儿童服用布洛芬混悬液时苯甲酸钠摄入量的测定

张志超，韩慧丽,苏莎莎

0 引言

布洛芬混悬液为解热镇痛药，通过减少前列腺素合成，使体温调节中枢的调定点下降，产生周围血管扩张、出汗散热而发挥解热作用[1]，主要用于儿童普通感冒或流行性感冒引起的发热。布洛芬混悬液为含2%布洛芬的多剂量包装口服液体制剂，执行标准为国家食品药品监督管理局国家药品标准WS1-(X161)-2003Z[2]，辅料中所用防腐剂为苯甲酸钠。

抑菌剂又称防腐剂，是抑制微生物生长的化学物质，多用于多剂量包装的制剂，以防止在正常的贮藏或使用过程中，由于微生物污染和繁殖，使药物变质而对使用者造成伤害[3]。苯甲酸钠具有较好的抑菌作用，是内服液体制剂有效的防腐剂[4]。因具有一定毒性，过量服用会对身体造成不良影响。本文考察按说明书规定服用布洛芬混悬液时，其中的苯甲酸钠是否会对儿童身体造成损害。

1 仪器与试药

1.1 仪器 U3000高效液相色谱仪，Thermo Fisher公司；BSA224S电子天平，北京赛多利斯公司。仪器均经检定合格，在检定周期内。

1.2 试剂和样品 苯甲酸钠标准品(Dr.Ehrenstorfer GmbH，G167299，98.94%)，色谱甲醇，赛默飞世尔科技(中国)有限公司；乙酸铵，色谱级，Dikma Technologies Inc.，实验用水为超纯水，电阻率18.2 MΩ.cm。

1.3 样品 在国家药品监督管理局网站“药品查询”下搜索“布洛芬混悬液”，共有11条记录，分属9个生产厂家[5]。购得7个厂家的药品，说明书中[成分]项均注明用到苯甲酸钠。为避免透露厂家信息，药品分别用代号A、B、C、D、E、F、G替代。

2 方法

参考GB 5009.28-2016《国家食品安全标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》，对样品中苯甲酸钠(以苯甲酸计)含量进行测定[6]。美国FDA药用辅料数据库中，苯甲酸钠用于口服混悬液时，最大使用浓度是37.88 mg/5 ml[7]，即7.58 mg/ml。以此为参考，判断样品中苯甲酸钠含量是否超标。WHO规定，苯甲酸钠的ADI为5 mg/kg[8]。计算患儿按药品说明书中[用法用量]最大用量服药时，摄入的苯甲酸钠是否超标。

2.1 苯甲酸钠测定方法

2.1.1 色谱条件 外标法定量。C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相：甲醇-0.02 mol/L乙酸铵(5∶95)，流速1.0 ml/min，检测波长230 nm，柱温30 ℃，进样量10 μl。

2.1.2 溶液的配制 对照品溶液的制备：精密称取苯甲酸钠0.119 6 g于100 ml容量瓶中，加水至刻度，定容，作为标准储备液(1 183 mg/L)。准确吸取储备液10 ml于50 ml容量瓶中，加水至刻度，定容，作为标准中间溶液(236.6 mg/L)。标准储备液和标准中间液4 ℃储存。

样品溶液的制备：准确量取2 ml样品于50 ml容量瓶中，加水约25 ml，于50 ℃水浴超声20 min，加水至刻度，摇匀，滤过，即得。

2.2 小儿服用布洛芬混悬液的用量 12岁以下小儿服用布洛芬混悬液的用量见表1。

表1 12岁以下小儿布洛芬混悬液用量

3 结果

3.1 苯甲酸钠含量测定结果

3.1.1 线性关系考察 准确吸取苯甲酸钠标准中间液0.5、1、2.5、5、10 ml，用水定容至10 ml，配制成浓度分别为11.83、23.66、59.15、118.3、236.6 mg/L的标准系列工作溶液。分别注入液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以混合标准系列工作溶液的质量浓度X为横坐标，以峰面积Y为纵坐标，进行线性回归，得制标准曲线Y=4.207 6 X+0.099 9(r2=0.999 8)。表明样品中苯甲酸钠浓度在11.83～236.6 mg/L范围内，峰面积与浓度线性关系较好。

3.1.2 精密度试验 取23.66 mg/L的对照品溶液，连续进样6次，测定峰面积并计算RSD。结果苯甲酸钠的RSD为0.18%，表明方法重复性良好。

3.1.3 检测限和定量限 采用信噪比法计算检出限和定量限。取5.91 mg/L的对照品溶液进样，计算信噪比。换算出信噪比为3∶1时的相应浓度为检出限，信噪比为10∶1时相应的浓度为定量限[9]。苯甲酸钠检出限为3.94 ng，定量限为12.46 ng。实验中测定苯甲酸钠的浓度符合方法学要求。

3.1.4 样品测定 7个样品中均检出苯甲酸钠。苯甲酸钠含量范围为0.97～3.86 mg/ml，平均含量为2.05 mg/ml。E药品添加最多，B药品添加最低，E用量为B的近4倍。具体含量见表2。

表2 样品中苯甲酸钠(以苯甲酸计)测定结果(mg/ml)

3.1.5 回收率试验 取样品C，含苯甲酸钠量为1.82 mg/ml。分别精密加入约相当于其80%、100%、120%浓度的苯甲酸钠对照品溶液，每个浓度制作3份。按“2.1.2”项样品溶液的制备下“供试品溶液的制备”处理，同法测定。苯甲酸钠平均回收率为102.7%，RSD为1.4%。

3.2 样品中苯甲酸钠含量与FDA最大使用浓度比较 由表2可知，7种药品中苯甲酸钠含量均<7.58 mg/ml。布洛芬混悬液中苯甲酸钠的用量符合FDA规定的最大使用浓度。

3.3 苯甲酸钠日摄入量计算结果 12岁以下儿童按体重分组，根据药品说明书中规定的最大用量，计算每日所服用布洛芬混悬液中的苯甲酸钠的含量。结果见表3。

表3 日最大用药量时摄入的苯甲酸钠计算结果

如表3所示，1～3岁、7～9岁、10～12岁的儿童在每日服用4次药品E时，每日摄入的苯甲酸钠均超过WHO规定的日最高摄入量。

4 讨论

4.1 防腐剂的用量应尽量控制在产生抑菌作用的最低有效浓度，此有效浓度以保证药品在使用和有效期内微生物限度合格为前提。防腐剂在规定的使用浓度范围内，一般不良反应极少发生；但若增加用量，有可能发生原发性刺激和过敏等不良反应[10-11]。《中国药典》2015年版四部中，通则0123规定，口服混悬剂可根据需要，加入适宜的抑菌剂，其品种和用量应符合国家标准的有关规定[9]。苯甲酸钠是《中国药典》2015年版收载的药用辅料、抑菌剂，用于布洛芬混悬液并无不当。但对于用量，尽管有资料提到应为0.1%～0.3%，但在我国药品标准中并未提及。同为口服液体制剂的合剂，在通则0181项下规定，使用苯甲酸钠时，用量(以苯甲酸计)不得超过0.3%[9]。为避免因药用辅料带来的安全性问题，建议在制剂通则中，结合给药途径、每日剂量、给药人群等因素，确定苯甲酸用量的限度。

4.2 从临床安全用药角度，测定药品中苯甲酸的含量具有实际意义。《中国药典》2015年版四部通则1121抑菌效力检查法，用于指导生产企业在研发阶段制剂中抑菌剂浓度的确定[9]。通过测定制剂的抑菌活性，可确定药品中防腐剂的最低有效杀菌或抑菌浓度是否合理，但对于药品中使用防腐剂的上限却无限制[12]。ICH也提出应制定防腐剂含量测定方法。建议我国药品标准中增加防腐剂含量测定的方法。

4.3 因药品标准中对于苯甲酸钠(以苯甲酸计)的用量没有明确规定，药品中添加量由生产企业自主研发决定，不同厂家布洛芬混悬液中苯甲酸含量差别较大，同一厂家不同批次的布洛芬混悬液中苯甲酸含量也有一定差别[13]。鉴于布洛芬混悬液为儿童常用药品，建议将其苯甲酸含量标准具体化，给出明确的限值，并列为布洛芬混悬液的检验项目[14]。