化痰祛湿法对自发性高血压大鼠血管的保护作用*

刘方洲，张雪侠，杨丹丹，王晓丽，郭晓燕，王守富

(1.河南省中医药研究院，河南 郑州 450004； 2.黄河中心医院，河南 郑州 450004)

高血压是引起脑卒中、冠心病和肾功能损伤等的重要危险因素。2018年修订的《中国高血压防治指南》指出，我国成年人高血压患病率为27.9%[1-2]，且患病率与年龄呈正相关。高血压属中医学“眩晕”“头痛”等范畴[3]。很多中药都有不同程度的降压作用，单味中药有川芎[4]、牛膝[5]、天麻[6]、地骨皮[7]、葛根[8-9]、山楂[10]、丹参[11]、无患子[12]、沙苑子[13]、莱菔子[14]等，中药复方有天麻双膝颗粒[15]、补益肝肾方[16]、化痰祛湿降压汤[17]等。化痰祛湿法是王守富主任医师临床常用之法，处方主要由法半夏、陈皮、茯苓、白术、天麻、钩藤等组成。本研究以自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat，SHR)为研究对象，对化痰祛湿法的降压机制和对血管的保护作用进行探讨。

1 材料与方法

1.1 动 物

SPF级自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat，SHR)和近交系京都种Wistar(Wistar-Kyoto，WKY)大鼠，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号依次是1100111911000219，1100111911000221。

1.2 药品、试剂与仪器

化痰祛湿法组方：法半夏 12 g，陈皮 15 g，茯苓 15 g，白术 15 g，天麻 10 g，钩藤 30 g，蔓荆子 10 g，葛根 15 g，荷叶 10 g，川芎 15 g，泽泻 15 g。药材由河南省中医药研究院附属医院药剂科提供，均为正品。药材加8倍量水煎煮3次，每次1 h，最后浓缩至生药含量为0.2 g/mL。马来酸依那普利片，扬子江药业集团产品，批号18101611，10 mg/片； ET、AngⅡ、NO、SOD ELISA试剂盒，均为武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司产品，批号依次是2IQRK3KM4E、HQVQCZ12A3、H9YB8MBKW4、XG4A2K9Z3S。BP-2010 series 智能无创血压计，北京软隆生物技术有限公司产品；V-6振荡器、LX-800掌上离心机，均为其林贝尔仪器制造有限公司产品；JT-12J 自动组织脱水机、JB-L5石蜡包埋机，均为武汉俊杰电子有限公司产品； RM2016病理切片机，上海徕卡仪器有限公司产品；KD-P组织摊片机，浙江省金华市科迪仪器设备有限公司产品；DHG-9140A烤箱，上海慧泰仪器制造有限公司产品。

1.3 动物分组与给药

采用SHR作为模型鼠，随机分为模型对照组、依那普利组、1/10依那普利组、化痰祛湿高剂量、化痰祛湿高剂量+1/10依那普利组，以WKY大鼠作为空白对照组。各组分别给予相应剂量药物：依那普利组给予0.02 g/kg的依那普利， 1/10依那普利组给予0.002 g/kg的依那普利，化痰祛湿高剂量组给予中药2 g/kg，化痰祛湿高剂量+1/10依那普利组给予中药 2 g/kg+0.002 g/kg的依那普利，WKY组和模型对照组分别给予相应剂量的去离子水。每天上午灌胃西药，下午灌胃中药，连续给药8周。

1.4 检测指标

每给药两周进行1次血压测量。末次给药后，以质量分数为100 g/L的 水合氯醛麻醉，腹主动脉取血，离心分离血浆，采用ELISA试剂盒检测血管紧张素(angiotensin Ⅱ，AngⅡ)、一氧化氮(nitrous oxide，NO)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)、内皮素(endothelin,ET)的含量；取血后，分离胸主动脉，剔除脂肪组织，用多聚甲醛固定，进行苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining，HE)染色，观察胸主动脉组织病理学改变。

1.5 统计学方法

2 结 果

2.1 各组大鼠血压对比

与WKY组对比，模型对照组大鼠各个时期血压均升高，差异有统计学意义(P<0.05)，说明高血压模型成功。与模型对照组对比，依那普利组、1/10依那普利组、化痰祛湿高剂量组、化痰祛湿高剂量+1/10依那普利组的基础血压均没有统计学意义(P>0.05),说明具有可比性。从给药开始到给药8周，依那普利组、化痰祛湿高剂量+1/10依那普利组各组血压值均有不同程度的降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组大鼠血压对比

2.2 各组大鼠血清AngⅡ、NO、SOD、ET含量对比

与WKY组对比，模型对照组大鼠血清中AngⅡ、ET含量升高，SOD、NO含量降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组对比，依那普利组和化痰祛湿高剂量+1/10依那普利组的AngⅡ、ET含量降低、NO含量升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；1/10依那普利组和化痰祛湿高剂量组的4个指标无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 化痰祛湿法对SHR大鼠血清AngⅡ、NO、SOD、ET含量对比

2.3 各组大鼠胸主动脉组织病理学表现对比

WKY组大鼠血管弹性膜排列整齐，血管壁各层膜结构层次清晰，中膜无增厚现象。模型对照组SHR弹性膜排列紊乱，层数增加，与WKY组对比，中膜显著增厚，部分出现内膜损伤和外膜炎症浸润现象。各给药组组织病理学改变较模型对照组均有明显减轻，其中以化痰祛湿高剂量+1/10依那普利组和依那普利组效果较为显著。见图1。

图1 各组大鼠胸主动脉组织病理学表现对比(HE染色，×400)

3 讨 论

化痰祛湿法主要用于治疗痰湿壅盛所致头昏、头沉、头重如裹、头痛、胸闷、呕吐痰涎、心悸、失眠等症，也可用于高血压、脑动脉硬化症及高脂血症见上证者。化痰祛湿方为痰夹风邪上扰所致眩晕、头痛而设，总的病机是脾虚生湿，湿痰壅遏为患。方中半夏性温味辛、燥湿化痰，降逆止呕，意在治痰；天麻味甘性平，入厥阴经，擅长平肝息火而止眩，旨在治风。两味相伍，化痰息风，为治痰夹风邪上扰所致眩晕、头痛之要药。

本研究选用SHR为研究对象，其是由有显著高血压症状的远交WKY雄性鼠和带有轻微高血压症状的雌性鼠交配所得到的子代，子代又通过近交连续筛选最终得到的具有自发高血压性状的大鼠[18]，SHR育成后血压达200 mmHg以上。此鼠除有高血压自发率为100%特点外，还有高血压性心血管病变，适于人类的原发性高血压研究[19-20]。

血管纤维化是高血压对靶器官危害加剧的病理基础，血管纤维化组织病理学特征是弹力膜排列紊乱，中膜显著增厚。本实验中，模型对照组大鼠胸主动脉弹力膜排列紊乱、中膜增厚，各给药组的这些组织病理学改变均减轻，其中以依那普利组和化痰祛湿高剂量+1/10依那普利组效果较为显著，提示化痰祛湿法对SHR靶器官血管损伤有一定的保护作用，且与西药联用效果更好。

AngⅡ是肾素-血管紧张素系统的主要活性物质，是心血管功能重要的调节剂。NO是主要的舒血管物质，具有舒张血管、清除氧自由基及抑制血小板聚集的作用[21]。SOD是机体内天然存在的超氧自由基清除因子，可以转化有害的超氧自由基。ET是目前为止发现的最强缩血管物质，是引起与血管损伤相关疾病共同的致病因素。本实验发现，与模型对照组对比，依那普利组和化痰祛湿高剂量+1/10依那普利组的AngⅡ、ET含量降低、NO含量升高，差异有统计学意义(P<0.05);1/10依那普利组和化痰祛湿高剂量组血清中各个指标均有相应趋势。此提示化痰祛湿法降压的机制可能与调节AngⅡ、ET和NO含量有关。少量的AngⅡ能使活性氧减少，减少氧化应激的损伤，使NO含量升高，发挥舒血管的作用，从而达到降低血压的作用。

综上所述，化痰祛湿法与依那普利联用可以降低血压，同时减少了西药依那普利的用量，提示该法与西药联用效果更好。