血清同型半胱氨酸和氢过氧化物检测在AD和VAD中的应用

李均锐,张 敏

广西壮族自治区南宁市社会福利医院，广西南宁 530003

阿尔茨海默病(AD)和血管性痴呆(VAD)是痴呆的两种常见类型，前者是由于神经退行性病变导致患者出现进行性记忆、言语障碍及人格改变，后者是由于脑血管病变导致患者出现执行、认知功能障碍，这两种疾病都会对患者的日常生活产生负面影响[1]。临床研究表明，AD和VAD虽然疾病种类不同，但二者发病机制有共性，心脑血管疾病的危险因素也成为AD的危险因素，AD的标志物淀粉样蛋白β同时也受到VAD的影响[2]。因此，以疾病发病特征作为AD和VAD的区分手段存在明显欠缺。调查报告显示，痴呆患者中AD占70%，VAD占20%，但仅有不到2%的患者能够得到及时有效的治疗[2-3]。究其原因，正是由于两种疾病未得到快速、有效区分，痴呆患者无法及时得到针对性治疗。基于此，为探讨AD和VAD患者的鉴别诊断手段，本研究选择性测定同型半胱氨酸和氢过氧化物水平，以期为二者的鉴别诊断提供新的参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择本院2018年2月至2019年2月住院治疗的61例AD患者(甲组)和41例VAD患者(乙组)为观察对象，另选取同期体检健康并经脑功能检查相关指标正常者50例纳入丙组。纳入标准：(1)甲组患者符合AD的诊断标准[4]，Hachinski缺血指数(HIS)<4分；(2)乙组患者符合VAD的诊断标准[4]，HIS>7分。排除标准：(1)近期服用过B族维生素及叶酸类药物；(2)存在肝肾等脏器功能障碍性疾病，免疫功能严重受损。甲组中男30例，女31例；年龄71～93岁，平均(83.35±5.2)岁；合并高血压者占62.78%，合并糖尿病者占17.63%。乙组中男22例，女19例；年龄69～94岁，平均(82.74±4.8)岁；合并高血压者占64.18%，合并糖尿病者占16.42%。丙组中男26例，女24例；年龄72～92岁，平均(83.14±4.2)岁。3组性别、年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经本院伦理委员会审核通过，所有研究对象及家属均知情同意。

1.2方法 清晨采集血液标本，采集标本前要求3组研究对象空腹12 h以上。对每例研究对象分别采集2管血液标本，每管3 mL，放入4 ℃环境中冷藏1 h，取出后以3 000 r/min离心提取血清。采用循环酶法检测同型半胱氨酸水平,检测试剂盒购自宁波美康生物科技股份有限公司；采用分光光度法检测氢过氧化物水平，检测试剂盒购自北京百奥莱博科技有限公司[5-6]。

2 结 果

2.13组检测结果比较 甲、乙组的同型半胱氨酸、氢过氧化物水平明显高于丙组，差异有统计学意义(P<0.05)；甲组同型半胱氨酸、氢过氧化物水平高于乙组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 3组检测结果比较

2.2ROC曲线分析 分别采用血清同型半胱氨酸、氢过氧化物单项及联合检测对AD和VAD进行鉴别诊断，曲线下面积(AUC)分别为0.744、0.805、0.816。见图1、表2。

图1 ROC曲线

表2 血清同型半胱氨酸和氢过氧化物单项及联合检测的诊断效能

3 讨 论

痴呆患者虽然意识清醒，但无法控制日常社会活动行为，随着病情加重，其意志、思维、行为，甚至整体观念和人格都将发生巨大变化，表现出生理功能缺陷[5]。AD和VAD的临床表现相似，AD患者会有VAD表现，而VAD患者也会出现AD症状。戴蓉芳等[9]在对氧化应激产物进行检测时发现，神经元所处的环境易被自由基破坏，致使神经元的正常作用机制遭到破坏，大脑损伤明显。AD患者淀粉样蛋白β在氧化应激作用下不断积累，可增加神经毒性，逐渐破坏血脑屏障，造成血管损伤。因此，本研究将氧化应激指标中的氢过氧化物和血清同型半胱氨酸作为检测指标，对以上两种疾病进行鉴别诊断。

氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用严重失衡的状态，往往由于中性粒细胞浸润，导致蛋白酶分泌加快，产生大量氧化中间产物，导致人体衰老或发生疾病。AD、VAD患者的检查结果显示，大量由氧化应激诱发的大脑损伤出现在死亡患者的大脑海马区域内，虽然目前并无明显证据表明氧化应激各指标水平和大脑记忆衰退具有直接因果联系，但可间接说明AD和VAD与氧化应激存在联系，测定氧化应激产物如同型半胱氨酸和氢过氧化物可作为AD和VAD临床诊断的参考依据[10-11]。同型半胱氨酸作为一种含硫氨基酸，只能由蛋氨酸分解而来，它既可以诱导血管平滑肌增生，致使动脉粥样硬化，也可通过抑制蛋白C活动机制从而降低血栓调节素表达，造成血小板高凝、聚集，引发动脉粥样硬化。

本研究检测了AD和VAD患者的同型半胱氨酸和氢过氧化物水平，并将其与体检健康者进行对比，发现3组研究对象的氧化应激指标均存在不同程度的差异：甲、乙组的同型半胱氨酸和氢过氧化物水平明显高于丙组(P<0.05)，表明AD、VAD患者血管内皮损伤明显，同时也证明检测同型半胱氨酸和氢过氧化物水平可对AD、VAD患者与健康人进行区分，这与吴佳慧等[12]研究结论一致。甲组同型半胱氨酸、氢过氧化物水平高于乙组，说明AD患者氧化应激程度更高。本研究分别采用血清同型半胱氨酸、氢过氧化物单项及两项指标联合检测对AD和VAD进行鉴别诊断，其灵敏度分别为0.738、0.885、0.852，特异度分别为0.732、0.683、0.732，约登指数分别为0.470、0.568、0.584，AUC分别为0.744、0.805、0.816。该结果表明，联合诊断的AUC最高，即说明血清同型半胱氨酸与氢过氧化物联合检测对AD和VAD的鉴别诊断价值最高。此外需要注意的是，老年痴呆患者大多合并糖尿病和高血压等多种基础疾病，这些基础疾病会对患者的氧化应激反应造成影响，同时也会对患者的认知水平造成影响，需将这些因素排除在外。本研究中，甲、乙两组合并基础疾病者的比例接近，排除了这一因素的干扰。

综上所述，血清同型半胱氨酸和氢过氧化物可通过对脑血管和脑神经元的损害造成不同程度的血脑屏障功能障碍。因此，可通过检测血清同型半胱氨酸和氢过氧化物水平对AD和VAD患者进行鉴别诊断。