%。（2）角膜内皮细胞修复情况[6]：在治疗前后对患者的角膜内皮细胞变化情况进行评价。评价的指标包括角膜内皮细胞密度和六角形细胞比例。对中央区角膜内皮细胞进行计数，取角膜中央区100～150个细胞，计算六角形细胞的比例和角膜内皮细胞变异系数。通过对患者进行非接触式内皮镜检查，连续拍3 次照片，选择清晰照片进行图像分析，计算角膜内皮细胞密度、六角形细胞比例和角膜内皮细胞变异系数。（3）炎症反应：在治疗前后清晨，用毛细管法采集患者的泪液。患者多次瞬目以后，采用毛细管收集15l泪液，置于-80℃的环境保存。采用酶联免疫吸附法（ELISA）[7]对泪液中肿瘤坏死因子- （tumor necrosis factor- ，TNF- ）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）和白介素-1（interleukin-1 ，IL-1 ）进行检测。ELISA 试剂盒由上海索莱宝生物科技有限公司提供。

1.5 统计学分析 采用统计学软件SPSS 23.0 对数据进行分析。符合正态分布的计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用独立样本 检验；计数资料以例数和百分率表示，采用检验。＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2 组患者的治疗效果比较 观察组治疗总有效率明显高于对照组（＜0.05）。见表1。

2.2 2 组患者治疗前后的角膜内皮细胞变化差异比较治疗前，2 组患者角膜内皮细胞密度、六角形细胞比例和角膜内皮细胞变异系数差异无统计学意义（＞0.05）。治疗后，2 组角膜内皮细胞密度和六角形细胞比例均明显高于同组治疗前，2 组角膜内皮细胞变异系数均明显低于同组治疗前，差异均有统计学意义（＜0.05）；观察组角膜内皮细胞密度和六角形细胞比例均明显高于对照组，而角膜内皮细胞变异系数明显低于对照组，差异均有统计学意义（＜0.05）。见表2。

2.3 2 组患者治疗前后泪液中炎症细胞因子水平差异比较 治疗前，2 组患者泪液中IL-6、TNF- 和IL-1水平差异均无统计学意义（＞0.05）。治疗后，2 组泪液中IL-6、TNF- 和IL-1 水平均明显低于同组治疗前，而观察组泪液中IL-6、TNF- 和IL-1 水平均明显低于对照组，差异均有统计学意义（＜0.05）。结果提示观察组炎症反应比对照组改善更明显。见表3。

3 讨论

近年来，白内障的发病率在不断的升高，发病以后患者的视力会严重下降，影响患者的正常生活和工作[8]。治疗白内障主要是采用手术的方式，治疗效果明显，可有效地提高患者的视力。然而，在白内障术后，需要采用有效的药物帮助修复角膜内皮细胞损伤，减轻炎症反应，改善临床症状。玻璃酸钠滴眼液的亲水性好，是1 种在玻璃体和房水中含量较多的多糖，能促进纤连蛋白释放，加快角膜上皮细胞的增生，具有很好的生物相容性，有效的保湿和润滑，改善干眼症状，修复受损角膜细胞[9-10]。rhEGF 滴眼液可以促进细胞分裂和增生，可与细胞上的重组人表皮生长因子受体进行结合，促进细胞内部级联反应，加快细胞代谢，促进角膜表皮细胞的增生，激活表皮细胞的修复功能，修复角膜损伤[11]。玻璃酸钠滴眼液联合rhEGF滴眼液可帮助有效修复角膜内皮细胞，协同提高疗效。

本研究主要玻璃酸钠滴眼液联合rhEGF滴眼液对老年白内障患者的术后角膜损伤及对角膜内皮细胞修复的影响。结果表明，在治疗总有效率上，观察组明显高于对照组；治疗后，在角膜内皮细胞密度和六角形细胞比例上，观察组明显高于对照组，在角膜内皮细胞变异系数上，观察组明显低于对照组；治疗后，在IL-6、TNF- 以及IL-1 上，观察组明显低于对照组，说明玻璃酸钠滴眼液联合rhEGF 滴眼液可有效地提高治疗效果，修复角膜内皮细胞。玻璃酸钠滴眼液具有很好的亲水性，是1 种高分子多醣体生物材料；生物相容性好，增加药物的黏度，同时不会让眼睑不容易眨动。在使用玻璃酸钠滴眼液的时候，可以在角膜表皮形成一层膜，长期存在于眼表，药物可长时间有效地得到吸收，促进角膜细胞再生[12]。但是，由于长期使用玻璃酸钠滴眼液，会对眼表上皮产生不良反应，加重患者的干眼症症状，对角膜内皮细胞的修复效果不佳，影响炎症反应的控制效果。rhEGF 滴眼液具有很好的促进分裂的作用，其中的EGF 可与角膜缘干细胞膜上的EGF 受体进行结合，激活细胞，引起生化变化，促进蛋白质、DNA 和RNA 的合成，有效地促进细胞增殖和分化，加快角膜细胞的修复，增加角膜内皮细胞的密度，减少不规则细胞构型的出现，降低细胞的损伤程度[13]。治疗后，在IL-6、TNF- 以及IL-1 上，观察组明显低于对照组，说明璃酸钠滴眼液联合rhEGF 滴眼液还可降低炎症反应。TNF- 是1 种多向性细胞因子，可与内皮细胞结合，增加过氧化物阴离子的生成，导致中心粒细胞黏附，增加局部的炎症反应；TNF- 还可增加泪腺组织当中局部胶原酶，加重局部炎症反应。IL-6 是1 种调节炎症反应的细胞因子，对T 细胞和B 细胞进行调节，与TNF- 以及IL-1 协同发挥作用，对造血细胞的生长和分化进行调控。IL-1 可以抑制神经递质的释放，对泪液的分泌进行调控，减少泪液的分泌，导致出现干眼症，不利于角膜内皮细胞的修复。rhEGF 滴眼液可促进角膜基质增生，对上皮细胞进行修复，降低局部的炎症反应，减轻角膜损伤，加快角膜修复。璃酸钠滴眼液联合rhEGF 滴眼液可发挥协同作用，有效低促进角膜内皮细胞的修复，改善角膜损伤程度，降低角膜的炎症，促进患者视力的恢复。蒙青青等[14]研究显示，璃酸钠滴眼液联合rhEGF 滴眼液可有效地提高治疗效果，与本研究的结果一致。然而，本研究也存在一定的不足之处，如选取的样本量较少，研究时间比较短，后续的研究需要加大样本量，延长研究时间，完善本研究。

表1 2 组患者的治疗效果比较[（例）%]

表2 2 组患者治疗前后的角膜内皮细胞变化差异比较（±s）

表2 2 组患者治疗前后的角膜内皮细胞变化差异比较（±s）

注：与同组治疗前比较，△＜0.05；与对照组治疗后比较，▲＜0.05

组别 组别 角膜内皮细胞密度（个/mm2） 六角形细胞比例（%） 角膜内皮细胞变异系数对照组（ =50）观察组（ =50）治疗前治疗后治疗前治疗后2012.43±252.09 2287.62±249.47△2011.76±250.97 2591.46±251.17△▲30.48±5.37 36.72±5.41△30.53±5.40 42.56±5.22△▲36.75±2.78 33.09±3.01△36.23±2.60 30.76±2.44△▲

表3 2 组患者治疗前后泪液中炎症细胞因子水平差异比较（±s）

表3 2 组患者治疗前后泪液中炎症细胞因子水平差异比较（±s）

注：与同组治疗前比较，△＜0.05；与对照组治疗后比较，▲＜0.05

组别 时间 IL-6（pg/mL） TNF-（pg/mL） IL-1（ng/mL）对照组（ =50）观察组（ =50）治疗前治疗后治疗前治疗后1457.03±113.76 1286.29±110.09△1455.76±114.20 1120.68±107.47△▲267.53±51.07 230.55±31.27△266.54±50.42 197.56±34.52△▲127.52±25.38 76.57±12.74△127.40±24.63 45.28±10.09△▲

总之，玻璃酸钠滴眼液联合rhEGF 滴眼液对老年白内障术后患者的角膜损伤具有较好的改善作用，具有一定的的应用价值。