茉莉紫苏复合浓缩液对高血糖小鼠血糖影响的研究

程琳杰，吴荣书

（云南农业大学食品科学技术学院，云南昆明650201）

随着物质生活的不断提高，糖尿病发病人群有增加的趋势，目前糖尿病尚不能完全治愈，而针对性药物大多是由化学方法合成，虽会起到一定控制血糖的作用，但长期服用，也会同时出现一些副作用，如耐药性、器官的损害等[1]。现有研究证明，植物中所提取的多糖、黄酮等功能物质，对高血糖动物有降低血糖的功效，在达到有效控制血糖的同时，可降低对身体的危害性[2]。

茉莉花是一种木犀科素馨属植物，气味极香，是制作花茶的重要原料之一，还是重要的香精香料[3]。茉莉花具有消胀气、理气止痛、温中和胃、消肿解暑、强化免疫系统的功效，并对痢疾、腹痛、结膜炎及疮毒等具有良好的消炎解毒的作用[4]。近年来，对于茉莉花的主要研究集中在挥发油、脂肪类、黄酮、多糖类成分上。研究证明，多糖具有调节免疫、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降胆固醇、降血脂等功效[5]。基于目前的研究表明，茉莉花具有提高免疫力、预防心脑血管疾病等多种作用[6]。

紫苏含有较高的营养价值，茎、叶、籽均可食用，其叶中含有多种黄酮及黄酮苷类化合物，大量优质蛋白质，氨基酸种类多、含量丰富，其中的酚类物质，具有抗菌、消炎、延缓衰老、抑制肿瘤、降血脂、抗菌等作用[7]；同时还富有植物蛋白及多种微量元素。紫苏叶作为药食同源植物，被广泛用于医药、食品、香料等行业[8]。

目前尚未发现对于茉莉紫苏的有效物质进行粗提，并将粗提液进行浓缩、复合，对动物小鼠进行降血糖的实验研究，基于现状，本试验使用茉莉花与紫苏叶的复配浓缩液，对链脲佐菌素的高血糖小鼠模型进行实验，通过茉莉紫苏复合浓缩液的低、中、高3个剂量组对高血糖小鼠的饮食、体重、血糖及脏器指数的影响，证明茉莉紫苏复合浓缩液对高血糖具有明显降低作用，验证其降血糖功能，为保健食品进一步研究，提升食用鲜花产业奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

茉莉花：昆明中药材市场；紫苏叶：安徽多善堂药业有限公司；果糖（biosharp）：上海麦克林生物科技有限公司；清洁级昆明种雄性小白鼠 90 只，（20±2）g、链脲佐菌素：上海阿拉丁生化科技股份有限公司；二甲双胍格列本脲：亚宝药业四川制药有限公司。

1.2 试验仪器

粉碎机（JHF-250A）：昆明铁申商贸有限公司；超声波清洗仪（SK2200H）：上海科导超声仪器有限公司；酶标仪（WELL Read）：上海豫东科技有限公司；真空浓缩离心机（miVac Quattro）：上海精密科学仪器有限公司；三诺血糖测试仪（GA-3）：三诺生物传感股份有限公司；离心仪（TDL-50B）：上海仪器厂。

1.3 试验方法

1.3.1 茉莉紫苏复合浓缩液的制备

茉莉花破碎，按料液比1∶25（g/mL）加水，浸提温度75℃，浸提时间90 min，超声时间20 min进行提取，提取液在40℃下浓缩9 h，得到茉莉浓缩液；紫苏叶破碎，按料液比1∶20（g/mL）加水，浸提温度75℃，浸提时间40 min，超声时间40 min的条件进行提取，浓缩液在60℃下浓缩5 h，得到紫苏浓缩液；将得到的茉莉花浓缩液与紫苏浓缩液按照9∶1的体积比进行混合，复合浓缩液冷藏备用。

1.3.2 动物高血糖模型的建立

选择体质量为（20±2）g的昆明种雄性小鼠70只[9]，适应性喂养3 d，3 d后，随机取8只小鼠作为正常对照组，其余小鼠作为高血糖模型组，并将高血糖模型组的饮用水换成浓度为20%的果糖水，正常对照组饮食不变，继续喂养21 d后，断粮断水12 h，采用腹腔注射方法，对正常对照组小鼠腹腔注射生理盐水、高血糖模型组注射链脲佐菌素溶液[现配现用，低温保存，采用pH值为4.4的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液配制浓度为1.5%的链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）溶液]，1次/d，72 h后对除正常对照组外的其他组小鼠进行尾尖采血测血糖[10]，对血糖不达标的小鼠，继续采用相同的操作方法，采用三诺血糖仪测定小鼠血糖，选取空腹血糖值大于11.1 mmol/L的小鼠[11]进行实验。

1.3.3 分组设计

除正常对照组外，其余高血糖建模小鼠随机分为5组：模型组、给药组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组8只。低剂量组、中剂量组、高剂量组分别灌胃6、12、18 mL/（kg·d）[12]，给药组每天灌胃二甲双胍格列本脲（150 mg/kg）1次[13]，正常对照组和模型组分别灌胃等体积的生理盐水每日1次，连续28 d，各组给基础饲料和蒸馏水。分别在第0天、第14天、第28天，对各组小鼠测体重，并断尾取血，测定血糖，测血糖前，断粮断水12 h。每日在灌胃前，称量记录饮水量、进食量。

1.3.4 检测指标

分别于小鼠建模前、建模后、给药的第7天、第14天、第28天，断水断粮12 h，断尾取血，测定血糖值。给药28d后，小鼠摘眼球取血，收集血液，采用4000r/min、离心15 min，提取血清，测定甘油三酯（triglyceride，TG）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein，LDL-C）4项指标；解剖，取肝脏、脾、胸腺，生理盐水冲洗，滤纸吸干称量，记录脏器指数，内脏指数=内脏质量（mg）/小鼠质量（g）[14]。

1.3.5 数据分析

应用SPSS19.0软件，对数据进行方差分析。

2 结果与分析

2.1 茉莉紫苏浓缩液对小鼠饮水量、进食量及体重的影响

高血糖的小鼠，体态改变明显，毛发稀疏，体重与正常组比较增长缓慢或下降，出现多饮、多食、多尿的现象，与正常组相比，垫料更换更为频繁。在给药后，“三多”症状得到缓解，结果如表1、表2、图1所示。

表1结果表明，在灌胃开始的第1周，糖尿病模型组、给药组、低剂量组、中剂量组、高剂量组与正常对照组差异极显著，饮水量与正常组相比较，远多于正常小鼠，到第2周时，给药组、中剂量组、高剂量组与糖尿病模型组差异极显著，在第3周到第4周，给药组、低剂量组、中剂量组、高剂量组与糖尿病模型组差异极显著。

表1 茉莉紫苏混合浓缩液对小鼠饮水量的影响Table 1 Effect of jasmine perilla mixed concentrate on drinking water in mice

表2表明，在第1周，糖尿病模型组、给药组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的进食量与正常组都存在极显著性差异，在第3周到第4周，给药组、低剂量组、中剂量组、高剂量组与糖尿病模型组有极显著性差异，证明在不断给药期间，小鼠的“三多”症状有缓解。

表2 茉莉紫苏浓缩液对小鼠进食量的影响Table 2 Effect of jasmine perilla concentrate on feed consumption in mice

图1 茉莉紫苏浓缩液对小鼠体重的影响Fig.1 Effect of jasmine perilla concentrate on body weight of mice

模型组、低剂量两组小鼠体重增长缓慢，与正常组呈现极显著差异，给药组、高剂量组在第28天与模型组呈现极显著差异，证明在灌胃期间小鼠高血糖所引起的消瘦减轻。

2.2 浓缩液对小鼠血糖值及血清TG、TC、HDL-C、LDL-C的影响

茉莉紫苏浓缩液对小鼠血糖的影响见表3。

通过对比在建模前及灌胃第0天、第14天、第28天的血糖的变化值（如表3所示），正常组血糖水平保持稳定，建模后测量血糖，血糖值显示：模型组、给药组、茉莉紫苏复合液的低剂量组、中剂量组、高剂量组与正常组小鼠血糖有极显著差异，而与模型组无差异；实验末期测得血糖值，模型组血糖持续保持在较高水平，而低剂量组、中剂量组、高剂量组虽与正常组存在极显著差异，但与模型组相比较，血糖值均降低，中剂量组、高剂量组降低明显，证明茉莉紫苏复合浓缩液具有一定降低血糖的功效。

表3 茉莉紫苏浓缩液对小鼠血糖的影响Table 3 Effect of jasmine perilla concentrate on blood glucose in mice

茉莉紫苏浓缩液对小鼠血清指标的影响见表4。

表4 茉莉紫苏浓缩液对小鼠血清指标的影响Table 4 Effect of jasmine perilla concentrate on serum index in mice

实验结果显示，模型组的甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白均与正常组有显著性差异，低剂量组的TG、LDL-C虽与正常组有显著性差异，但明显小于模型组，并与模型组存在显著性差异，高剂量组的TG、TC、HDL-C、LDL-C均与模型组有显著性差异，证明茉莉紫苏复合浓缩液能够改善高血糖对小鼠造成的血脂紊乱。

茉莉紫苏浓缩液对小鼠脏器指数的影响见表5。

经研究发现，动物的脏器指数能够反映动物内脏病变情况和营养状态，长期高血糖则会造成肝脏受损，并影响机体的免疫功能[15]。如表5结果所示，模型组小鼠和低剂量小鼠肝脏指数与正常组呈极显著差异，明显要高于其他组别，并于解剖时观察到模型组小鼠的肝脏呈现肿胀状态。给药组、茉莉紫苏浓缩液的中剂量组、高剂量组的肝脏指数均下降，证明茉莉紫苏复合浓缩液对高血糖小鼠的肝脏具有保护作用。模型组的脾脏指数，由于高血糖的影响远小于正常组，给药组、茉莉紫苏浓缩液的低剂量组、中剂量组、高剂量组的脾脏指数均高于模型组，证明茉莉紫苏浓缩液对小鼠的免疫器官具有保护作用。模型组、给药组、低剂量组、中剂量组的胸腺指数虽与正常值有显著差异，但通过数据对比，低剂量组、中剂量组、高剂量组的胸腺指数均高于模型组，证明茉莉紫苏液对高血糖小鼠的胸腺器官有保护作用。

表5 茉莉紫苏浓缩液对小鼠脏器指数的影响Table 5 Effect of jasmine perilla concentrate on organ index of mice

3 结论

由于现代生活水平提高，生活方式的改变，高糖高脂食物的摄入逐渐增加，再加之久坐不动的工作和学习方式，导致糖尿病出现年龄下降，人口增多的趋势。糖尿病是由于胰岛素分泌紊乱或作用发生障碍引起的以高血糖为主要症状的疾病[16]。糖尿病及糖尿病带来的并发症，所造成的器官损害、功能减退、衰竭[17]，是现代医学亟待解决的问题，但目前临床药物的长期摄入，虽会起到降血糖的作用，同时会产生较多不良影响，基于此，从植物中提取有效物质开发成药物或功能食品，用于治疗或缓解高血糖症状具有极其重要的意义。

邹瑶等[18]基于从茉莉花渣中分离出茉莉多糖、多种二萜、三萜类物质，探讨茉莉花渣对四氧嘧啶建立的高血糖小鼠的降血糖作用，并得出有效结论，证明茉莉花渣多糖具有一定降血糖作用，并对高血糖造成的脏器损伤具有一定的保护作用。李项辉[19]通过试验证明紫苏叶提取物对来源于猪胰肠、大米酵母的α-葡萄糖苷酶有较好的抑制作用，并通过细胞试验，进一步得出紫苏降血糖的主要机理。

STZ是通过自由基损伤胰岛β细胞，胰岛素合成减少，诱发糖尿病，引起高血糖[20]。本试验基于对茉莉花、紫苏叶的研究现状，通过对链脲佐菌素造成的高血糖小鼠进行灌胃不同剂量的茉莉紫苏复合浓缩液，结果证明茉莉紫苏复合浓缩液能够有效降低小鼠血糖，高剂量能够显著降低小鼠 TG、TC、LDL-C，对HDL-C有升高效果，低、中高剂量组虽然与模型组没有显著差异，但数据对比显示，也同样可以降低高血糖小鼠的TG、TC、LDL-C，提高HDL-C，并且复合浓缩液可对小鼠内脏器官起到一定保护作用。试验证明茉莉紫苏复合浓缩液可以作为降血糖的保健食品来开发，但具体的作用机制还需要进一步研究。