SDF-1及MMP-2在子宫颈癌的表达

赵凌昆， 吕红梅

(1.佳木斯大学临床医学院，黑龙江 佳木斯 154007；2.黑龙江中医药大学佳木斯学院，黑龙江 佳木斯 154007)

子宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，虽然由于子宫颈脱落细胞学检查的推广和普及，使许多癌前病变和早期癌得到早期发现及治疗，但其病死率仍居女性癌症病死率的第二位[1，2]，并且逐年呈年轻化趋势。在其发病过程中，肿瘤细胞的浸润转移是其死亡的主要原因。基质细胞衍生因子-1(SDF-1)作为趋化因子，在机体免疫反应，恶性肿瘤的浸润转移中发挥着重要作用[3，4]，是目前的研究热点。基质金属蛋白酶-2(MMP-2)是基质金属蛋白酶家族中一员，在肿瘤细胞介导的细胞外基质降解过程中起关键作用[5]，二者在宫颈癌中的相关研究甚少，故本实验应用免疫组织化学法检测MMP-2、SDF-1在宫颈癌中的表达，分析探讨二者在宫颈癌中表达的相互关系，为今后临床诊断及治疗提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集佳木斯大学附属第一医院2017-03～2018-03妇科手术切除，资料完整的55例子宫颈癌标本。全部病例均经病理证实且手术前未做任何治疗。≥45岁者44例，<45岁11例，平均年龄57.6岁；宫颈鳞癌48例，腺癌7例；Ⅰ～Ⅱ期33例，Ⅲ～ Ⅳ期22例；高中分化者37例、低分化者18例；淋巴结转移者17例，无淋巴结转移者38例。另选取子宫肌瘤全子宫切除术正常宫颈组织 15 例作为对照。

1.2 试剂和方法

免疫组化过程严格按照SP试剂盒说明书进行。主要试剂为鼠抗人SDF-1单克隆抗体，鼠抗人MMP-2单克隆抗体、通用型超敏S-P试剂盒等，均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。所有抗体稀释工作浓度为1：100,用 PBS代替一抗作为阴性对照。

1.3 判断标准

SDF-1蛋白阳性主要表达于细胞浆内，MMP-2蛋白阳性主要表达于细胞膜及细胞质内，呈棕黄色颗粒；每张切片高倍镜下随机选取5个有代表性的视野，100个细胞/每个视野，共计数500个细胞。根据阳性细胞百分率及染色程度分为：阴性无显色(-) ，阳性细胞所占百分比<10%以及呈棕黄色表达为弱阳性(+) ，阳性细胞所占百分比在10%～50% ，着色处于弱阳性与强阳性间为中等阳性() ，阳性细胞所占百分比>50%且着色为棕褐色为强阳性()。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0统计软件，进行χ2检验，以P<0.05为具有统计学意义。

2 结果

2.1 SDF-1及MMP-2在正常宫颈组织中及宫颈癌组织中的表达

免疫组织化学法检测SDF-1阳性表达主要位于细胞浆内，MMP-2阳性表达主要位于细胞膜及细胞质内，以鳞状细胞癌表达明显，呈淡黄色及深黄色颗粒(见图1～2) ；SDF-1在正常宫颈组及宫颈癌组中的阳性表达率分别13.3%及56.4%，具有统计学意义(P<0.05)。MMP-2在正常宫颈组及宫颈癌组间的阳性表达率分别为20%及61.8%，具有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 SDF-1 及MMP-2在正常宫颈组、宫颈癌组中的表达

图1 SDF-1在宫颈癌中阳性表达(×100)

图2 MMP-2在宫颈癌中阳性表达(×100)

2.2 SDF-1 及MMP-2在宫颈癌中的表达及与临床病理特征的关系

SDF-1及MMP-2在宫颈癌的表达与患者年龄、组织学类型无相关性(P>0.05)，与临床分期、组织学分化程度及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05)。见表2。

表2 SDF-1 及MMP-2在宫颈癌组织中的表达与肿瘤临床病理特征的关系

2.3 宫颈癌组织中SDF-1 及MMP-2表达间的相互关系

SDF-1及MMP-2在宫颈癌组织中表达呈正相关性(r=0.468，P<0.05)见表3。

表3 宫颈癌组织中SDF-1 及MMP-2表达的相关性

3 讨论

SDF-1是由骨髓基质分泌的一种小分子蛋白质的趋化因子，不仅能对嗜酸性粒细胞、中性粒细胞等细胞产生趋化作用，调节机体免疫反应及炎症反应，还能在肿瘤细胞的增值、迁移、侵袭及刺激血管生成等环节中具有重要作用[1～3]，其表达较为广泛，在人体大多数器官如肝脏、心脏、卵巢等均有表达[4]。近年来相关报道显示，肿瘤间质细胞和肿瘤细胞均可产生趋化因子[6]，SDF-1即是其中重要的一员，归属于CXC类趋化因子家族。CXCR4作为趋化因子CXC受体，二者亲和力极高，结合后能够激活下游多条信号通路，影响细胞因子的分泌[4]。在肿瘤细胞浸润转移的过程中，细胞基底膜的破坏及细胞外基质的降解是其必备条件之一，MMP-2是基质金属蛋白酶家族中的一员，活化后不仅可加速基底膜、细胞外基质的降解，还可通过诱导新生血管的生成和血管内皮细胞的迁移而促进肿瘤血管形成以及肿瘤侵袭和转移，是肿瘤浸润转移的生化基础[7～9]。

本研究结果显示，SDF-1及MMP-2在正常宫颈组织及宫颈癌组织中的阳性表达率具有明显差异，分别为13.3%、56.4%及20%、61.8%，具有统计学意义；在宫颈癌组临床病理各参数间，二因子的表达亦具有一致性，在临床Ⅲ～Ⅳ期者二因子的阳性表达率明显高于临床Ⅰ～Ⅱ期者(P<0.05)；在肿瘤细胞低分化组中二因子的阳性表达率明显高于高中分化组(P<0.05)，淋巴结转移组中明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)，说明SDF-1 及MMP-2蛋白的阳性表达与临床分期、组织学分化程度及有无淋巴结转移密切相关。在55例宫颈癌患者中，二者表达呈正相关，31例SDF-1表达阳性的病例中28例MMP-2表达亦阳性，高度提示二者在肿瘤细胞的发生发展过程中具有协同作用，共同促进了肿瘤细胞的增殖、迁移、浸润、转移。其可能机制为SDF-1诱导宫颈癌细胞MMP-2的表达，使肿瘤细胞间质中MMP的含量大幅度提高，加快了细胞外基质的降解及基底膜的破坏，促进了肿瘤细胞运动迁徙的能力，造成恶性肿瘤细胞的侵袭转移。

综上所述，SDF-1及MMP-2可作为子宫颈癌恶性程度的预测因子，对于子宫颈癌预后的评估及临床疗效的评价有指导意义。