3种常用民族药减肥消脂作用的筛选研究

何鹏飞 张娅 王胤骁 夏海梅 张菊 高敏

摘要：目的 选取3种常用云南民族药（藤茶、火棘、青刺尖），通过高脂饮食诱导的方法，建立肥胖动物模型，应用活鼠组分分析的方法，对动物的体脂含量等各项指标进行连续监测并进行比较，从而筛选具有明显减肥消脂作用的药物。方法 雄性SPF级C57BL/6J小鼠94只随机分为正常对照组、高脂模型组、阳性对照组和3个民族药给药组。每周测量、记录小鼠的体重、脂肪重量，喂养7周后比较体质量、体脂含量、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和Lee's指数等指标。结果 藤茶、青刺尖两种药物能降低小鼠体脂含量和Lee's指数，一定程度控制体质量增长。结论 藤茶、青刺尖具有一定的减肥作用效果。

关键词：肥胖;民族药;活鼠组分分析

中图分类号：R29 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2020）08-0071-04

【Abstract】Objective： To select three commonly used national medicines （Vine tea， Pyracantha， Green thorn tip） from Yunnan ethnic medicine and establish an obese animal model through high-fat diet induction. The live mouse component analysis was used to continuously monitor and compare the various content indicators of the animal body fat so as to screen drugs with obvious weight loss and fat elimination effects. Methods： 94 male SPF C57BL/6J mice were randomly divided into a normal control group， a high-fat model group， a positive control group and 3 ethnic drug administration groups. The body weight and fat weight of the mice were measured and recorded every week， and the body weight， body fat content， serum total cholesterol （TC）， triglyceride （TG） and Lees index were compared after 7-weeks feeding. Results： Vine tea and Green thorn tip could reduce the body fat content and Lees index of the mice and control the weight gain to a certain extent. Conclusion： Vine tea，Green thorn tip have a certain effect of weight loss.

【Key words】obesity， ethnic medicine， live mouse component analysis

随着社会经济迅速发展，人们的生活水平不断提高，膳食结构和生活方式也发生了改变，往往导致营养过剩，造成全身性脂肪过量积累，即“肥胖”。美国医学会于2013年正式把肥胖归类为疾病，并指出“在过去20年，肥胖的成年人加倍，肥胖的儿童也在一个世代增加了两倍” [1]。2016年知名医学杂志《柳叶刀》发表了全球成年人体重调查报告，报告指出：目前世界上胖子的数量已经超过了瘦子，而中国的肥胖人口超过美国列首位[2]。肥胖已成为世界性的公共卫生问题。同时，现代研究表明：肥胖不仅是一种疾病，而且也是一种危险因素，由于肥胖患者对胰岛素、瘦素的敏感性下降，可能加重血脂代谢紊乱[3]，另外，肥胖可导致包括心血管疾病（心脏病、脑卒中）、2型糖尿病、肌肉骨骼疾病（骨关节炎等）、消化系统疾病及某些癌症在内的诸多疾病、并发症及过早死亡[4]。

云南是动植物王国和多民族省份，有着丰富的天然药物资源，千百年来各族人民积累了丰富的防病治病经验，形成以傣族、彝族、藏族医药等为主干的独特的云南民族医药体系。研究民族药治疗肥胖，筛选和开发具有良好减肥消脂作用的民族药，结合目前人类健康的需求具有较好的应用前景。

本项目通过选取收载于2005版《云南省中药材标准》，并且文献研究有降血脂作用的常用3种云南民族药藤茶[5]、火棘[6]、青刺尖[7]（药材植物基源见表1），通過高脂饮食诱导的方法，建立肥胖动物模型，应用活鼠组分分析的方法，对动物的体脂含量等各项指标进行连续监测并进行比较，从而筛选具有明显减肥消脂作用的药物。为民族药基础研究、新药开发研究、临床实践提供有益参考与崭新思路。

1 试验材料

1.1 动物 健康SPF级雄性C57BL/6J小鼠，6周龄，购自北京华阜康生物科技股份有限公司，许可证号SCXK（京）2014-0004。

1.2 饲料 低脂饲料（D12450B Rodent Diet with 10kcal% Fat，批号：17100276）;高脂饲料（D12492 Rodent Diet with 60kcal% Fat，批号：18012208i），均购自美国Research Diets公司。

1.3 药品与试剂 奥利司他胶囊，重庆华森制药股份有限公司，批准文号：国药准字H20103180，批号：170303。藤茶购自西双版纳州傣医院;青刺尖购自丽江贡和实业有限公司;火棘购自楚雄老拨云堂彝醫馆。总胆固醇（totalcholesterol，TC）检测试剂盒（批号：1017041）、甘油三酯（tri-glyceride，TG）检测试剂盒（批号：0917041）购自迈克生物股份有限公司。

1.4 仪器 Bruker minispec LF90活鼠组分分析仪（德国布鲁克公司）;日立7100全自动生化分析仪（日本日立公司）;BS2000S电子分析天平（赛多利斯学仪器（北京）有限公司）;TGL-16B型台式离心机（上海安亭科学仪器厂）。

1.5 实验环境 云南省中医中药研究院IVC独立送风系统，实验动物使用许可证号：SYXK（滇）2017-0003，温度20℃～26℃，湿度40%～60%。

2 实验方法

2.1 药材的处理 选取无虫蛀、无霉变的药材，粉碎成粗粉，分别加蒸馏水，固液比1：10，浸泡1h，采用索式提取法，提取2h，收集药液，过滤，低温浓缩至1.0g生药/mL浓度，4℃保存备用。

2.2 分组及饲养 选取雄性C57BL/6J小鼠，体重18～22g，适应性饲养5 d后，随机分为6组，分别为正常对照组（ZC组）、模型组（MX组）、阳性组（YX组）、藤茶组（TC组）、火棘组（HJ组）和青刺尖组（QC组）。采用高脂饮食诱导建立肥胖动物模型的方法[8]，其中正常对照组14只，采用D12450B低脂饲料喂养;其余各组每组16只，采用D12492高脂饲料喂养，自由饮水，喂养周期为7周。实验期间每日观察各组小鼠精神状态、活动情况、饮水、饮食、粪便及毛色等基本状况。

2.3 给药 每天上午给药一次，每组动物均采用经口灌胃方式给药。正常对照组、高脂模型组，灌胃给予饮用水;阳性对照组给予奥利司他胶囊，按照成人（60kg计）每日临床用量360mg/d，剂量按体表面积等效剂量换算比率换算，小鼠给药剂量为46.8mg/kg，试验采用3倍剂量，即140mg/kg。3种供试药物给药组，给予1.0g生药/mL浓度药液。各组给药体积均为20 mL/kg。

2.4 体质量和体脂含量测定 实验正式开始后，每周测量一次各组小鼠体质量，利用Bruker minispec LF90Ⅱ活鼠组分分析仪检测各组小鼠体脂含量。

2.5 血清指标、Lee's指数、体质量增加率和体脂含量增加率测定 第7周体脂检测结束后，各组小鼠禁食不禁水12h，股动脉取血，静置1h，3000rpm离心5min，取上清液，按试剂盒操作说明书测定TC、TG含量。用电子游标卡尺测量小鼠体长（从鼻尖到肛门的距离），根据公式Lees指数=;体质量增加率=（试验结束时体质量-试验前体质量）/试验前体质量×100%;体脂含量增加率=（试验结束时体脂含量-试验前脂肪含量）/试验前体脂含量×100%，计算Lee's指数、体质量增加率、体脂含量增加率。

2.6 统计学分析 所有数据均以均值±标准差（x±s）表示，应用SPSS19.0统计软件进行统计分析，采用独立样本t检验法比较各组小鼠肥胖指标的变化，P<0.05为差异有显著性统计学意义。

3 结果

3.1 实验期间各组小鼠状态 实验期间各组小鼠精神状态未见异常。正常对照组小鼠反应灵敏，毛发光洁。模型组小鼠，高脂饲料喂养一段时间后，出现活动量减少、毛发亮度减退的现象。各给药组小鼠，灌胃给药后，小鼠毛发亮度明显改善，活动量增加，精神状态好转。

3.2 药物对小鼠体质量的影响 试验开始前，各组小鼠体质量无明显差异（P>0.05），至试验结束，各组小鼠体质量都呈正增长。从第4周开始，正常对照组（ZC组）体质量与模型组（MX组）出现明显差异（P<0.05），从第6周开始，藤茶组（TC组）体质量与模型组出现明显差异（P<0.05）。数据见表2。

3.3 药物对小鼠体脂的影响 试验开始前，各组小鼠体脂含量无明显差异（P>0.05）。从第2周开始，正常对照组（ZC组）体脂含量与模型组（MX组）出现明显差异（P<0.01）;从第6周开始，藤茶组（TC组）体脂含量与模型组（MX组）出现明显差异（P<0.05）;从第2周开始，青刺尖（QC组）体脂含量与模型组（MX组）出现明显差异（P<0.05）。TC组和QC组，2个给药组体脂含量降低，且与MX组出现明显差异后，至试验结束，一直保持。数据见表3。

3.4 药物对小鼠血清指标、Lee's指数、体质量增加率和体脂含量增加率的影响 正常对照组（ZC组）、青刺尖（QC组）的TC、TG、Lee's指数均低于模型组（MX组）（P<0.05）;火棘组（HJ组）的TG、Lee's指数均低于模型组（MX组）（P<0.05）;藤茶组（TC组）Lee's指数低于模型组（MX组）（P<0.05），但TC高于模型组（MX组）（P<0.05）。数据见表4。

4 讨论

青刺尖，虽然没有明显降低小鼠体质量，但结合体质量增加率分析，一定程度上能控制体质量的增长。同时，能有效降低小鼠体脂含量、TG 水平和Lee's指数;藤茶可明显降低小鼠体质量、体脂含量和Lee's指数，在控制TC水平方面有待进一步验证;火棘可降低小鼠TG 水平和Lee's指数。藤茶、青刺尖，两种药物都具有一定的减肥作用效果，今后可作为新药开发研究的方向和选择。

阳性组（YX组）TC、TG高于模型组（MX组），可能与其减肥作用效果和机制有关[9]，但其降低小鼠体质量、体脂含量和Lee's指数的作用仍与模型组（MX组）有显著差异（P<0.05）。

活鼠组分分析是运用时域核磁共振（TD-NMR）技术，通过在核磁共振成像（MRI）中产生的反差规律，基于脂肪和肌肉各自的弛豫时间的差别来进行分析，以提供活体动物脂肪组织、肌肉组织和体液的分析。通过该项方法的运用，对模型动物的体脂含量等各项指标进行连续监测并进行比较，尚属首次，希望为减肥药物的研究提供新的思路和方法。

参考文献：

[1]赵兴旺，周慢，朱宇溪，等.陈秋教授“以通为法”并巧配桑叶荷叶治疗肥胖经验[J].云南中医中药杂志，2018，39（5）：3-5.

[2]Angelantonio E D，Bhupathiraju S N，Wormser D，et al.Bodymass index and all-cause mortality：individual-participant-dataMeta-analysis of 239 prospective studies in four continents[J].Lancet，2016，388（10046）：776.

[3]李俊賢，张旭，王志祥，等.肥胖并发高脂血症的中医药治疗进展[J].云南中医中药杂志，2018，39（9）：91-93.

[4]姜勇.我国成人超重肥胖流行现状、变化趋势及健康危害研究[D].北京：中国疾病预防控制中心，2013.

[5]陈玉琼，倪德江，程倩，等.藤茶总黄酮及二氢杨梅素降血脂作用研究[J].茶叶科学，2007，27（3）：221-225

[6]侯建军，薛慧.火棘对高脂饮食大鼠血脂和血液流变学影响[J].中国公共卫生，2002，18（9）：1059—1060

[7]杨妍，刘刚，张晓喻，等.青刺尖茶对高血脂症小鼠降脂的效果[J].食品工业科技，2015，36（13）：361-363

[8]石林林，王源，冯怡.麦冬多糖MDG-1对膳食诱导肥胖模型小鼠肠道益生菌群多样性影响的研究[J].中国中药杂志，2015，40（4）：716-721.

[9]刘井如，季宇彬，陈明苍.奥利司他对营养性肥胖大鼠的减肥作用[J].中国实验方剂学杂志2013，19（7）：186-188. [ZK）]

（收稿日期：2020-04-10）