鸡全身骨骼标本的制作

2020-10-15谈晓梅王亚轲牛德彪惠旭洁韩若羽郑吉昌柳东阳杨雪峰

现代牧业 2020年3期

谈晓梅，王亚轲，牛德彪，惠旭洁，韩若羽，郑吉昌，柳东阳，杨雪峰

(河南科技学院动物科技学院，河南新乡 453003)

骨骼作为脊椎动物体内矿化组织，具有硬度和弹性，在自然环境中可以长期保存，是解剖学、古生物学、进化生物学等学科的重要教学工具。保存良好的骨骼标本是研究脊椎动物的生命演化历程、探索脊椎动物之间同功和同源器官变化的直观材料。在动物解剖学的传统教学中，课堂讲授多以文字描述和图片讲解为主，授课过程较抽象，致使学生对课程内容理解困难，学习兴趣不高，教学效果不够理想[1]。动物骨骼标本作为形象、直观的教学材料，其可视性强，在活跃课堂气氛、增强学生的理解能力等方面具有明显的促进作用，有助于学生及时掌握每种骨的名称、位置、形态、组成和功能等。

动物骨骼标本制作的方法主要有土埋法、虫蚀法、沤制法、煮制法及晾晒法等[2]，这些方法普遍具有制作步骤较繁琐、用时较长、标本质量差等缺点。笔者以雄性成年健康的鸡为试验动物，采用化学腐蚀法制作了鸡的全身骨骼标本。

1 材料

1.1 试验动物

雄性白羽肉鸡，6周龄，1.65 kg，由河南科技学院动物科技学院实验动物中心提供。

1.2 主要试剂

NaOH，天津市光复科技发展有限公司生产。H2O2，郑州派尼化学试剂厂生产。洗洁精，广州立白企业集团有限公司生产。粘鞋胶，台州路桥特尔特胶粘剂厂生产。

2 制作方法

2.1 处死

首先拍摄正常姿态的鸡只照片，以备后期整理骨骼时作为参考，然后采用口腔内桥静脉放血法处死鸡只。

2.2 剥皮

将鸡置于80～85 ℃热水中浸泡，注意及时翻动，褪干净全身被毛并将全身被皮剥去。

2.3 去内脏

鸡只仰卧，使用手术剪从肛门前1～2 cm处沿腹中线剪开腹壁肌肉至胸骨龙骨突前，然后沿最后一对肋骨的后缘向一侧切开，此时露出胸腔和腹腔的内脏器官,把内脏器官逐一摘除后用清水冲洗干净[2]。

2.4 剔肉

初步粗剔只需把大块肌肉基本剔除即可。将去除内脏的鸡放在解剖盘中，先从龙骨突一侧小心切除胸大肌和胸小肌，然后依次剔掉前肢骨、后肢骨上的大块肌肉。粗剔完成后换用小解剖剪进行细剔。将骨头上剩余的细肉用小解剖剪尽可能剔除，剩余残肉与骨骼黏附较紧，使用牙刷和镊子清理骨骼表面，最后用清水冲洗残渣[3]。

2.5 拆骨

把鸡骨骼整体拆分为头骨、躯干骨、前肢骨、后肢骨四部分。首先，从头部和颈部连接处把头与颈部拆开;其次，把前肢骨(鸡翅)和后肢骨分别拆掉，前肢骨拆分为肩带部、臂部、前臂部、前脚部，后肢骨拆分为骨盆带、股部、小腿部和后脚部。一定要注意区分前后肢的左右。为了方便记忆，可以用纱布包住，并用标签进行标记。剩余部分即为躯干骨，拆分为颈部骨、胸部骨、腰荐部骨和尾部骨。

2.6 腐蚀

将各部位骨分别浸泡在不同浓度的NaOH溶液内处理不同时间(表1)。观察骨骼的变化,处理时间到时把骨及时捞出，用自来水冲洗后再用刷子刷洗粘在骨上的肉。用解剖针把股骨钻孔，再用10 mL注射器吸取自来水反复冲刷，把骨腔内的骨髓清洗干净。

表1 不同部位骨骼的处理浓度和时间

2.7 脱脂

骨骼带有较多油脂，若要长期保存，必须进行脱脂。本试验采用生活中常用的洗洁精脱去油脂。将腐蚀好的骨骼用清水洗干净并晾干，然后浸入10%洗洁精水溶液中浸泡12 h，注意溶液一定要淹没骨骼。

2.8 漂白

将脱脂后的骨骼先放入清水中洗干净并晾干，然后放入5%H2O2溶液中浸泡2～7 h。不同骨骼漂白所需要的时间不同，因此要时刻注意观察骨骼的变化。为尽量避免连接关节的软骨和韧带断裂而造成骨骼散落[4-5]，要及时收取骨骼。

2.9 串装

骨骼漂白后用清水冲洗，捞出放在通风阴凉处晾干，并按骨骼的正常结构将不同部位的骨摆放在一起。首先，量取鸡的长宽高，按此准备标本架。后肢骨用钢丝串起并按照鸡的正常姿态折成一定的角度。椎骨从后向前串连，首先由尾椎穿入钢丝，经腰荐骨、胸椎穿入颈椎，最后从第一颈椎处穿入颅骨枕骨大孔，将钢丝尾端向上折起，以防脱出，之后再用粘鞋胶将头骨和第一颈椎粘接，再按家鸡站立姿势安装前、后肢骨[6]，最后，将肋骨按摆放顺序用细铁丝和粘鞋胶固定于胸椎上，同样将胸骨固定在肋骨上。

2.10 固定

将已经串装成型的骨骼标本固定在木板上。在头颈部以及肋骨中间各用一根细木棍支撑，防止骨骼塌陷。

3 结果

制作的鸡全身骨骼标本解剖结构完整、形态逼真、立体感强、骨块洁白、自然美观(图1)、易于保存、经济实用。

图1 鸡的全身骨骼标本

4 讨论

4.1 试验鸡的选择

制作鸡全身骨骼标本时应选择品种、性别、年龄、体重等适宜的鸡。品种方面选用蛋鸡较好。性别以雄性为佳，雄性骨骼强健，做出的骨骼标本质量较好。年龄以成年较好，因为幼龄鸡的骨骼发育未完成，骺软骨还未形成骺线，干骺端未能愈合，制作过程中容易发生干骺分离[7]，从而影响骨骼标本的整体质量，但是也不能选择年龄过大的鸡，因为这种鸡普遍会出现骨质疏松，且红骨髓含量过少，将导致做出的骨骼标本色泽偏黄，保存时间过长还会发霉变黑。体重适中，太肥的鸡脂肪较多，不好处理，太瘦的鸡骨骼发育不良，做出的标本质量较差。本试验就地取材，选用的是学院其他课程实验所剩余的肉鸡，变废为宝，节约了试验成本。

4.2 鸡的处死方法

处死鸡要选择合适的方法，以保证鸡全身骨骼的完整性，不能够损伤任何一处软骨，所以不能棒击。注射药物致死或者使用乙醚使其窒息而死可能会影响到骨骼的质量，且在操作中存在安全隐患。颈静脉放血的处死办法既可保证鸡骨骼的完整，又可防止骨内淤血[2, 8]。本试验采用切断口腔桥静脉放血的方法处死鸡只，保存了鸡身体的完整。

4.3 腐蚀

传统的腐蚀方法主要为水煮法，此方法只能去除骨骼表面的肌肉，而且不好把控水煮时间，时间过短肌肉难以剔除，时间过长又容易损伤骨骼。本试验采用NaOH溶液浸泡腐蚀法代替传统水煮法处理骨骼标本。NaOH一方面能腐蚀各处残肉，另一方面能水解脂肪组织，水解产物经冲洗即可[2,9]。该处理方式对环境破坏较小，不会产生有害气体[10]。由于不同位置的骨密度和硬度具有差异，所用的NaOH溶液浓度也不同，浓度过高，易导致骨质损伤，骨骼表面出现许多针尖样的小孔，浓度过低，骨膜上的碎肉及软组织的腐蚀效果较差，不易剔除[11]。本试验采用低浓度NaOH溶液腐蚀的方法不仅操作简单，时间短暂，安全性高，对骨质的损伤小，而且还有少许脱脂的效果。

4.4 脱脂

制作完成的骨骼标本若想长久保存，必须进行彻底脱脂。脱脂不完全，时间长了骨骼会溢出油脂，散发腐臭味。实践中，常用二甲苯、汽油、乙醚等有机溶剂作为脱脂剂[12]，这几种有机溶剂去除油脂的能力较好，但不容易把控，很容易过度脱脂，会出现骨质流失、骨骼酥脆、不易保存等问题，且有机溶剂危害人类健康并污染环境。本试验使用洗洁精进行脱脂处理，不但脱脂效果好、成本低廉、无污染，而且较其他脱脂方法更安全。

4.5 漂白

漂白骨骼的目的是显现骨骼钙盐白色，增加美观度。漂白剂主要有H2O2、过氧化钠、过氧化苯甲酰、次氯酸钠、84消毒液和硫磺等[13]，尤以H2O2最为常用，其漂白原理是H2O2释放出的活性氧能破坏骨中原有色素的共轭状态，使其脱离骨骼，形成水溶物而漂白[2, 14]。经过漂白后的骨骼标本色泽均匀，骨色洁白，可以长期保存。骨骼标本漂白的难点在于控制药物的浓度和时间，浓度高或处理时间长，对骨质本身造成损伤，脆性增加，不易保存；浓度低或时间短，骨骼附着的杂物处理不彻底，标本白度不够，达不到预期效果。本试验采用5%H2O2进行漂白，并随时根据骨骼的洁白度捞出[8, 9]。该方法既保护了禽类细小骨骼的骨质，也使得大块骨骼漂白完全。在化学处理后，将标本置于阳光下晾晒，可充分利用太阳光中的紫外线对骨块继续漂白，会使标本白色更纯净，外观更悦目。