红细胞参数和HbA2联合检测在新生儿珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的价值

张红霞，费安兴，李 胜

鄂东医疗集团黄石市妇幼保健院检验科，湖北黄石 435000

珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)是由于珠蛋白基因缺失或者点突变所致的遗传性进行性溶血性疾病，属于单基因常染色体隐性遗传病，主要分为α-地贫和β-地贫两种[1]。全世界约有1亿人携带地贫基因。由于地贫基因携带者的临床表现有很高的异质性，因此基因诊断是地贫确诊的金标准，但是直接进行基因诊断存在方法烦琐、对设备要求高、耗时长、费用昂贵及浪费医疗资源等问题[2]。这些不足之处在新生儿地贫筛查中尤为突出，所以建立合理有效的新生儿地贫筛查指标和筛查路径具有重要意义。本研究回顾性分析2018年6月1日至2019年6月30日在本院新生儿疾病筛查中心进行的地贫基因筛查患儿的资料，结合毛细管电泳法初筛血红蛋白(Hb)结果与血常规中红细胞参数[包括红细胞计数(RBC)、Hb、红细胞分布宽度(RDW)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、网织红细胞比例(Ret%)]相关数据,探讨血红蛋白A2(HbA2)和红细胞参数检测在地贫筛查中的意义，以期为临床提供参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2018年6月1日至2019年6月30日在本院新生儿疾病筛查中心进行筛查的新生儿30 554例，其中男18 724例、女11 830例，年龄3～28 d。首先经过Hb毛细管电泳法初筛地贫阳性新生儿878例，后经基因检测确诊地贫546例，随机选择其中123例(男68例、女55例)作为地贫组，另在经基因检测排除地贫的新生儿332例中随机选择115例(男64例、女51例)作为健康对照组。两组研究对象一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经本院伦理委员会审核批准，所有研究对象家属均知情同意。

1.2方法 按《新生儿疾病筛查规范》的要求采集血液后制片[3]。采用法国SEBIA CAPILRYS全自动高压液相毛细管电泳仪及配套试剂进行干血片中Hb定量分析。所有试验操作、质量控制及结果判断均严格按照试剂说明书进行。召回初筛阳性的新生儿进行血常规和基因检测。

1.2.1血常规检测 采用深圳迈瑞全自动血细胞分析仪BC-6800及配套试剂盒、质检品进行检测。所用分析系统每年参加湖北省临床检验中心室间质评成绩为优秀。

1.2.2基因检测 标本送往广州金域医学检验中心检测，采用中山医科大学科技开发有限公司提供的地贫基因诊断试剂盒，严格按试剂盒要求进行检测。

1.3观察指标 比较两组研究对象的RBC、Hb、MCV、MCH、RDW、Ret%的差异。根据地贫基因型将地贫组分为α-地贫组、β-地贫组、αβ复合型地贫组3个亚组(分别为90、30、3例)，比较以上3组和健康对照组的红细胞参数检测结果。分析MCV、MCH、HbA2单独及联合检测筛查地贫的结果，并计算相关诊断学评价指标。

1.4诊断标准 MCV参考值为97～112 fL，MCH参考值为29～36 pg，低于上述指标的参考值下限判定为地贫[4]。毛细管电泳法筛查结果：Hb Bart′s>0和HbA<9.4%分别为α-地贫和β表型阳性，HbA2降低或异常的血红蛋白为异常血红蛋白病。

2 结 果

2.1新生儿地贫初筛结果 对30 554例新生儿进行Hb毛细管电泳法，初筛阳性者共878例，检出率为2.87%。对初筛阳性的患儿进一步行基因诊断试验，确诊地贫患儿共546例。其中α-地贫检出401例，占73.4%；β-地贫检出142例，占26.0%；αβ复合型地贫检出3例，占0.6%。

2.2地贫组与健康对照组红细胞参数检测结果比较 地贫组的RBC、Hb、MCV、MCH低于健康对照组值，RDW高于健康对照组，差异均有统计学意义(P<0.05),而两组Ret%比较，差异无统计学意义(P>0.05),见表1。

2.3不同基因型地贫组与健康对照组红细胞参数检测结果比较 与健康对照组比较，β-地贫组的每项红细胞参数均差异有统计学意义(P<0.05)。与健康对照组比较，α-地贫组、αβ复合型地贫组的Hb、MCV、MCH差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.4MCV、MCH、HbA2单独及联合检测筛查地贫的结果 MCH筛查地贫具有最高的准确度，达83.2%，HbA2具有最高的灵敏度，为95.1%，而MCV、MCH、HbA2联合检测的特异度为94.8%，阳性预测值为93.5%。见表3。

表1 地贫组与健康对照组红细胞参数检测结果比较

表2 不同基因型地贫组与健康对照组的红细胞参数检测结果

表3 MCV、MCH、HbA2单项与联合检测筛查地贫的结果(%)

3 讨 论

由于新生儿地贫筛查的标本量大且采集标本不方便，对于基层医院检验科，利用红细胞参数或者Hb毛细管电泳法更为实用。本研究结果显示，地贫组RBC、Hb、MCV、MCH低于健康对照组，RDW高于健康对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，而地贫组的Ret%与健康对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。这与范小慧等[5]报道的结果一致，该研究中地贫组患者MCV和MCH水平明显低于非地贫组。通过基因分型后，比较3种类型地贫组红细胞参数发现，α-地贫组和αβ复合型地贫组的RBC与健康对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，但β-地贫组RBC与健康对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。其原因与地贫属于溶血性贫血有关，溶血性贫血一般具有较强的骨髓造血功能，机体处于轻度贫血而骨髓造血功能处于代偿状态时，RBC可正常，而当机体处于失代偿的中重度地贫时，因脾脏对异常红细胞清除及骨髓原位溶血等原因使RBC下降[6]。因此，β-地贫组RBC低于健康对照组(P<0.05)。RDW是反映红细胞体积大小离散程度的指标，RDW的升高表示红细胞大小差异增加。本研究显示，RDW在α-地贫组和αβ复合型地贫组中与健康对照组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，但在β-地贫组中RDW明显升高(P<0.05)。其原因为地贫属于小细胞均一性贫血，且RDW在轻型地贫中可表现为正常，而β-地贫可表现为红细胞异型和大小不均，可见靶形红细胞、环形红细胞和红细胞碎片[7]，因此RDW明显升高。MCV是贫血的重要诊断指标之一，该指标可用于诊断缺铁性贫血[8]，MCV降低，则提示患者可能伴有小细胞低色素性贫血及全身溶血性贫血等疾病。本研究结果显示，与健康对照组比较，α-地贫组、β-地贫组、αβ复合型地贫组的MCV、MCH差异均有统计学意义(P<0.05)，说明MCV、MCH变化可作为新生儿地贫筛查的重要指标。

HbA2是临床上常用于新生儿地贫的血液筛查指标[9]，本研究利用HbA2筛查出新生儿地贫878例，检出率为2.87%，由于HbA2检测方法的局限性，其特异度低，为67.0%，但通过MCV、MCH、HbA2联合检测，地贫筛查的特异度达94.8%，阳性预测值达93.5%，准确度达82.4%。因此，3项指标联合检测能够明显提高新生儿地贫的诊断能力。

综上所述，新生儿地贫患儿的大部分红细胞参数与健康对照组比较，差异有统计学意义。血常规检测并结合Hb毛细管电泳法(HbA2)检测，可有效提高新生儿地贫筛查的准确度，避免漏诊，具有较高的应用价值。